好壞有著密切的聯(lián)系。由于各種抗原的生化、物理性質(zhì)不同，如溫度高低、酸堿度強(qiáng)弱及各種化學(xué)試劑的作用均可影響抗原的免疫學(xué)活性，良好的細(xì)胞和組織學(xué)結(jié)構(gòu)將有助于抗原的準(zhǔn)確定位。因此，細(xì)胞和組織標(biāo)本的采集制備在免疫組織化學(xué)技術(shù)中占有十分重要的位置。（一）細(xì)胞標(biāo)本的取材目前，免疫組化技術(shù)已經(jīng)應(yīng)用于細(xì)胞學(xué)診斷，如鑒別低分化*與惡性淋巴瘤、黑色素瘤、低分化肉瘤等。CEA應(yīng)用于胸腹水中間皮瘤與*的鑒別，熱修復(fù)法 現(xiàn)常用微波修復(fù)、高溫高壓修復(fù)、水浴加熱修復(fù)法。較常用的修復(fù)法是pH6.0枸櫞酸緩沖液。修復(fù)過程中的注意要點(diǎn)是:（1）達(dá)到規(guī)定的溫度（92℃～95℃以上）;（2）維持一定的時(shí)間，微波修復(fù)、水浴加熱須控制在10～15min，高溫高壓修復(fù)須控制在2min左右;（3）避免切片干涸，如果切片干涸，抗原則可能完全丟失;（4）加熱后必須經(jīng)過室溫自然冷卻20～30min，使未折疊的蛋白分子鏈恢復(fù)天然構(gòu)型。免疫組化服務(wù)性價(jià)比高周期短。黑龍江特殊染色免疫組化檢測(cè)電話

免疫膠體金技術(shù)

免疫膠體金技術(shù)是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作為標(biāo)記物。膠體金是指金的水溶膠，它能迅速而穩(wěn)定地吸附蛋白，對(duì)蛋白的生物學(xué)活性則沒有明顯的影響。因此，用膠體金標(biāo)記一抗、二抗或其他能特異性結(jié)合免疫球蛋白的分子（如葡萄球菌A蛋白)等作為探針，就能對(duì)組織或細(xì)胞內(nèi)的抗原進(jìn)行定性、定位，甚至定量研究。由于膠體金有不同大小的顆粒，且膠體金的電子密度高，所以免疫膠體金技術(shù)特別適合于免疫電鏡的單標(biāo)記或多標(biāo)記定位研究。由于膠體金本身呈淡至深紅色，因此也適合進(jìn)行光鏡觀察。如應(yīng)用銀加強(qiáng)的免疫金銀法則更便于光鏡觀察。

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被檢測(cè)的物質(zhì)

組織或細(xì)胞中凡是能作為抗原或半抗原，如蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受體、酶、核酸及病原體等都可用相應(yīng)的特異性抗體進(jìn)行檢測(cè)。

6、特點(diǎn)

1）特異性強(qiáng)

免疫學(xué)的基本原理決定抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性，因此，免疫組化從理論上講也是組織細(xì)胞中抗原的特定顯示，如角蛋白（keratin）顯示上皮成分，LCA顯示淋巴細(xì)胞成分。只有當(dāng)組織細(xì)胞中存在交叉抗原時(shí)，才會(huì)出現(xiàn)交叉反應(yīng)。

2）敏感性高

在應(yīng)用免疫組化的起始階段，由于技術(shù)上的限制，只有直接法、間接法等敏感性不高的技術(shù)，那時(shí)的抗體只能稀釋幾倍、幾十倍；現(xiàn)在由于ABC法或SP三步法的出現(xiàn)，使抗體稀釋上千倍、上萬(wàn)倍甚至上億倍仍可在組織細(xì)胞中與抗原結(jié)合，這樣高敏感性的抗體抗原反應(yīng)，使免疫組化方法越來(lái)越方便地應(yīng)用于常規(guī)病理診斷工作。

定位準(zhǔn)確、形態(tài)與功能相結(jié)合

該技術(shù)通過抗原抗體反應(yīng)及呈色反應(yīng)，可在組織和細(xì)胞中進(jìn)行抗原的準(zhǔn)確定位，因而可同時(shí)對(duì)不同抗原在同一組織或細(xì)胞中進(jìn)行定位觀察，這樣就可以進(jìn)行形態(tài)與功能相結(jié)合的研究，對(duì)病理學(xué)領(lǐng)域開展深入研究是十分有意義的。

7、從蛋白水平檢測(cè)角度，免疫組化技術(shù)與Western blotting、ELISA的異同

1）Western blotting

蛋白質(zhì)免疫印跡，也是利用抗體抗原反應(yīng)原理，結(jié)合化學(xué)發(fā)光等技術(shù)來(lái)檢查組織或細(xì)胞樣品內(nèi)蛋白含量的檢測(cè)方法。與免疫組化技術(shù)相比，定量可能更加準(zhǔn)確；當(dāng)然Western blotting也可定性和定位（通過提取膜蛋白或核酸白、胞漿蛋白分別檢測(cè)其中抗原含量，進(jìn)而間接反映它們的定位），但敏感性遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于免疫組化技術(shù)。

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染色免疫組化可以輔助病理診斷、指導(dǎo)、評(píng)估預(yù)后，所以在做免疫組化過程中的質(zhì)控問題處理尤其重要［1］。隨著免疫組化試劑新種類不斷出現(xiàn)及方法的改進(jìn)，特別是即用型試劑盒的出現(xiàn)，使抗體的標(biāo)記更加簡(jiǎn)便、快捷，更加規(guī)范化。免疫組化標(biāo)準(zhǔn)化染色技術(shù)是一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)性很強(qiáng)的技術(shù)，任何一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，都可以直接影響免疫組化結(jié)果，

【摘要】目的研究CEA免疫組化染色在檢測(cè)系膜微轉(zhuǎn)移及環(huán)周切緣(CRM)侵犯方面的價(jià)值。方法選取經(jīng)纖維結(jié)腸鏡及病理證實(shí)為直腸*病人40例，應(yīng)用大組織切片技術(shù)對(duì)術(shù)后標(biāo)本處理，分別行常規(guī)染色及CEA免疫組化染色，比較分析兩種染色方法在檢測(cè)系膜微轉(zhuǎn)移及CRM侵犯方面的價(jià)值。結(jié)果CEA染色檢測(cè)**浸潤(rùn)程度大于常規(guī)病理染色，差異有性（t=5.2**<0.001）

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常用染色方法

根據(jù)標(biāo)記物的不同分為免疫熒光法，免疫酶標(biāo)法，親和組織化學(xué)法，后者是以一種物質(zhì)對(duì)某種組織成分具有高度親合力為基礎(chǔ)的檢測(cè)方法。這種方法敏感性更高，有利于微量抗原（抗體）在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平的定位，其中生物素—抗生物素染色法較好常用。判定分析編輯

免疫組化染色（IHC）

免疫組化染色（IHC）

從實(shí)驗(yàn)結(jié)果而言，免疫組化技術(shù)服務(wù)主要涉及抗體實(shí)驗(yàn)結(jié)果的描述與分析，圖片的確定與選取，相關(guān)數(shù)據(jù)的提供，上述工作是免疫組化工作的重點(diǎn)內(nèi)容，只有嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)操作，專業(yè)化的結(jié)果分析才能更好的滿足客戶的要求，這點(diǎn)對(duì)于形式為腹水，上清，培養(yǎng)液之類的抗體顯得更為重要。關(guān)于上述服務(wù)內(nèi)容應(yīng)該在實(shí)驗(yàn)開始前由雙方明確，一般而言，客戶方實(shí)驗(yàn)前應(yīng)提出需要什么樣的結(jié)果與分析，例如是簡(jiǎn)要還是詳細(xì)的描述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，需要實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)否，圖片的數(shù)量與規(guī)格等。如果為雙盲試驗(yàn)或有第三方參與，則事先申明。

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