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由于阿?卡星在?醇中的溶解度有限，在使??醇輸注制備脂質(zhì)體過(guò)程中，阿?卡星轉(zhuǎn)移到半可溶性的凝聚狀態(tài)，被包裹在脂質(zhì)體的核?內(nèi)部。令?驚訝的是，獲得了較?的包封效率(在優(yōu)化的制備參數(shù)下，游離藥物為5.2%)和藥脂?(～0.7)。由于其多陽(yáng)離?性質(zhì)，被包封的藥物在脂...

羅丹明123一種可對(duì)活細(xì)胞線粒體染色的細(xì)胞染色試劑。羅丹明123可透過(guò)細(xì)胞膜且在活細(xì)胞的線粒體內(nèi)聚集，并發(fā)出黃綠色熒光。羅丹明123***用作檢測(cè)線粒體膜電位，也常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)。由于細(xì)胞內(nèi)ATP的量與羅丹明123的熒光強(qiáng)度之間有相關(guān)性，此熒光染料被應(yīng)用...

陰離子脂體由帶負(fù)電荷的脂質(zhì)組成，如磷脂酰甘油、磷脂酰絲氨酸和磷脂酸，由于它們被巨噬細(xì)胞攝取，循環(huán)時(shí)間縮短。帶負(fù)電的小脂質(zhì)體比其對(duì)應(yīng)的中性和帶正電的脂質(zhì)體被***得更快。此外，在帶負(fù)電荷的小脂質(zhì)體中觀察到一種雙相***模式。 另一方面， 與中性和帶正電的脂質(zhì)體相...

將靶向成像方式與病變定向***相結(jié)合，可以確定與積極***反應(yīng)可能性有關(guān)的幾個(gè)生物學(xué)相關(guān)事實(shí)。特別令人感興趣的問(wèn)題是，目標(biāo)是否存在，藥物是否達(dá)到目標(biāo)，以及預(yù)期目標(biāo)是否真的是正在***的目標(biāo)。有多種有趣的生物過(guò)程適合應(yīng)用靶向超聲成像來(lái)監(jiān)測(cè)藥物遞送的療效。我們的研...

超聲微泡的粒徑大小直接影響微泡的動(dòng)物的體內(nèi)滲透和代謝。首先，與傳統(tǒng)藥物相比，超聲造影劑微泡相對(duì)較大。微泡的直徑一般為1-10um。**血管特別具有滲透性，通常有較大的內(nèi)皮間隙；然而，造影劑微泡通常太大而無(wú)法脫離脈管系統(tǒng)。在Wheatley等人**近的一篇文章中...

作為一般指導(dǎo)原則，建議使用早期傳代的細(xì)胞以獲得良好的轉(zhuǎn)染效率，特別是涉及原代或干細(xì)胞的轉(zhuǎn)染。另一個(gè)有趣的觀察結(jié)果是，37℃是可以幫助原代細(xì)胞達(dá)到更高轉(zhuǎn)染效率的比較好培養(yǎng)溫度。這種現(xiàn)象可能是因?yàn)?7攝氏度是哺乳動(dòng)物細(xì)胞的比較好培養(yǎng)溫度。同時(shí)，在轉(zhuǎn)染原代細(xì)胞時(shí)，化...

流式細(xì)胞術(shù)可以更精確地定量表達(dá)特定熒光基因的細(xì)胞，以評(píng)估轉(zhuǎn)染效率。另一種評(píng)估轉(zhuǎn)染效率的方法是通過(guò)監(jiān)測(cè)轉(zhuǎn)染后的特定蛋白表達(dá)。將轉(zhuǎn)基因引入細(xì)胞可能會(huì)改變由轉(zhuǎn)基因或細(xì)胞中其他基因編碼的蛋白質(zhì)的表達(dá)。同樣，轉(zhuǎn)染小RNA也可以調(diào)節(jié)宿主細(xì)胞中特定下游遺傳靶點(diǎn)的表達(dá)。免疫印...

納米顆粒的尺寸很小，但它們比其他顆粒具有更大的粘附表面，同時(shí)具有高穩(wěn)定性。正因?yàn)槿绱耍鼈兡軌虺晒Φ卮┻^(guò)細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞，并與自然發(fā)生的細(xì)胞內(nèi)途徑結(jié)合，具有將特定顆粒帶到預(yù)定目標(biāo)位置的***準(zhǔn)確性。由于納米顆粒在細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸和保護(hù)化合物方面具有巨大的潛力，可以避...

影響物理轉(zhuǎn)染或機(jī)械轉(zhuǎn)染效率的因素在很大程度上取決于這些方法的基本原理。例如，電穿孔技術(shù)依賴于電場(chǎng)來(lái)增加宿主細(xì)胞膜的通透性，以內(nèi)化外來(lái)核酸。因此，電穿孔過(guò)程中的電壓和持續(xù)時(shí)間是決定電穿孔成功與否的重要因素。施加高壓的長(zhǎng)時(shí)間電穿孔可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞損傷并降低轉(zhuǎn)染效率。...

載藥超聲微泡造影劑的設(shè)計(jì)之一是使藥物由于細(xì)胞內(nèi)pH值的變化或外部光或聲音的刺激而釋放。修飾超聲微泡的一個(gè)很有前途的策略是使用電荷可切換的納米顆粒，這種納米顆粒可以經(jīng)歷表面電荷從負(fù)向正的變化，從而增加細(xì)胞的攝取。此外，還可以提出超聲微泡的其他刺激響應(yīng)設(shè)計(jì)。例如，...

流式細(xì)胞術(shù)可以更精確地定量表達(dá)特定熒光基因的細(xì)胞，以評(píng)估轉(zhuǎn)染效率。另一種評(píng)估轉(zhuǎn)染效率的方法是通過(guò)監(jiān)測(cè)轉(zhuǎn)染后的特定蛋白表達(dá)。將轉(zhuǎn)基因引入細(xì)胞可能會(huì)改變由轉(zhuǎn)基因或細(xì)胞中其他基因編碼的蛋白質(zhì)的表達(dá)。同樣，轉(zhuǎn)染小RNA也可以調(diào)節(jié)宿主細(xì)胞中特定下游遺傳靶點(diǎn)的表達(dá)。免疫印...

與Myocet細(xì)胞類似，Marqibo也有三瓶裝在?個(gè)包裝中?？罩|(zhì)體內(nèi)?相為檸檬酸緩沖液(0.3M,pH值約4.0)。在裝填硫酸?春新堿(pKa=5.4)之前，通過(guò)添加濃度為14.2mg/mL的磷酸鈉緩沖液，將脂質(zhì)體的外部pH提?到pH7.0-7.5左右。與...

將靶向成像方式與病變定向***相結(jié)合，可以確定與積極***反應(yīng)可能性有關(guān)的幾個(gè)生物學(xué)相關(guān)事實(shí)。特別令人感興趣的問(wèn)題是，目標(biāo)是否存在，藥物是否達(dá)到目標(biāo)，以及預(yù)期目標(biāo)是否真的是正在***的目標(biāo)。有多種有趣的生物過(guò)程適合應(yīng)用靶向超聲成像來(lái)監(jiān)測(cè)藥物遞送的療效。我們的研...

陽(yáng)離子脂質(zhì)體合成中常用的分子是中性脂質(zhì)二油基磷脂酰乙醇胺(DOPE)。DOPE的作用是促進(jìn)膜融合，并有助于質(zhì)膜或核內(nèi)體的不穩(wěn)定。此外，由于陽(yáng)離子脂質(zhì)相互排斥，因此需要DOPE等輔助脂質(zhì)來(lái)穩(wěn)定陽(yáng)離子脂質(zhì)體（CLs）懸浮液，并抵消其他載體如聚乙烯亞胺(PEI)和樹...

在大腸桿菌細(xì)胞中復(fù)制的質(zhì)粒通常含有二核苷酸頻率為1:16的CpG基序，這與細(xì)菌DNA中的頻率相似。CpG免疫刺激的兩個(gè)應(yīng)用領(lǐng)域是疫苗接種和腫瘤免疫***。許多出版物表明，免疫刺激CpG基序可以用于疫苗接種策略，包括給藥編碼抗原的pDNA載體或給藥抗原本身。通過(guò)...

Severinoetal.進(jìn)行的研究也指出了陽(yáng)離子脂質(zhì)作為基因遞送納米載體的潛在毒性。他們成功實(shí)現(xiàn)了人動(dòng)力蛋白的表達(dá)，但也證明了較高濃度的SLN仍然具有細(xì)胞毒性，并導(dǎo)致活細(xì)胞數(shù)量減少。另一組比較了DNA/DOTAP復(fù)合物和由魚精蛋白、DNA和脂質(zhì)層組成的納米顆...

**近的研究已經(jīng)確定了陽(yáng)離子脂質(zhì)體（CLs）的某些特征，這些特征增強(qiáng)了它們?cè)隗w內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)核酸的能力。這些特征包括陽(yáng)離子頭基團(tuán)及其鄰近的脂肪鏈在主鏈上呈1,2關(guān)系，醚鍵用于橋接脂肪鏈到主鏈，成對(duì)的油基鏈作為疏水系鏈。無(wú)論如何，這些特征雖然不能決定細(xì)胞培養(yǎng)中更好的轉(zhuǎn)染...

化學(xué)轉(zhuǎn)染的效率在很大程度上取決于幾個(gè)因素，如使用的試劑類型、靶細(xì)胞的來(lái)源和性質(zhì)，以及選擇的比較好DNA與試劑比例。慢病毒等病毒載體能夠攜帶大尺寸的核酸，并將其靶標(biāo)傳遞給非分裂細(xì)胞和分裂細(xì)胞，因此在基因***中非常有用。有幾個(gè)因素已被證明可能影響病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的效率，...

脂質(zhì)體制備方法：薄膜?化法薄膜?化法是?種傳統(tǒng)的技術(shù)，有利于裝載親脂***物。薄膜是通過(guò)在真空條件下燒瓶旋轉(zhuǎn)過(guò)程中使脂質(zhì)溶劑溶液蒸發(fā)?形成的。MLVs懸浮液可以通過(guò)加??溶液?化脂膜得到。進(jìn)?步縮?粒徑可獲得SUV，在脂質(zhì)體形成過(guò)程中或形成脂質(zhì)體后，可分別被動(dòng)...

CY5熒光染料是一種被廣泛應(yīng)用于生物分子檢測(cè)和熒光成像等領(lǐng)域的高效、穩(wěn)定的熒光標(biāo)記試劑。它具有出色的熒光性能和良好的生物相容性。Cy5屬于小分子染料，其*大發(fā)射波長(zhǎng)為670nm，其標(biāo)記的抗體適用于所有配備633nm氬離子激光器的流式細(xì)胞儀，檢測(cè)通道一般是FL4...

脂質(zhì)體的載藥率脂質(zhì)體的載藥率是指單位質(zhì)量的脂質(zhì)體所能承載的藥物量。它是評(píng)估脂質(zhì)體藥物傳遞效果的重要指標(biāo)之一，通常通過(guò)藥物在脂質(zhì)體中的含量或釋放速率來(lái)表征。脂質(zhì)體的載藥率受多種因素影響，包括脂質(zhì)體的組成、結(jié)構(gòu)、制備方法以及藥物本身的性質(zhì)。以下是影響脂質(zhì)體載藥率的...

攜帶要轉(zhuǎn)染的特定核酸的載體構(gòu)建可以進(jìn)一步分為病毒載體或質(zhì)粒載體。病毒和質(zhì)粒通過(guò)存在合適的真核啟動(dòng)子促進(jìn)外源轉(zhuǎn)基因的表達(dá)。病毒載體可能在宿主細(xì)胞中觸發(fā)免疫原性反應(yīng)，而非病毒載體的免疫原性相對(duì)較低。需要一種傳遞機(jī)制來(lái)促進(jìn)靶向核酸或載體結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)移到宿主細(xì)胞中。其中一些...

基因和RNAi***在臨床上的應(yīng)用需要安全高效的載體。迄今為止，核酸***的兩種主要方法是基于病毒和非病毒載體。與病毒載體相關(guān)的安全問(wèn)題有很多:誘導(dǎo)免疫反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)、不必要的突變和**。因此，在開發(fā)基于脂質(zhì)或聚合載體的非病毒載體是勢(shì)在必行的。1965年，Vahe...

PLL(聚L -賴氨酸)是生理?xiàng)l件下帶正電的多氨基酸,當(dāng)鏈長(zhǎng)超過(guò)20個(gè)殘基時(shí)，它可以與質(zhì)粒DNA結(jié)合并凝聚成致密顆粒。研究人員發(fā)現(xiàn)，配體在PLL上的共價(jià)附著可通過(guò)受體介導(dǎo)的途徑***增強(qiáng)內(nèi)吞作用。例如，涎腺樣體(ASOR)是涎腺糖蛋白受體的配體，在肝細(xì)胞上表達(dá)...

在選擇合適的小RNA分子進(jìn)行轉(zhuǎn)染相關(guān)功能分析之前，應(yīng)先確定其實(shí)驗(yàn)需要。例如，siRNA*對(duì)一個(gè)靶標(biāo)具有高度特異性，而miRNA具有調(diào)節(jié)多個(gè)下游靶標(biāo)的潛力。如今，可以人工合成各種類型的短長(zhǎng)度寡核苷酸來(lái)模仿小RNA分子，以研究這些小RNA分子的敲入/敲入/敲出效應(yīng)...

在1990年代***使用的綠色熒光蛋白（從水母維多利亞水母克?。┘捌溲苌铮ɡ缭寮t藍(lán)蛋白、藻膽蛋白和藻紅蛋白等）是當(dāng)今生物學(xué)研究中**常用的一些生物熒光團(tuán)。雖然熒光團(tuán)可用于在細(xì)胞、細(xì)菌和各種***中表達(dá)質(zhì)粒，但它們的使用有一些缺點(diǎn)，即它可能很耗時(shí)，并且在融合...

共轉(zhuǎn)染是將一種以上類型的核酸引入真核細(xì)胞的過(guò)程。組合的一些例子包括多個(gè)質(zhì)粒DNA ,siRNA和質(zhì)粒DNA ，以及多個(gè)miRNAs進(jìn)入同一個(gè)細(xì)胞。通常，多質(zhì)粒DNA共轉(zhuǎn)染的目的是將一種以上的外源基因?qū)胨拗骷?xì)胞。其應(yīng)用之一是生產(chǎn)由幾種質(zhì)粒DNA成分組成的合成病...

異硫氰酸熒光素（fluoresceinisothiocyanate，F(xiàn)ITC）：FITC是應(yīng)用*為***的一種熒光素，經(jīng)激光激發(fā)后發(fā)出明亮的黃綠色熒光，*大發(fā)射波長(zhǎng)為525nm。FITC的熒光強(qiáng)度受PH影響較大，常隨著PH的降低而減弱，因此，在使用FITC時(shí)需...

熒光染料標(biāo)記蛋白或肽技術(shù)是一種常見的蛋白質(zhì)體外標(biāo)記技術(shù)。除了GFP等熒光蛋白的融合表達(dá)外，目標(biāo)蛋白還可以通過(guò)熒光染料標(biāo)記直接進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)操作，如***跟蹤、細(xì)胞分選等。 FITC熒光標(biāo)記的原理是什么？ 熒光標(biāo)記所依賴的化合物稱為熒光材料。熒光材...

陽(yáng)離子聚合物是一種非病毒載體，其結(jié)構(gòu)的一個(gè)共同特征是分子中存在許多帶正電的基團(tuán)，這些基團(tuán)被質(zhì)子化成帶正電的聚合物。陽(yáng)離子聚合物可以通過(guò)靜電相互作用結(jié)合核酸，并將其凝聚成小的納米顆粒。正電荷改善了與帶負(fù)電荷的細(xì)胞膜的相互作用，并幫助多聚體在溶酶體降解發(fā)生之前逃離...