在多細胞生物體內(nèi),遠處的細胞可以通過傳遞單個分子或細胞外囊泡(EVs,包括exosomes和microvesicles等)交換信息。該綜述介紹了一些EVs引人注目的功能,以及我們目前對其生理作用認識的局限。盡管有初步研究表明,EVs在體內(nèi)具有一些生理功能,但EVs的本質(zhì)特性仍有待進一步澄清。這篇綜述主要關注種瘤細胞和微環(huán)境,但類似的結果和挑戰(zhàn)也適用于EVs介導的其他的病理/生理過程。功能神經(jīng)的能力和完整性需要感覺運動神經(jīng)元、神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細胞之間的交互式信息交流。干細胞外泌體可以有效活化提高細胞能量加速細胞排毒、淡化色斑。安徽海洋生物外泌體
外泌體是新型治理劑,惡性瘤細胞往往能夠通過分泌大量外泌體抑制宿主固有免疫。對外泌體的質(zhì)譜研究發(fā)現(xiàn),惡性瘤細胞的外泌體含有大量活化型的表皮生長因子受體(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR),可以抑制宿主細胞α型干擾素(IFN-α)的產(chǎn)生。這就解釋了為什么部分瘤患者固有免疫低下,也為晚期病癥患者的治理提供一個新的策略和理論依據(jù)。除了瘤,外泌體在其他疾病如心血管疾病等的診斷和治理的相關臨床試驗也在世界范圍內(nèi)開展中。外泌體主要作用外泌體的檢測和提取還遇到一個困難即:對各種外泌體的分類。
Exosome(外泌體)是由活細胞分泌小囊泡,具有典型的脂質(zhì)雙分子層結構;參與細胞之間的交流,物質(zhì)的運輸以及正常生理過程的維持,此外還與疾病的產(chǎn)生有關。對分離的外泌體進行體外標記或示蹤,有助于對外泌體的功能進行進一步的研究。目前對于外泌體的標記方法有很多種,包括親脂性的染料和膜滲透型的化合物等。PKH67的體內(nèi)熒光半衰期為10-12天。相比于PKH-67,PKH-26具有更長的半衰期,標記在兔紅細胞上的PKH26半衰期長達100天以上。特別適用于體外增殖研究以及長期的體內(nèi)細胞跟蹤研究。
外泌體在各種疾病的診斷和治理中的應用研究火熱。外泌體的復雜性,為疾病檢測和監(jiān)測提供了一個多指標的診斷窗口。此外,能夠向病變細胞輸送功能性物質(zhì)的特性使外泌體有潛力作為基因和藥物遞送的載體。有研究總結了從外泌體中篩選的生物標志物,可用于疾病的診斷、預后及治理。外泌體在生物液體中寬泛分布,包括血液、尿液、唾液、胸腹水、腦脊液、膽汁、乳汁以及淚液等,其復雜的內(nèi)容物被認為是疾病診斷的無創(chuàng)或微創(chuàng)生物標志物,具有檢測包括病癥在內(nèi)的許多病理狀況的潛力,可以用于對心血管疾病和病癥等多種疾病的診斷和監(jiān)測。利用外泌體將siRNA和抗藥劑等運輸?shù)侥繕思毎小?/p>
為了解決外泌體實驗遇到的上述的各種問題,Wako研發(fā)出MagCapture?外泌體提取試劑盒PS(MagCapture?ExosomeIsolationKitPS)提取高純度細胞外囊泡。外泌體膜含有分泌細胞源的蛋白和脂質(zhì),眾所周知磷脂酰絲氨酸(PS)在活細胞通過翻轉(zhuǎn)酶作用導向細胞膜內(nèi)側(cè),暴露在外泌體膜外側(cè)3)。另外,T-cellimmunoglobulindomainandmucindomain-containingprotein4(Tim4通過巨噬細胞進行細胞凋亡的吞噬受體)蛋白通過細胞外域IgV域與含有鈣離子的PS結合4)。基于上述知識,我們利用Tim4固化磁珠,在鈣離子存在下捕捉培養(yǎng)上清和血清等樣品中的外泌體,再添加螯合劑洗脫外泌體,這種外泌體純化方法是和金澤大學醫(yī)學系免疫學華山教授共同開發(fā),并取得了成功。5)這是迄今為止取代黃金標準超速離心法的新型外泌體純化方法。血液中的成纖維細胞所釋放的外泌體,可以促進角質(zhì)形成細胞的移動和增殖以及血管新生來促進傷口愈合。血漿外泌體和血清外泌體的區(qū)別
外泌體被工程化改造后,具有靶向特定細胞類型或組織的功能。安徽海洋生物外泌體
與PC-3細胞相比,PC-3細胞外泌體中含有較高豐度的鞘糖脂、鞘磷脂、膽固醇和磷脂酰絲氨酸。外泌體常見的表面蛋白質(zhì)包括四跨膜蛋白(如CD63、CD9、CD81)、黏附蛋白(如L1CAM、LAMP2)、整合素和糖蛋白(如纖連蛋白)等,而外泌體囊泡內(nèi)蛋白質(zhì)則與來源細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)密切相關,包含例如熱休克蛋白(HSP70、HSP90)和細胞骨架蛋白(actin、tubulin、cofilin)等。除此之外,外泌體中還攜帶有來源細胞的miRNAs、mRNAs、non-codingRNAs、circularRNAs和DNA等遺傳物質(zhì)。外泌體的完整囊泡結構能夠保護其內(nèi)部生物分子不受體液中各種酶的影響從而保持其完整性和生物活性。安徽海洋生物外泌體