Severinoetal.進(jìn)行的研究也指出了陽(yáng)離子脂質(zhì)作為基因遞送納米載體的潛在毒性。他們成功實(shí)現(xiàn)了人動(dòng)力蛋白的表達(dá),但也證明了較高濃度的SLN仍然具有細(xì)胞毒性,并導(dǎo)致活細(xì)胞數(shù)量減少。另一組比較了DNA/DOTAP復(fù)合物和由魚精蛋白、DNA和脂質(zhì)層組成的納米顆...
評(píng)估轉(zhuǎn)染效率至關(guān)重要,特別是在需要高轉(zhuǎn)染效率以保證特定下游靶標(biāo)轉(zhuǎn)錄后調(diào)控的功能研究中??梢赃x擇多種策略來(lái)評(píng)估轉(zhuǎn)染效率。實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)(qPCR)是一種通過(guò)直接測(cè)量特定外源蛋白表達(dá)水平來(lái)評(píng)估轉(zhuǎn)染效率的定量方法。細(xì)胞內(nèi)核酸或其他可能受到外源核酸(如miRNAs)...
陽(yáng)離子聚合物是一種非病毒載體,其結(jié)構(gòu)的一個(gè)共同特征是分子中存在許多帶正電的基團(tuán),這些基團(tuán)被質(zhì)子化成帶正電的聚合物。陽(yáng)離子聚合物可以通過(guò)靜電相互作用結(jié)合核酸,并將其凝聚成小的納米顆粒。正電荷改善了與帶負(fù)電荷的細(xì)胞膜的相互作用,并幫助多聚體在溶酶體降解發(fā)生之前逃離...
Cy5:激發(fā)波長(zhǎng)633/635nm,比較大發(fā)射波長(zhǎng)670nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備633nm氟離子激光器的流式細(xì)胞儀;2)在流式細(xì)胞儀的FL4通道檢測(cè);3)適用于熒光顯微鏡技術(shù);4)同樣為小分子染料,非常適合需小分子染料的流式細(xì)胞術(shù),熒光強(qiáng)度低于...
基于病毒的轉(zhuǎn)染,或者更具體地稱為轉(zhuǎn)導(dǎo),涉及使用病毒載體將特定的核酸序列帶入宿主細(xì)胞。逆轉(zhuǎn)錄病毒,如慢病毒,通常用于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。相比之下,腺病毒、腺相關(guān)病毒(AAV)和皰疹病毒是不能保證穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的病毒載體。與非病毒轉(zhuǎn)染相比,病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)被***認(rèn)為是一種轉(zhuǎn)染難以轉(zhuǎn)染的...
除了mRNA疫苗,DNA疫苗也是不錯(cuò)的選擇。在聚葡萄糖、精胺(PG)偶聯(lián)物和第四代聚酰胺樹狀大分子(PAMAM G4)的幫助下,研究人員集中研究了將合成t細(xì)胞免疫原作為DNA疫苗使用的方法。他們改進(jìn)了PG和PAMAM G4復(fù)合物的大小、運(yùn)動(dòng)性和表面電荷,然后在...
基于病毒的轉(zhuǎn)染,或者更具體地稱為轉(zhuǎn)導(dǎo),涉及使用病毒載體將特定的核酸序列帶入宿主細(xì)胞。逆轉(zhuǎn)錄病毒,如慢病毒,通常用于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。相比之下,腺病毒、腺相關(guān)病毒(AAV)和皰疹病毒是不能保證穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的病毒載體。與非病毒轉(zhuǎn)染相比,病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)被***認(rèn)為是一種轉(zhuǎn)染難以轉(zhuǎn)染的...
基因注射包括通過(guò)注射將所需的核酸物質(zhì)直接輸送到宿主細(xì)胞核中。當(dāng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染具有挑戰(zhàn)性時(shí),特別是當(dāng)需要對(duì)宿主細(xì)胞進(jìn)行遺傳修飾時(shí),這種方法是一種很好的替代方法。與其他非病毒基因傳遞方法一樣,沒(méi)有一種方法可以適用于所有不同的細(xì)胞類型,選擇合適的細(xì)胞類型和核酸大小對(duì)于確保...
基因***是陽(yáng)離子聚合物作為轉(zhuǎn)染劑的主要應(yīng)用。通過(guò)攜帶質(zhì)粒DNA、mRNA和siRNA,陽(yáng)離子聚合物實(shí)現(xiàn)了與***相關(guān)的功能,如基因增強(qiáng)、基因抑制和基因組編輯?;?****直接、或許也是**簡(jiǎn)單的策略是添加新的蛋白質(zhì)編碼基因。在當(dāng)前**背景下,mRNA疫苗的...
脂質(zhì)體制備方法:破碎技術(shù)尺?和尺?分布是脂質(zhì)體性能和安全性的關(guān)鍵屬性。有?種?法可?于減少脂質(zhì)體的尺?,如(超)超聲(通過(guò)浴或探針),擠壓,均質(zhì),或組合?法,如凍融擠壓,凍融超聲和?壓均質(zhì)擠壓技術(shù)。在這些技術(shù)中,擠壓和?壓均質(zhì)(HPH)是在制藥制造中**常?的...
脂質(zhì)體的靶向釋放載藥脂質(zhì)體在體內(nèi)的行為主要受囊泡的吸收、分布和消除等各種藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的影響。肝臟、脾臟和骨髓中的固定組織巨噬細(xì)胞是脂質(zhì)體在靜脈給藥后可能進(jìn)入的主要部位。大脂質(zhì)體(>0.5μm直徑)被固定組織巨噬細(xì)胞和血液?jiǎn)魏思?xì)胞吞噬。對(duì)于小脂質(zhì)體(<0.1μm)...
小動(dòng)物***成像熒光染料是一種先進(jìn)的技術(shù),可以在***小動(dòng)物體內(nèi)實(shí)時(shí)觀察和研究細(xì)胞、組織和***的功能和代謝過(guò)程。這種染料具有以下幾個(gè)特點(diǎn):1.高度選擇性:小動(dòng)物***成像熒光染料能夠選擇性地與目標(biāo)細(xì)胞或組織結(jié)合,使其在***成像過(guò)程中能夠清晰地顯示出來(lái),從而...
DOPC和DEPC是兩親性兩性離?磷脂,可形成蜂窩狀腔室的壁。帶負(fù)電荷的DPPG可阻?MVLs聚集。中性脂類(如三油酯和?油三酯)在雙層交叉點(diǎn)處充當(dāng)疏?空間填充劑,并穩(wěn)定這些膜結(jié)構(gòu)。沒(méi)有中性脂質(zhì),將形成常規(guī)的ULV或MLV,?不是MVLs。配?中中性脂的?量決...
納米微泡的直徑通常在150-500納米之間,是***藥物分布的誘人場(chǎng)景,并且與微泡相比,已證明可以改善**聚集和保留。近年來(lái),納米微泡表現(xiàn)出優(yōu)異的穩(wěn)定性,這增加了它們?cè)诟鞣N生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用中的應(yīng)用。納米微泡提供超聲影像的對(duì)比度增強(qiáng),因此具有***的診斷應(yīng)用潛力。此...
脂質(zhì)體中輔助脂質(zhì)中性脂也經(jīng)常被用作陽(yáng)離子脂質(zhì)體的助手。例如,已知中性脂質(zhì)1,2-二油基-asn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DOPE)在胞吞作用后參與內(nèi)體逃逸,膽固醇(一種內(nèi)源性脂質(zhì))可以插入脂質(zhì)雙層之間以增加納米顆粒的剛性。為了增加體內(nèi)穩(wěn)定性,一種非常普遍的方法包...
***斑塊的檢測(cè)對(duì)于*******的發(fā)病率和死亡率可能更為重要。由于潛在的炎癥,活性斑塊區(qū)域的內(nèi)皮細(xì)胞被***馬托雷過(guò)程;因此,內(nèi)皮細(xì)胞中這些位點(diǎn)上的VCAM-1和選擇素應(yīng)該被上調(diào),用抗VCAM-1靶向微泡和抗p-選擇素靶向或抗e -選擇素靶向泡進(jìn)行分子成像可...
在各種類型的脂質(zhì)體中,免疫脂質(zhì)體因其靶向能力而受到***關(guān)注。 由于存在附著在其表面的抗體,這些脂質(zhì)體表現(xiàn)出免疫應(yīng)答。免疫脂質(zhì)體的制備, 即抗體與脂質(zhì)體的偶聯(lián),并不是那么簡(jiǎn)單, 甚至在其配方過(guò)程中可能會(huì)帶來(lái)挑戰(zhàn)。 蛋白質(zhì)分子和單克隆抗體可以直接偶聯(lián)到脂質(zhì)體、聚...
1.DiD,DiO,DiI,DiR和DiS細(xì)胞膜染色液制備(1)配置DMSO或EtOH儲(chǔ)存液:儲(chǔ)存液用DMSO或EtOH配置濃度1~5mM。注意:未使用的儲(chǔ)存液保存在-20°C,避免反復(fù)凍融。(2)工作液制備:用合適的緩沖液(如:無(wú)血清培養(yǎng)基,HBSS或P...
D-熒光素是熒光素酶 (Luc) 的天然底物,可催化螢火蟲產(chǎn)生典型的黃綠色光。該反應(yīng)的 560 nm 化學(xué)發(fā)光在幾秒鐘內(nèi)達(dá)到峰值,當(dāng)?shù)孜餆晒馑剡^(guò)量時(shí),光輸出與熒光素酶濃度成正比。熒光素酶 (luc) 基因是用于研究和藥物篩選的流行報(bào)告基因?;瘜W(xué)發(fā)光技術(shù)幾乎沒(méi)有...
脂質(zhì)體的靶向釋放載藥脂質(zhì)體在體內(nèi)的行為主要受囊泡的吸收、分布和消除等各種藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的影響。肝臟、脾臟和骨髓中的固定組織巨噬細(xì)胞是脂質(zhì)體在靜脈給藥后可能進(jìn)入的主要部位。大脂質(zhì)體(>0.5μm直徑)被固定組織巨噬細(xì)胞和血液?jiǎn)魏思?xì)胞吞噬。對(duì)于小脂質(zhì)體(<0.1μm)...
羅丹明123一種可對(duì)活細(xì)胞線粒體染色的細(xì)胞染色試劑。羅丹明123可透過(guò)細(xì)胞膜且在活細(xì)胞的線粒體內(nèi)聚集,并發(fā)出黃綠色熒光。羅丹明123***用作檢測(cè)線粒體膜電位,也常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)。由于細(xì)胞內(nèi)ATP的量與羅丹明123的熒光強(qiáng)度之間有相關(guān)性,此熒光染料被應(yīng)用...
使用螢火蟲熒光素酶(Fluc)作為報(bào)告基因和 D-熒光素作為底物的生物發(fā)光成像(BLI)是目前應(yīng)用*****的技術(shù)。將總信號(hào)強(qiáng)度相對(duì)于 D-熒光素注射后的時(shí)間進(jìn)行繪制,以生成時(shí)間-強(qiáng)度曲線。除了峰值信號(hào)外,還確定注射 D-熒光素后固定時(shí)間點(diǎn)(5、10、15 和...
5.熒光標(biāo)記的定量分析:通過(guò)測(cè)量熒光信號(hào)的強(qiáng)度,可以對(duì)載藥脂質(zhì)體中藥物的含量進(jìn)行定量分析。這對(duì)于確定藥物的釋放量、藥物在體內(nèi)的濃度以及載藥脂質(zhì)體的穩(wěn)定性等方面至關(guān)重要。熒光標(biāo)記可以提供一個(gè)快速、準(zhǔn)確的定量檢測(cè)方法,為藥物輸送系統(tǒng)的研究和應(yīng)用提供了便利。6.探索...
脂質(zhì)體核酸疫苗核酸***劑是一類新興的藥物,顯示出***各種疾病的潛力。然而,由于核酸是多價(jià)陰離子和高度親水分子,它們幾乎不被細(xì)胞吸收。它們也很容易被血液中的核酸酶降解。因此,它們需要一種傳遞載體才能進(jìn)入細(xì)胞并發(fā)揮作用。LNP載體是核酸類藥物的成功載體之一。核...
超聲微泡的粒徑大小直接影響微泡的動(dòng)物的體內(nèi)滲透和代謝。首先,與傳統(tǒng)藥物相比,超聲造影劑微泡相對(duì)較大。微泡的直徑一般為1-10um。**血管特別具有滲透性,通常有較大的內(nèi)皮間隙;然而,造影劑微泡通常太大而無(wú)法脫離脈管系統(tǒng)。在Wheatley等人**近的一篇文章中...
脂質(zhì)體的緩釋作用***藥物可通過(guò)脂質(zhì)體的包封,以緩釋方式進(jìn)入體循環(huán)。DepoCyt?由阿糖胞苷組成,是1999年進(jìn)入市場(chǎng)的***個(gè)緩釋注射產(chǎn)品。DepoFoam?是SkyePharma在DepoCyt?that中應(yīng)用的一種緩釋注射技術(shù),用于***淋巴瘤,即淋巴...
熒光染料在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中具有廣泛的應(yīng)用1、細(xì)胞膜標(biāo)記:可以使用熒光染料標(biāo)記細(xì)胞膜,以觀察和研究細(xì)胞膜的動(dòng)態(tài)和結(jié)構(gòu)變化。2、染色體和DNA標(biāo)記:用熒光染料標(biāo)記染色體或DNA,可以觀察和分析DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、修復(fù)等過(guò)程3、蛋白質(zhì)標(biāo)記:通過(guò)熒光染料標(biāo)記蛋白質(zhì),可以研究蛋...
南京星葉生物科技有限公司各類熒光染料 多肽、蛋白、抗體標(biāo)記:5(6)-FAM5(6)-FAM5-FAM6-FAM5(6)-FAM,SE5-FAM,SE6-FAM,SE5(6)-TAMRA5-TAMRA6-TAMRA5(6)-TAMRA,SE5-TAM...
羅丹明屬于呫噸族。與市場(chǎng)上的許多其他染料相比,羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性,使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。它們?cè)诰酆衔锛{米粒子表面的表征、聚合物-生物偶聯(lián)物的檢測(cè)、活細(xì)胞的成像以及寡核苷酸在膠乳上的吸附分析等方面特別有用。羅丹明熒光染...
microRNA脂質(zhì)體 microRNA是真核細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的短(約22mer)非編碼RNA,通過(guò)結(jié)合互補(bǔ)的mRNA序列發(fā)揮生物調(diào)節(jié)劑的作用。miRNA以初級(jí)miRNA的形式從其編碼的核基因轉(zhuǎn)錄,其長(zhǎng)度為數(shù)百個(gè)核苷酸。RNaseIII酶,Drosha,將...