昆蟲細(xì)胞是多種重組蛋白的多功能表達(dá)宿主。其較強(qiáng)的折疊能力和較高的培養(yǎng)密度使其成為表達(dá)細(xì)胞內(nèi)復(fù)雜蛋白和病毒蛋白的理想選擇。2007年，由昆蟲細(xì)胞系以病毒樣顆粒(VLPs)的形式生產(chǎn)的病毒疫苗Cervarix被批準(zhǔn)用于人類。除了在疫苗開發(fā)方面的潛力外，昆蟲細(xì)胞產(chǎn)生的高活性蛋白還應(yīng)用于生物物理學(xué)和生物化學(xué)的各個(gè)學(xué)科，如結(jié)構(gòu)解釋、藥物設(shè)計(jì)、測定方法建立和診斷試劑開發(fā)等等。許多生物廠家利用昆蟲細(xì)胞進(jìn)行重組蛋白產(chǎn)品開發(fā)和承包研究項(xiàng)目。高純度、高活性、低內(nèi)毒素，高批次間一致性是選購重組蛋白的重點(diǎn)。小鼠BMP-3重組蛋白

重組蛋白具有極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和科研價(jià)值，但是在哺乳動物細(xì)胞中使用穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法將會消耗大量的時(shí)間，而傳統(tǒng)的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染方法，在產(chǎn)量上也難以令人滿意。所以重組蛋白大規(guī)模的瞬時(shí)表達(dá)技術(shù)是近年來的一個(gè)研究熱點(diǎn)，已有報(bào)道能放大到 100L反應(yīng)器中生產(chǎn)重組蛋白，產(chǎn)量（分泌型蛋白）可達(dá) 1-10mg/L。不過該方法技術(shù)條件要求高，如質(zhì)粒的純度、轉(zhuǎn)染的效率等。哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)中，重組蛋白的表達(dá)水平與許多 因素相關(guān)，如轉(zhuǎn)錄和翻譯調(diào)控元件、RNA剪接過程、mRNA穩(wěn) 定性、基因在染色體上的整合位點(diǎn)、重組蛋白對細(xì)胞的毒性作 用以及宿主細(xì)胞的遺傳特性等。BMP-7重組蛋白定制多肽類激素藥是重組蛋白藥物中的明星產(chǎn)品。

為了保證重組蛋白良好的穩(wěn)定性和生物學(xué)活性，通常加8%（質(zhì)量比體積）的海藻糖和甘露醇作為凍干保護(hù)劑。海藻糖是一種以兩個(gè)葡萄糖分子通過 α,α,1,1-糖苷鍵連接的二糖。海藻糖是一種非還原糖，不與氨基酸或蛋白質(zhì)發(fā)生反應(yīng)。它本身不存在于哺乳動物體內(nèi)，但哺乳動物體內(nèi)卻存在分解海藻糖的酶，且海藻糖作為一種小分子的半抗原，哺乳動物對其免疫反應(yīng)性很低。這使得海藻糖對live實(shí)驗(yàn)或異種移植等實(shí)驗(yàn)的干擾極小。海藻糖不僅可以防止蛋白在脫水狀態(tài)下改變其結(jié)構(gòu)，更能在高溫、低溫、高滲透壓的條件下保留蛋白的生物學(xué)活性。目前，海藻糖以其高效的蛋白保護(hù)性能與相對低廉的價(jià)格漸漸代替 BSA，是免疫實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品和蛋白類產(chǎn)品添加劑的新寵。

重組蛋白的細(xì)菌表達(dá)系統(tǒng)有各種各樣的載體和宿主菌可供選擇，大部分工程菌的增殖時(shí)間短,不僅便于快速評價(jià)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，而且降低了技術(shù)和設(shè)備無菌要求的嚴(yán)格性。無害大腸桿菌是腸道正常微生物群的一部分與生物體為共生關(guān)系，可以通過產(chǎn)生維生素K 2使機(jī)體受益，并防止病原菌在腸道增殖。大腸桿菌是用于重組蛋白生產(chǎn)的宿主菌,它不僅具有遺傳背景清楚、培養(yǎng)操作簡單、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導(dǎo)效率高、生長繁殖快、成本低廉,可以快速大規(guī)模地生產(chǎn)目的蛋白等優(yōu)點(diǎn),而且其表達(dá)外源基因產(chǎn)物的水平遠(yuǎn)高于其它基因表達(dá)系統(tǒng),表達(dá)的目的蛋白量甚至能超過細(xì)菌總蛋白量的30%，對小分子蛋白的生產(chǎn)具有極大的優(yōu)勢，因此大腸桿菌是目前應(yīng)用多的重組蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)。重組蛋白疫苗有著天然的優(yōu)勢。

功能性ELISA是一類以ELISA形式進(jìn)行的、基于體外配體結(jié)合的分析法。該方法用于檢測目的蛋白與其天然結(jié)合物配體之間（如生長因子與其受體）的結(jié)合能力。如果在該檢測中生長因子能夠與其天然受體相結(jié)合，則該生長因子很可能是具有功能的。ED50為OD值讀取過程中能夠提供50%信號強(qiáng)度的生長因子濃度（在包被了受體的平板上）。重組蛋白使用了基于細(xì)胞的檢測分析或功能性ELISA分析對其生物學(xué)活性進(jìn)行了檢測，產(chǎn)品頁上會提供相應(yīng)的ED50值。也有些重組蛋白沒有提供生物活性數(shù)據(jù)。在大多數(shù)情況下,這表明沒有進(jìn)行生物活性測試，但它并不一定意味著蛋白是沒有活性的。在沒有生物活性數(shù)據(jù)的情況下，這些蛋白可用做蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)，蛋白免疫印記陽性對照（如果是全長的重組蛋白）或免疫原。其它可能的用途是配體結(jié)合試驗(yàn)或ELISA的標(biāo)準(zhǔn)品。R&D Systems是全球重組蛋白生產(chǎn)的前列。R&DSystemsIGF-II重組蛋白怎么樣

重組蛋白的生物活性接近于天然蛋白質(zhì)，因此在生物制藥領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。小鼠BMP-3重組蛋白

蛋白的溶解性與很多因素有關(guān)，其中比較重要的是pH值和離子強(qiáng)度。購買的重組蛋白按照說明上所標(biāo)明的溶解液來溶解。如果您所用的溶解液的pH值和離子強(qiáng)度與說明書中所標(biāo)明的不符，很多時(shí)候會造成細(xì)胞因子或重組蛋白不能完全溶解或者根本無法溶解，這樣所配得的細(xì)胞因子或重組蛋白必然活性不夠或喪失。重組蛋白溶解時(shí)一定要溶解到指定的濃度，高于或低于該濃度范圍，都可能會導(dǎo)致重組蛋白不穩(wěn)定，出現(xiàn)活性下降的現(xiàn)象。另外，重組蛋白在溶解時(shí)，一定不能用渦旋儀進(jìn)行快速振蕩，以免出現(xiàn)蛋白鏈斷裂。重組蛋白的凍干粉是非常容易溶解的，一般用移液器的吸頭輕輕吹幾下，即可使細(xì)胞因子或重組蛋白完全溶解。小鼠BMP-3重組蛋白

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