化學轉染可分為基于脂質體或非基于脂質體?；谥|體的轉染試劑是一種化學物質，它能夠形成帶正電的脂質聚集體，這些聚集體可以與宿主細胞的磷脂雙分子層順利融合，從而允許外來遺傳物質以**小的阻力進入。另一方面，非脂質體轉染試劑可進一步分為幾類，包括磷酸鈣、樹狀大分子、聚合物、納米顆粒和非脂質體。磷酸鈣是轉染中使用的低價的化學物質之一，轉染涉及將帶正電的鈣離子(Ca2+)與帶負電的核酸結合，形成沉淀，然后被宿主細胞吸收。然而，磷酸鈣轉染的成功率較低，需要事先優(yōu)化才能達到較高的轉染效率。樹狀大分子是三維的、高度支化的有機大分子，可以與核酸形成復合物，作為一種替代的非脂質體轉染試劑，它優(yōu)于磷酸鈣。然而，使用樹狀大分子的轉染效率仍然低于病毒載體和脂質體試劑。陽離子聚合物也可以與帶負電荷的核酸形成復合物，這有助于細胞通過內吞作用吸收遺傳物質。與病毒載體相比，陽離子聚合物產生的細胞毒性較小，但效率也較低。納米顆粒由于其體積小，增強了核酸進入宿主細胞的能力，正在成為非脂質體轉染的替代選擇。PHP是由天然來源的羥基脯氨酸(如膠原蛋白、明膠和其他蛋白質)制成的，是一個用作基因載體的聚酯。安徽轉染試劑檢測

**近的研究已經確定了陽離子脂質體（CLs）的某些特征，這些特征增強了它們在體內轉運核酸的能力。這些特征包括陽離子頭基團及其鄰近的脂肪鏈在主鏈上呈1,2關系，醚鍵用于橋接脂肪鏈到主鏈，成對的油基鏈作為疏水系鏈。無論如何，這些特征雖然不能決定細胞培養(yǎng)中更好的轉染能力，但可以在體內實現更好的核酸遞送。因此，必須謹慎對待體外和細胞培養(yǎng)的結果，不能必然地用來推斷核酸載體在體內的潛力。當這些囊泡在體內引入時，其他因素(如顆粒直徑)變得更加重要。使用脂質體時遇到的毒性通常與制劑中陽離子脂質與核酸之間的電荷比、所使用的制劑類型以及所給脂質體的劑量密切相關。較高的電荷比通常對多種細胞類型的毒性更大，包括*細胞系。另外，不同的試劑對細胞的毒性程度不同，毒性是細胞特異性的。目前市面上有超過30種不同的商用CL制劑品種可供選擇。由于毒性，脂質體的體內遞送必須盡可能靠近目標部位，以盡量減少副作用。中國澳門siRNA轉染試劑PLL(聚L -賴氨酸)是生理條件下帶正電的多氨基酸,當鏈長超過20個殘基時，它與質粒DNA結合并凝聚成致密顆粒。

共轉染是將一種以上類型的核酸引入真核細胞的過程。組合的一些例子包括多個質粒DNA ,siRNA和質粒DNA ，以及多個miRNAs進入同一個細胞。通常，多質粒DNA共轉染的目的是將一種以上的外源基因導入宿主細胞。其應用之一是生產由幾種質粒DNA成分組成的合成病毒或雜交載體。一個例子是在HEK293細胞系中，用轉移、包膜和包裝載體等幾種質粒載體生成慢病毒。此外，多個質粒DNA的共轉染也可以應用于蛋白質-蛋白質相互作用(PPI)研究，以研究一種蛋白質與另一種蛋白質之間的關系。

陽離子聚合物是一種非病毒載體，其結構的一個共同特征是分子中存在許多帶正電的基團，這些基團被質子化成帶正電的聚合物。陽離子聚合物可以通過靜電相互作用結合核酸，并將其凝聚成小的納米顆粒。正電荷改善了與帶負電荷的細胞膜的相互作用，并幫助多聚體在溶酶體降解發(fā)生之前逃離核內體。隨后，多聚體通過陽離子聚合物上帶正電基團介導的質子海綿效應從核內體中逸出。此外，核酸必須與陽離子聚合物分離，才能**終發(fā)揮其功能。成功的核酸轉染需要轉染效率高、細胞毒性低。在確定陽離子聚合物是否是合適的核酸轉染試劑時，必須考慮這兩個特點。一般認為，陽離子聚合物的分子量越高，其包封核酸和被細胞攝取的能力越強，細胞活力和核酸釋放越差。另一方面，分子量越低的聚合物，其濃縮核酸和被細胞攝取的能力就越低，但在細胞毒性和核酸釋放方面則表現得更好。因此，轉染時應慎重考慮陽離子聚合物的分子量。一些化學修飾，如聚乙二醇化和膽固醇修飾，可以***改善聚合物的性能。此外，可生物降解材料是降低細胞毒性的有效手段。共轉染是將一種以上類型的核酸引入真核細胞的過程。

陽離子聚合物作為轉染試劑結合機制：以陽離子聚合物EZTransCellReagent為例，在優(yōu)化RNA干擾（RNAi）條件的研究中發(fā)現，陽離子聚合物通過與RNA分子結合來實現轉染14。例如，設計針對GFP的shRNA，使用EZ轉染試劑將其轉染到細胞中，shRNA***降低了GFP的表達。預稀釋的轉染試劑在室溫下以及小核酸的存在可增加轉染效率，且在24小時時達到峰值。與環(huán)狀核酸相比，線性核酸與陽離子聚合物結合時顯示出更高的轉染效率和更高的基因組整合率。作用特點：陽離子聚合物介導的RNAi條件優(yōu)化后，為未來的RNAi研究提供了有用的數據。評估轉染效率至關重要，特別是在需要高轉染效率以保證特定下游靶標轉錄后調控的功能研究中。中國臺灣轉染試劑教做

由于CRISPR/Cas的發(fā)現，基因組編輯領域經歷了一場變革。安徽轉染試劑檢測

脂質體轉染是一種常用的基因轉染方法，不同類型的細胞在脂質體轉染過程中會表現出不同的特性和差異。以下是對脂質體轉染對不同類型細胞影響差異的詳細分析：

一、轉染效率的差異宮頸*細胞：對于Hela細胞和Siha細胞，當細胞接種密度為每24孔板的每孔1.5×10?個細胞，miRNA量為1μl，Hela細胞中miRNA與脂質體比例為1:0.5，Siha細胞中為1:0.7時，24小時后可獲得比較高轉染效率1。與含血清的培養(yǎng)基相比，只有Siha細胞在無血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)時，在轉染前能獲得更高的轉染效率（P＜0.01）1。PC12細胞：lipo2000轉染PC12細胞的比較好轉染條件為lipo2000用量為5μL，DNA2μg，轉染時間為6h，這種條件下的PC12細胞轉染率高達40%，且未影響細胞的正常分泌3。HepG2細胞：陽離子脂質體的擴散系數在lipoplex形成過程中與lipoplex的物理化學特性、lipoplex中質粒DNA的可及性以及每代謝活性的基因表達對數密切相關2。隨著脂質體尺寸的增加，主要的內吞途徑從網格蛋白介導的內吞轉變?yōu)橹そ閷У膬韧?，此外，所有脂質體尺寸均觀察到巨胞飲作用2。骨髓間充質干細胞：脂質體介導的CD基因在鼠骨髓間充質干細胞中成功表達，于轉染48h后達峰值5。

安徽轉染試劑檢測