固定若想得到理想的ICC染色結果、正確地判斷抗原物質在組織細胞內的位置,除需有良好酶和抗體外,保持組織細胞內抗原物質的不動性(Immobility)和免疫活性也是至關重要的。換言之,如果抗原物質在組織細胞間彌散、丟失或失去免疫活性,無論如何努力染色都是徒勞的,所以說固定是ICC染色中非常重要的一環(huán)。ICC與其它組織學技術不同,除要求保存良好的結構外,還需保存組織抗原的免疫活性。一般認為,新鮮組織能夠比較大限度地保存組織抗原的免疫活性,但結構較差,易出現抗原彌散丟失現象。Cumming(1980)報告,不固定的組織切片ICC染色時,環(huán)鳥苷酸含量丟失80%以上免疫組化博士團隊專門為您打造屬于您的服務。福建免疫學免疫組化機構電話
染色免疫組化可以輔助病理診斷、指導、評估預后,所以在做免疫組化過程中的質控問題處理尤其重要[1]。隨著免疫組化試劑新種類不斷出現及方法的改進,特別是即用型試劑盒的出現,使抗體的標記更加簡便、快捷,更加規(guī)范化。免疫組化標準化染色技術是一項實驗性很強的技術,任何一個環(huán)節(jié)出現問題,都可以直接影響免疫組化結果,
【摘要】目的研究CEA免疫組化染色在檢測系膜微轉移及環(huán)周切緣(CRM)侵犯方面的價值。方法選取經纖維結腸鏡及病理證實為直腸*病人40例,應用大組織切片技術對術后標本處理,分別行常規(guī)染色及CEA免疫組化染色,比較分析兩種染色方法在檢測系膜微轉移及CRM侵犯方面的價值。結果CEA染色檢測**浸潤程度大于常規(guī)病理染色,差異有性(t=5.2**<0.001)
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是否有效的祛除了內源性酶和生物素 應注意的是,并不是每一種組織均需要祛除內源性酶和生物素,但對于內源性酶和生物素含量豐富的組織如肝臟、腎臟等,如染色效果不佳,均考慮此原因。處理方法為:(1)滅活堿性磷酸酶:常用的方法是將左旋咪唑(24mg/ml)加入底物液中,并保持pH值在7.6~8.2之間,即能祛除大部分內源性堿性磷酸酶,對于仍能干擾染色的酸性磷酸酶,可用50mmol/L的酒石酸;(2)飽和處理內源性生物素:消除內源性生物素的方法是事先滴加親和素以飽和內源性生物素,使之不再有剩余的結合位點,具體操
實驗為例
從我接觸的很多本科生和研究生中發(fā)現,他們的確是免疫組化“新手”,他們只注重如何做和較好終的結果,但對為什么這樣做不太感興趣。他們常按照網上所說的方法,摸索好的抗體濃度和條件后做出很漂亮的染色結果后,他們就認為自己已經掌握了免疫組化方法了,結果不求上進,更換一種新抗體后或實驗出現異常結果后就很難做出來了。當然,免疫組化對于我來說,做過很多,但也不能說什么都會,只不過我做的多了,失敗多了和思考多了,可能比新手多了解一些其中的訣竅,拿來與大家進行分享。此外,我個人經驗不可能面面俱到,還需要更多有經驗的高手一起分享、糾正和補充。在這里。
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物質所具有的抗原性主要由分布在抗原表面的抗原決定簇決定。固定液的固定對免疫組化的正確結果極其重要,此液能使抗原保存良好。抗原修復的好壞直接影響著免疫組化檢測結果的可靠性。在進行免疫組化時并非所有的抗原都要進行抗原修復,抗原性保存良好或基本保存者不需要修復。目前抗原修復的方法主要有蛋白酶消化法、硼氫化鈉(NaBH4)修復法和熱修復法。較常用的是熱修復法,尤其是細胞核抗原經熱修復后,其染色效果特別好。所以我們必須清楚影響抗原性的因素及各種抗原修復的方法,嚴格按照抗體說明書進行抗原修復。鑒于抗原修復時間的方法較多,在實際工作中,究竟選用何種抗原修復法,應根據抗原抗體種類予以選擇,必要時可以多種方法同時使用,這樣使其更具有針對性,標記結果更理想。上海免疫組化,HE染色,免疫熒光找融享生物科技有限公司。內蒙古免疫組化機構哪里有
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物質所具有的抗原性主要由分布在抗原表面的抗原決定簇決定。固定液的固定對免疫組化的正確結果極其重要,此液能使抗原保存良好。抗原修復的好壞直接影響著免疫組化檢測結果的可靠性。在進行免疫組化時并非所有的抗原都要進行抗原修復,抗原性保存良好或基本保存者不需要修復。目前抗原修復的方法主要有蛋白酶消化法、硼氫化鈉(NaBH4)修復法和熱修復法。較常用的是熱修復法,尤其是細胞核抗原經熱修復后,其染色效果特別好。熱修復包括單純加熱、高壓加熱和微波加熱3種,其原理是以熱效應來引導抗原決定基重新暴露。熱修復法影響抗原修復的關鍵因素有兩個:一是溫度,至少要達到100 ℃,時間3~15 min;二是修復液的pH值為7.5~8.5。所以我們必須清楚影響抗原的因素及各種抗原修復的方法,嚴格按照抗體說明書進行抗原修復。鑒于抗原修復的方法較多,在實際工作中,究竟選用何種抗原修復,應根據抗體種類予以選擇,必要時可以多種方法同時使用,這樣使其更具有針對性,標記結果更理想。組化染色結果有很大影響。福建免疫學免疫組化機構電話