來自以色列魏茲曼科學(xué)研究所的ShalevItzkovitz教授團(tuán)隊及耶魯大學(xué)的LizaKonnikova教授團(tuán)隊聯(lián)手,對人類胎兒腸道細(xì)胞進(jìn)行了單細(xì)胞測序,發(fā)現(xiàn)在胚胎時期,胎兒的腸道K/L細(xì)胞存在胰島素基因的表達(dá)。胎兒出生后,胰島素基因的表達(dá)便消失了。研究人員還對胎兒腸道組織和新生兒腸道組織分別進(jìn)行了單分子熒光原位雜交(smFISH)。特級胎牛血清。結(jié)果發(fā)現(xiàn),14例胎兒組織樣本中有4例(INS+細(xì)胞)觀測到了胰島素mRNA和蛋白質(zhì)的高表達(dá),而所有新生兒組織樣本中均未觀測到胰島素mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)。與胰島β細(xì)胞類似,INS+細(xì)胞顯示出明顯的細(xì)胞內(nèi)極化(胰島素mRNA表達(dá)定位于細(xì)胞的頂側(cè),胰島素蛋白質(zhì)表達(dá)定位于細(xì)胞的基地側(cè))。經(jīng)銷數(shù)十種進(jìn)口胎牛血清。浙江BI血清代理
胎牛血清與新生牛血清的區(qū)別。來源不同:胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calfserum,CS)采自出生10至14天的小牛。組份與比例不同:兩者所含的促細(xì)胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,用途與用法不同:某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長,而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時,應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,并經(jīng)常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,絕對不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會增加,血清在解凍和熱滅活后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。Corning透析型血清代理國產(chǎn)胎牛血清品牌有哪些?
培養(yǎng)細(xì)胞生長不好可能原因:細(xì)胞本身的狀態(tài)不好1.細(xì)胞傳代次數(shù)多,細(xì)胞老化;2.細(xì)胞的接種量:接種量過低,細(xì)胞生長緩慢;3.細(xì)胞傳代時間過晚:細(xì)胞中毒,影響傳代后的細(xì)胞生長;4.胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細(xì)胞死亡;時間過短,細(xì)胞未完全分離而成團(tuán),細(xì)胞死亡;5.細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速溶。培養(yǎng)基或血清的原因1.更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證;2.選擇的培養(yǎng)基是否合適;3.培養(yǎng)基配制是否合適;4.培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤。解決方案:1.注意細(xì)胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù),接種量等;2.避免產(chǎn)生污染(用正規(guī),合法,可朔源的血清);3.要用合適的血清或培養(yǎng)基,最好經(jīng)過驗(yàn)證;4.注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境。
培養(yǎng)細(xì)胞生長緩慢可能原因:1.由于更換不同培養(yǎng)液或血清;2.培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必須成分如谷氨酰胺或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞;3.培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;4.試劑保存不當(dāng);5.接種細(xì)胞起始濃度太低;6.細(xì)胞已老化;7.支原體污染。解決方法:1.比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn),讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;2.換入新鮮配置培養(yǎng)液,或補(bǔ)加谷氨酰胺及生長因子;3.用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物;4.血清需保存在-10到-20℃。培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存。含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,需在1周內(nèi)用完;5.增加接種細(xì)胞起始濃度;6.換用新的保種細(xì)胞;7.分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。市場上常見的血清替代物有哪些?
多項(xiàng)研究表明,飼養(yǎng)層依賴性培養(yǎng)要比FBS更可靠。賽默飛旗下Gibco品牌提供的KnockOut血清替代物,貨號:10828028,是一種無血清添加劑,支持在成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層上培養(yǎng)的多能干細(xì)胞(PSC)的生長。適用于對來自多個物種的胚胎干細(xì)胞(ESC)和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)進(jìn)行無血清的滋養(yǎng)細(xì)胞依賴性培養(yǎng)。這種成分明確的無血清配方可直接替代現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)方案中的FBS。使用KnockOut?血清替代物能夠消除使用FBS進(jìn)行干細(xì)胞培養(yǎng)時面臨的許多缺點(diǎn),包括細(xì)胞分化和熱滅活。與添加FBS的培養(yǎng)基相比,在添加KnockOut?SR的培養(yǎng)基中培育時,ES和iPS細(xì)胞出現(xiàn)的分化明顯更少,種系傳遞能力應(yīng)該不會受到影響。在2000多篇涵蓋干細(xì)胞培養(yǎng)、分化、iPSC生成、ESC衍生化以及轉(zhuǎn)基因建模等應(yīng)用的同行評審出版物中,KnockOut?血清替代物被廣泛應(yīng)用于干細(xì)胞培養(yǎng)。庫存Gibco 141胎牛血清大量現(xiàn)貨。Gibco新生牛血清代理
血清中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?浙江BI血清代理
HyClone?Laboratories的起源的確情節(jié)曲折!它始于1967年,當(dāng)時在猶他州立大學(xué)擔(dān)任教授的RexSpendlove博士正在研究一種對兒童致命的病毒病。他的研究離不開胎牛血清(FBS)。當(dāng)時胎牛血清質(zhì)量極差,以至于Spendlove博士不得不自己開發(fā)一些方法來生產(chǎn)質(zhì)量血清。**終獲得了HyClone?,由此開創(chuàng)了細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品生產(chǎn)商所使用的多種血清采集、過濾和處理技術(shù)。Hyclone胎牛血清,主要有以下幾種:(1)南美胎牛血清(貨號:SV30087.02)(2)浙江BI血清代理
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