陽(yáng)離子脂質(zhì)體工程系統(tǒng)新脂質(zhì)的工程化已經(jīng)被研究作為一種提高核酸遞送效率的手段。例如，研究人員合成了膽固醇衍生物陽(yáng)離子脂質(zhì)DMHAPC-Chol，并表明其可促進(jìn)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)特異性sirna進(jìn)入腫瘤細(xì)胞。在結(jié)構(gòu)上，脂質(zhì)在其極性氨基頭部分具有可生物降解的氨基甲?；B接劑和羥基乙基。由DMHAPC-Chol和DOPE等摩爾比例組成的陽(yáng)離子脂質(zhì)體將VEGFsiRNA傳遞到A431和MDA-MB-231細(xì)胞，并顯示出>90%的VEGF蛋白表達(dá)的有效沉默。在另一項(xiàng)研究中，開(kāi)發(fā)了一種基于膽固醇的多陽(yáng)離子脂質(zhì)體制劑，其中精胺的親水部分與一個(gè)或兩個(gè)膽固醇?xì)埢悸?lián)，用于遞送siRNA。由合成的多陽(yáng)離子脂質(zhì)和DOPE組成的脂質(zhì)體可抑制表達(dá)EGFP的HEK293細(xì)胞中增強(qiáng)的綠色熒光蛋白(EGFP)的表達(dá)。除了膽固醇衍生物，基于精氨酸的陽(yáng)離子脂質(zhì)也被研究用于siRNA的遞送。研究人員合成了由聚l-精氨酸-9偶聯(lián)聚乙二醇脂質(zhì)、DOTAP、DOPE和膽固醇組成的聚l-精氨酸脂質(zhì)衍生物，以增強(qiáng)siRNA的遞送。生物表面活性劑甘油單酯脂質(zhì) A（MEL-A）對(duì)殼聚糖涂層脂質(zhì)體的影響。昆明脂質(zhì)體載藥技術(shù)服務(wù)公司

非病毒載體通常具有比病毒載體更低的轉(zhuǎn)染效率，但由于它們被認(rèn)為要安全得多，因此已被***研究。納米顆粒遞送系統(tǒng)，其中陽(yáng)離子脂質(zhì)納米顆粒通過(guò)核酸的負(fù)磷酸基團(tuán)裝載，是一類(lèi)主要的非病毒載體，顯示出高生產(chǎn)力和裝載效率。用于攜帶核酸的納米顆粒系統(tǒng)在整體上可分為基于脂質(zhì)或聚合物的納米顆粒，在與核酸相互作用后，每種納米顆粒都被稱(chēng)為“脂質(zhì)復(fù)合物”或“多聚體”。這些復(fù)合物的細(xì)胞遞送被認(rèn)為是通過(guò)內(nèi)吞作用發(fā)生的，然后內(nèi)體逃逸到細(xì)胞質(zhì)中。陽(yáng)離子脂質(zhì)體作為核酸的一種傳遞系統(tǒng)，具有一定的優(yōu)勢(shì)。首先，陽(yáng)離子脂質(zhì)體在體內(nèi)給藥后是可生物降解的。內(nèi)源性酶的存在可以分解脂質(zhì)體的脂質(zhì)成分。脂質(zhì)體在各種納米載體之間****的生物相容性導(dǎo)致在體內(nèi)研究中使用陽(yáng)離子脂質(zhì)體遞送各種sirna。脂質(zhì)組成依賴(lài)性的表面電荷密度調(diào)節(jié)可以控制與帶負(fù)電的核酸的相互作用力。聚乙二醇化脂質(zhì)或功能性脂質(zhì)的包含可以使脂質(zhì)體的多種表面修飾成為可能。此外，在陽(yáng)離子脂質(zhì)體的脂質(zhì)雙層中包含親脂性化學(xué)藥物可以提供***藥物和***性核酸的共遞送。鑒于陽(yáng)離子脂質(zhì)體的優(yōu)勢(shì)，人們已經(jīng)研究了陽(yáng)離子脂質(zhì)體用于遞送各種核酸，如質(zhì)粒DNA、反義寡核苷酸和siRNA。陜西脂質(zhì)體載藥共包載不同的藥物或活性成分可以通過(guò)協(xié)同作用提高脂質(zhì)體的穩(wěn)定性和包封率。

1脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)

脂質(zhì)體根據(jù)室室結(jié)構(gòu)和層狀結(jié)構(gòu)可分為單層囊泡(ULVs)、寡層囊泡(OLVs)、多層囊泡(MLV)和多泡脂質(zhì)體(MVLs)。OLVs和MLV呈陰離?樣結(jié)構(gòu)，但分別存在2-5和>5個(gè)同?脂質(zhì)雙分?層。與MLV不同，MVLs包括數(shù)百個(gè)由單層脂質(zhì)膜包圍的?同??室，并呈現(xiàn)蜂窩狀結(jié)構(gòu)。根據(jù)顆粒??，ULVs可進(jìn)?步分為?單層囊泡(SUVs，30-100nm)、?單層囊泡(LUVs，>100nm)和?單層囊泡(LUVs，>1000nm)。Arikaye(阿?卡星脂質(zhì)體吸?懸浮液)因其?粒徑(200-300nm)?被認(rèn)為是LUV。Vyxeos(注射?柔紅霉素:阿糖胞苷脂質(zhì)體)是?種雙層脂質(zhì)體系統(tǒng)(，它是在第?次藥物阿糖胞苷裝載過(guò)程中產(chǎn)?的。內(nèi)部?層形成的機(jī)制被解釋為脂質(zhì)雙層的熱?學(xué)響應(yīng)，以減少脂質(zhì)體的表?積體積?，這是由于?的流出?引起的，以應(yīng)對(duì)外部滲透挑戰(zhàn)。Myocet(阿霉素脂質(zhì)體)和Mepact(?法莫肽脂質(zhì)體粉劑?于濃縮分散輸注)為MLV。豐富的?層為親脂化合物的包封提供了較?的空間。直徑為微?的產(chǎn)品有Mepact、DepoCyt(阿糖胞苷脂質(zhì)體混懸液)、DepoDur(硫酸**緩釋脂質(zhì)體注射液)和expel(布?卡因脂質(zhì)體注射混懸液)四種。Mepactis為?菌凍?餅，?0.9%的?理鹽?溶液重構(gòu)后，會(huì)形成粒徑為2.0-3.5μm的多層脂質(zhì)體。

脂質(zhì)體配方中脂類(lèi)的毒性由于LNPs主要由天然脂質(zhì)組成，它們被認(rèn)為是無(wú)藥理活性和毒性**小的。然而，在某些情況下，LNP并非免疫惰性，而LNP成分是可能對(duì)人體細(xì)胞有毒的非天然化合物。例如，雖然陽(yáng)離子脂質(zhì)作為遞送脆弱化合物(如核酸)的載體提供了巨大的希望，但一些陽(yáng)離子脂質(zhì)會(huì)引起細(xì)胞毒性。在某些情況下，陽(yáng)離子脂質(zhì)會(huì)減少細(xì)胞中的有絲分裂，在細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中形成液泡，并對(duì)關(guān)鍵的細(xì)胞蛋白如蛋白激酶c造成有害影響陽(yáng)離子脂質(zhì)的細(xì)胞毒性取決于它們的結(jié)構(gòu)親水頭基團(tuán);具有季銨頭基的兩親化合物比具有叔胺頭基的兩親化合物毒性更大。疏水鏈對(duì)脂質(zhì)毒性的影響還沒(méi)有得到很好的研究，阻礙了低毒性脂質(zhì)的設(shè)計(jì)。脂質(zhì)分子的疏水部分強(qiáng)烈調(diào)節(jié)其相行為及其對(duì)LNP的有用性，但某些脂質(zhì)相的存在也與膜損傷和細(xì)胞毒性有關(guān)。PEG-脂質(zhì)偶聯(lián)物也可能引起意想不到的毒性，而已知含有PEG-脂質(zhì)偶聯(lián)物的LNPs與免疫細(xì)胞相互作用，產(chǎn)生針對(duì)某些聚乙二醇化脂質(zhì)的不想要的抗體。響應(yīng)面優(yōu)化法在脂質(zhì)體制備中具有高效優(yōu)化、考慮因素交互作用、準(zhǔn)確預(yù)測(cè)和適用于多種脂質(zhì)體制備等優(yōu)勢(shì)。

基于堿性氨基酸的陽(yáng)離子脂質(zhì)體已被研究其增強(qiáng)血清中陽(yáng)離子脂質(zhì)體穩(wěn)定性的潛力。對(duì)賴(lài)氨酸化膽固醇、組氨酸化膽固醇和精氨酸化膽固醇進(jìn)行了檢測(cè)， 賴(lài)氨酸化膽固醇和精氨酸化膽固醇脂基陽(yáng)離子脂質(zhì)體在含血清培養(yǎng)基中表現(xiàn)出  更有效的轉(zhuǎn)染質(zhì)粒DNA。精胺與膽固醇或長(zhǎng)鏈碳?xì)浠衔锏呐悸?lián)物已配制成脂質(zhì)體。 將精氨酸標(biāo)記的陽(yáng)離子脂質(zhì)和DOPE(1:1比例)與EGFP編碼質(zhì)粒DNA或RNA復(fù)配，電脈沖注入未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞或樹(shù)突狀細(xì)胞前祖細(xì)胞。將核酸脈沖樹(shù)突狀細(xì)胞靜脈注射到荷瘤小鼠體內(nèi)，可誘導(dǎo)產(chǎn)生抗腫瘤細(xì)胞因子，提示陽(yáng)離子脂質(zhì)體  可用于生成核酸脈沖樹(shù)突狀抗**疫苗。改進(jìn)脂質(zhì)體制劑提高藥物的生物利用度和抗血糖活性。制備脂質(zhì)體載藥合成

選擇合適賦形劑改善口服生物利用度。昆明脂質(zhì)體載藥技術(shù)服務(wù)公司

兩者都含有一種可電離的脂質(zhì)，在低pH值下帶正電荷(使RNA絡(luò)合)，在生理pH值下為中性(減少潛在的毒性作用并促進(jìn)有效載荷釋放)。它們還含有聚乙二醇化脂質(zhì)，以減少血清蛋白的抗體結(jié)合(調(diào)理)和吞噬細(xì)胞的***，從而延長(zhǎng)體循環(huán)。輝瑞公司的陽(yáng)離子脂質(zhì):peg脂質(zhì):膽固醇:DSPC的摩爾比為(43:1.6:47:9.4)，莫當(dāng)納疫苗的摩爾比為(50:1.5:38.5:10)。這些納米顆粒直徑為80 - 100納米，每個(gè)脂質(zhì)納米顆粒含有大約100個(gè)mRNA分子。ALC-0315(輝瑞)和SM-102 (Moderna)這兩種脂質(zhì)都是叔胺，在低ph下質(zhì)子化(因此帶正電荷)。它們的碳?xì)滏溚ㄟ^(guò)可生物降解的酯基連接，在mRNA傳遞后能夠安全***。mRNA疫苗中使用的陽(yáng)離子脂質(zhì)含有支鏈烴鏈，這優(yōu)化了非層狀相的形成和mRNA的遞送效率。peg -脂質(zhì)均為PEG-2000偶聯(lián)物。LNPs是在低pH (pH 4.0)條件下制備的，在這種條件下，可電離的脂質(zhì)帶正電，因此它很容易與mRNA形成復(fù)合物。微流控裝置用于將水中含有mRNA的流與乙醇中含有脂質(zhì)混合物的流混合。當(dāng)快速混合時(shí)，這兩種流的成分形成納米顆粒，捕獲帶負(fù)電荷的mRNA。昆明脂質(zhì)體載藥技術(shù)服務(wù)公司