臨床資料 31例乳腺患者均為女性,年齡26~62歲,中位年齡49歲。病程5天~18個月。其中浸潤性導管23例,浸潤性小葉*6例,粘液2例。腫塊比較大徑1.4~6.5cm。
2.2 組織芯片質量 自行設計和制做的組織芯片能夠滿足觀察研究的要求,但由于為手工所制,組織芯排列不夠整齊,且0.5mm直徑組織芯在HE染色和免疫組化染色過程中易發(fā)生位置滑動,并有少量脫片。
2.3 組織學檢查 乳腺浸潤性導管細胞異型性較顯現,胞質豐富,紅染、淡紅染或透明,核大,核仁明顯,核分裂像易見,成不規(guī)則條索、巢狀、片狀排列,可見腺樣結構。浸潤性小葉**細胞較小,相互間粘附性差,稍松散,常呈單排列樣浸潤于膠原纖維束間,圍繞正常導管呈同心圓狀排列,部分病例見小巢狀、腺泡狀結構。粘液腺*見小簇細胞成腺狀、小巢狀散在漂浮于粘液湖中。
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目的 比較抗原修復對多聚甲醛固定腦組織冰凍切片免疫組化結果的影響。 方法 成年SD大鼠用4%多聚甲醛經心腔灌注、固定后,分別經15%及30%蔗糖梯度脫水后進行冰凍切片(10μm),取相同部位切片20張,用兔抗Ach-M 2 受體多克隆抗體和小鼠抗DA-D 2 受體多克隆抗體作S-P免疫組化染色。 結果 經抗原修復的冰凍切片組的陽性結果比未經抗原修復組有明顯提高。 結論 本實驗次發(fā)現多聚甲醛固定的組織冰凍切片經抗原修復可以提高免疫反應敏感性或提升抗體效價。機制可能與多聚甲醛固定后對抗原有封閉作用有關。山東組織免疫組化公司電話融享生物公司提供免疫組化,低價格,高服務,提供售后服務。
眾所周知,冰凍切片較突出的優(yōu)點就是能夠較完好地保存抗原的免疫活性 ,即具有抗原敏感性高的優(yōu)點 。因此對冰凍切片通常不進行抗原修復 ,而在作免疫組化的研究時往往需要對組織進行固定,固定液(如多聚甲醛、福爾馬林)使組織中的許多氨基酸殘基在分子內或分子間形成醛鍵,使得不少抗原決定簇被封閉。同時,由于甲醛的聚合作用,使蛋白分子間相互交聯形成大分子網絡,也導致了抗原有一定的封閉作用 ,從而降低了抗原敏感性??紤]到以上原因,我們對冰凍切片進行高溫高壓抗原修復并作對比研究。
目的 探討不同規(guī)格組織芯片在乳腺相關基因產物檢測中的應用價值。方法 采用微波修復免疫組織化學S-P法和組織芯片技術,檢測ER、PR、nm23、Her-2、p53在31例乳腺組織中的表達,并與常規(guī)病理學方法進行比較分析。結果 不同規(guī)格組織芯相比較,免疫組化結果幾乎完全一致。常規(guī)制片免疫組化陰性,而組織芯片免疫組化陽性者包括ER2例,PR1例;常規(guī)制片免疫組化陽性,而組織芯片免疫組化陰性者包括nm23、Her-2各1例。部分病例常規(guī)制片免疫組化和組織芯片免疫組化陽性表達強度略有不同。結論 組織芯片的免疫組化結果與常規(guī)制片免疫組化比較,經統(tǒng)計學處理,差異無顯現性(P>0.05)。組織芯片技術有良好應用價值和廣闊發(fā)展前景。上海免疫組化切片 不掉片,厚薄均勻找上海融享生物科技有限公司價格更低 服務更好。
色反應的控制 免疫酶染色應注意控制:①成色質濃度和溫育時間可調節(jié) ,增加成色質的量和/或增加底物溫育時間,可增加反應產物強度。著色太深可減少溫育反應時間。②過氧化物酶顯色時,H2O2較大濃度將使顯色反應過快而致背景加深;過量H2O2可能88酶的活性。
4.復染 根據所用的染色方法和呈顯顏色等,可選用適當的復染方法。如陽性結果呈紅或棕色,則用蘇木素將細胞核染成蘭色,以便定位檢測。也可用1%~2%甲基綠復染。
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這些常用免疫組織化學方法的原理如下:
1. 免疫熒光細胞化學技術
將已知抗體標上熒光素,以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原,在熒光顯微鏡下觀察.當抗原抗體復合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后會發(fā)出一定波長的熒光,從而可以確定組織中的抗原定位或定量.
2. 免疫酶細胞化學技術
是免疫組織化學研究中較好常用的技術.基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對細胞或組織內的相應抗原進行定位或定性研究.
3. 免疫膠體金技術
就是用膠體金標記一抗,二抗或其他的能特異性的結合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針對組織或細胞內的抗原進行定性,定位或定量研究.由于膠體金的電子密度高,多用于免疫電鏡的單標記或多標記的定位研究
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