RNA和信使RNA與DNA轉染類似，RNA可以通過基于RNA的病毒或非病毒載體導入真核細胞。與涉及DNA的轉染相比，RNA轉染可能產(chǎn)生更高的轉染效率，因為后者不需要穿越核膜。在不需要基因組整合、轉錄和轉錄后處理的情況下，RNA轉染也可能加速所需蛋白質(zhì)的產(chǎn)生。使用基于信使RNA(mRNA)的載體也可以防止因整合到宿主基因組而引起的并發(fā)癥，從而允許表達特定的，所需的蛋白質(zhì)。然而，RNA轉染后，蛋白質(zhì)表達是短暫的，與DNA相比，RNA的穩(wěn)定性相對較差，因此在細胞內(nèi)運輸時更容易降解。小RNA是長度為18-200個堿基對(bp)的RNA分子，具有調(diào)控轉錄后基因調(diào)控和RNA修飾的能力。小RNA包括microRNAs(miRNAs)、小干擾RNA(siRNA)、短發(fā)夾RNA（shRNA）等。microRNAs和piRNAs都是內(nèi)源性單鏈小RNA。miRNAs(18-25bp)通過抑制目標mRNA或干擾其翻譯起始，參與下游mRNA的轉錄后調(diào)控。與miRNAs和piRNAs類似，siRNA也在調(diào)控轉錄后基因表達中發(fā)揮作用。siRNA的長度通常為20-24bp，可表達為內(nèi)源性或外源性雙鏈小RNA。shRNA是一種具有發(fā)夾環(huán)的內(nèi)源性雙鏈小RNA。shRNA可以結合mRNA上的互補序列來降解它。但似乎找到一種既能改善基因表達又不影響細胞、不對細胞造成損害的技術也至關重要。四川轉染試劑脂質(zhì)體

化學轉染的效率在很大程度上取決于幾個因素，如使用的試劑類型、靶細胞的來源和性質(zhì)，以及選擇的比較好DNA與試劑比例。慢病毒等病毒載體能夠攜帶大尺寸的核酸，并將其靶標傳遞給非分裂細胞和分裂細胞，因此在基因***中非常有用。有幾個因素已被證明可能影響病毒轉導的效率，如靶細胞類型、使用的啟動子類型、載體濃度和使用的轉導介質(zhì)條件。在一項評估使用人類免疫缺陷病毒(HIV)和馬傳染性貧血病毒(EIAV)進行基因轉導的體外研究中，觀察到這兩種病毒在來自人類、倉鼠、貓、狗、馬和豬的不同細胞系上的不同程度的效率。在大多數(shù)細胞類型上，使用HIV的轉導效率普遍優(yōu)于EIAV，而這兩種病毒對嚙齒動物細胞的***性較弱。在同一項研究中，啟動子的類型也被認為是可能影響轉導效率的一個因素，因此含有替代CMV啟動子的內(nèi)部啟動子EF-1a的HIV在小鼠和大鼠細胞上表現(xiàn)出更高的轉導效率。PEI 轉染試劑幫轉染基因是陽離子聚合物作為轉染劑的主要應用。

PEI的分子量對細胞毒性和基因轉移活性有影響。由于PEI在細胞內(nèi)不可降解，所以分子量越高，細胞毒性越強。此外，具有較高分子量的PEI形成更穩(wěn)定的聚合物，使其更容易轉染，但更難在細胞內(nèi)釋放核酸。另一方面，PEI產(chǎn)生的復合物分子量降低，更難以轉染;但它更容易釋放核酸。因此，確定哪種分子量的PEI更有利是不能隨意實現(xiàn)的。然而，一些改進使PEI在應用中更加先進。低分子量(LMW) PEI與可生物降解的骨架(如聚谷氨酸衍生物(PEG-b-PBLG))偶聯(lián)，可***降低細胞毒性并保持較高的轉染效率。通過用丙烯酸乙酯修飾胺，伯胺的乙酰化，或在聚合物結構中引入帶負電荷的丙酸或琥珀酸基團，可以制備出各種無毒的分支PEI衍生物。由此產(chǎn)生的化學物質(zhì)在利用siRNA敲低靶基因方面非常成功。

為了在體外和體內(nèi)可重復地傳遞基因和siRNA，含有核酸的脂質(zhì)體、脂叢和多叢的配方需要精確組成轉染試劑。雖然有幾項研究已經(jīng)調(diào)查了血液成分如何使脂質(zhì)和聚合物納米顆粒不穩(wěn)定，對于介導細胞中基因傳遞或沉默的傳遞系統(tǒng)的**終組成知之甚少。多叢和脂叢的組成在系統(tǒng)給藥進入血液后會發(fā)生不斷的變化。過多的聚合物鏈或脂質(zhì)體成分不強烈附著于復合物將從顆粒中脫落，而新的成分，如脂蛋白，可以粘附在復合物的表面。這不僅會導致顆粒的不穩(wěn)定，還會改變生物分布或促進體內(nèi)***。了解在體內(nèi)遞送的每個階段(在給藥部位，在血液循環(huán)過程中，在***和組織的細胞外基質(zhì)中，以及**終進入靶細胞時)，多聚物和脂聚物的組成如何變化，可能有助于設計具有更高穩(wěn)定性的合成載體系統(tǒng)。肌內(nèi)注射脂質(zhì)體不能引起強烈的毒性反應，這與肺內(nèi)或靜脈注射途徑的情況不同。

轉染時通常推薦使用血清減少或無血清培養(yǎng)基，包括陽離子轉染試劑，如Lipofectamine、HiperFect 和EndofectinMax。這種轉染活動需要形成陽離子脂質(zhì)體-DNA復合物，這需要帶正電的脂質(zhì)體分子和帶負電的核酸之間的相互作用。因此，血清中負電荷分子的存在可能會影響這種復雜的相互作用，從而影響轉染效率。然而，發(fā)現(xiàn)10%血清的存在導致FuGENE HD、jetPEI、Lipofectamine 2000和Arrest-In轉染MCF-7、HeLa、C2C12和MC3T3的轉染效率更高。研究表明，轉染中少量的血清可以通過調(diào)節(jié)轉染復合物的zeta電位來改善轉染復合物與其宿主細胞表面之間的表面相互作用。小RNA和質(zhì)粒DNA的共轉染可用于評估轉染效率。寧夏轉染試劑現(xiàn)貨

陽離子聚合物是一種非病毒載體。四川轉染試劑脂質(zhì)體

陽離子聚合物是一種非病毒載體，其結構的一個共同特征是分子中存在許多帶正電的基團，這些基團被質(zhì)子化成帶正電的聚合物。陽離子聚合物可以通過靜電相互作用結合核酸，并將其凝聚成小的納米顆粒。正電荷改善了與帶負電荷的細胞膜的相互作用，并幫助多聚體在溶酶體降解發(fā)生之前逃離核內(nèi)體。隨后，多聚體通過陽離子聚合物上帶正電基團介導的質(zhì)子海綿效應從核內(nèi)體中逸出。此外，核酸必須與陽離子聚合物分離，才能**終發(fā)揮其功能。成功的核酸轉染需要轉染效率高、細胞毒性低。在確定陽離子聚合物是否是合適的核酸轉染試劑時，必須考慮這兩個特點。一般認為，陽離子聚合物的分子量越高，其包封核酸和被細胞攝取的能力越強，細胞活力和核酸釋放越差。另一方面，分子量越低的聚合物，其濃縮核酸和被細胞攝取的能力就越低，但在細胞毒性和核酸釋放方面則表現(xiàn)得更好。因此，轉染時應慎重考慮陽離子聚合物的分子量。一些化學修飾，如聚乙二醇化和膽固醇修飾，可以***改善聚合物的性能。此外，可生物降解材料是降低細胞毒性的有效手段。四川轉染試劑脂質(zhì)體