歐易酵母文庫(kù)助力小麥根研究,本研究克隆了小麥的 ERFs 轉(zhuǎn)錄因子家族 1 個(gè)成員 TaSRL1，它可以調(diào)控生長(zhǎng)素生物合成、轉(zhuǎn)運(yùn)和信號(hào)轉(zhuǎn)到相關(guān)基因的表達(dá)，并與生長(zhǎng)素轉(zhuǎn)運(yùn)基因 TaPIN2 啟動(dòng)子序列結(jié)合促進(jìn)其表達(dá)，進(jìn)而抑制根的生長(zhǎng)。此外，TaSRL1 可以與 JAZ 蛋白 TaTIFY9 相互作用，破壞 TaSRL1 對(duì) TaPIN2 表達(dá)的促進(jìn)作用。因此 TaSRL1 可整合根生長(zhǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)素和 JA 信號(hào)，負(fù)調(diào)控根的伸長(zhǎng)。TaSRL1-4A 標(biāo)記對(duì)小麥育種過(guò)程中根系、株形和產(chǎn)量的改良具有重要研究意義。酵母單雜交技術(shù)是在酵母雙雜基礎(chǔ)上發(fā)展而來(lái)的一種研究核酸。上海酵母文庫(kù)質(zhì)量

酵母雙雜交文庫(kù)：瘧疾是人類(lèi)**古老的疾病之一，每年4月25日是世界防治瘧疾日，瘧疾目前仍是公眾健康所面臨的**嚴(yán)重威脅之一?；谇噍锼氐穆?lián)合處理法（ACTs）是WHO推薦的比較好處理方案。因發(fā)現(xiàn)具有抗瘧作用的青蒿素，挽救了數(shù)百萬(wàn)人的生命，屠呦呦教授獲得了2015年諾貝爾生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)，從青蒿中分離出的青蒿素被推薦作為抗瘧疾的優(yōu)先藥物。之前研究表明，茉莉酸（JA）介導(dǎo)促成的青蒿素積累依賴(lài)于光，轉(zhuǎn)錄因子HY5也通過(guò)參與光信號(hào)調(diào)控促進(jìn)青蒿素合成。然而，光與JA相互作用機(jī)制及其對(duì)青蒿素生物合成調(diào)控的潛在機(jī)理仍未得到解決。湖南酵母文庫(kù)領(lǐng)域?qū)I(yè)化的篩庫(kù)流程，多重質(zhì)檢保證質(zhì)量。初篩+復(fù)篩提高目標(biāo)陽(yáng)性克隆質(zhì)粒精確度。

酵母單雜交篩選：（4）在篩選到的轉(zhuǎn)錄因子中，***GL1促進(jìn)HIV-2轉(zhuǎn)錄。***GL1在免疫細(xì)胞中***表達(dá)，并與HIV的其他轉(zhuǎn)錄***因子，即Sp1、AP-1和PCAF/CBP/P300存在相互作用，本研究中顯示HEK293T細(xì)胞中，***GL1過(guò)表達(dá)后，與LTR連接的螢火素酶表達(dá)上升近2倍，說(shuō)明***GL1是一個(gè)轉(zhuǎn)錄***因子。值得一提的是，文章的背景介紹內(nèi)容中，對(duì)應(yīng)用其他技術(shù)（如RNAi、scRNA-seq、CRISPR等）對(duì)HIV轉(zhuǎn)錄調(diào)控方向的已有成果分析，發(fā)現(xiàn)這些方法為HIV-1的復(fù)制和潛伏期提供了見(jiàn)解，但并沒(méi)有直接評(píng)估轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合和功能。文章中也對(duì)酵母單雜交技術(shù)與其他互作組技術(shù)（如Chip-seq、motif預(yù)測(cè)）進(jìn)行了比較分析，發(fā)現(xiàn)eY1H技術(shù)對(duì)已識(shí)別因子的驗(yàn)證率為30-60%，同等或優(yōu)于其他技術(shù)。

酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn):本研究報(bào)道了 OsNF-YB9 和 OsNF-YB7 在水稻中呈現(xiàn)亞功能化。OsNF-YB7 主要在胚中表達(dá)，而 OsNF-YB9 主要在發(fā)育中的胚乳中表達(dá)。在擬南芥 lec1-1 中異源表達(dá) OsNF-YB9 或 OsNF-YB7 可以彌補(bǔ) lec1-1 缺陷。OsNF-YB9 功能缺失導(dǎo)致種子發(fā)育異常，種子變長(zhǎng)、變窄、變薄，堊白率較高。此外，osnf-yb9 中淀粉合成相關(guān)基因的表達(dá)紊亂。OsNF-YB9 可以與主要在水稻胚乳中表達(dá)的蔗糖合酶蛋白激酶 SPK 相互作用。spk 敲除突變體種子與 osnf-yb9 突變體種子都表現(xiàn)出堊白增加的表型。OsNF-YB9 在水稻和擬南芥中的異位表達(dá)導(dǎo)致了種子變小。綜上表明，OsNF-YB9 在水稻種子發(fā)育中起到關(guān)鍵調(diào)控作用。酵母文庫(kù)已知蛋白互作靈活定制建庫(kù)。

利用酵母文庫(kù)進(jìn)行雙雜交篩選，結(jié)果顯示 MdBT2 可以與 MdRGL3a 結(jié)合。MdRGL3a 編碼 GA 信號(hào)阻遏物 DELLA 蛋白，主要分布于細(xì)胞核中。MdRGL3a 對(duì)于 GA 處理非常敏感，可以引起其發(fā)生降解，PAC 處理可以提高其穩(wěn)定性。進(jìn)一步的酵母一對(duì)一雜交驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)表明，兩者的結(jié)合依賴(lài)于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 結(jié)構(gòu)域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif（圖 A-B）。并通過(guò) GST pull-down、BiFC 實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了 MdBT2與 MdRGL3a 的結(jié)合（圖 C-D）。細(xì)胞外降解實(shí)驗(yàn)顯示，與對(duì)照相比，MdRGL3a 與過(guò)表達(dá) MdBT2 的愈傷組織的總蛋白共同孵育，會(huì)導(dǎo)致 MdRGL3a 的降解加快；而與抑制 MdBT2 表達(dá)的愈傷組織的總蛋白共同孵育，會(huì)導(dǎo)致 MdRGL3a 的降解減緩（圖 A）。并且蛋白酶體抑制劑 MG132 可以***抑制 MdRGL3a 的降解（圖 B）。改變 MdRGL3a 表達(dá)量并不影響 MdBT2 的降解。以上結(jié)果表明，MdRGL3a 可能通過(guò) 26S 蛋白酶體途徑發(fā)生降解，而 MdBT2 可以抑制 MdRGL3a 的降解。初篩+復(fù)篩提高目標(biāo)陽(yáng)性克隆質(zhì)粒精確度。一對(duì)一篩庫(kù)驗(yàn)證服務(wù)，客戶(hù)無(wú)需再次驗(yàn)證。湖南酵母文庫(kù)領(lǐng)域

液態(tài)酵母單雙雜高通量篩庫(kù)方法及其應(yīng)用。上海酵母文庫(kù)質(zhì)量

酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)表明，PtMADS11 與 PtDAL1 之間存在直接的相互作用（圖 C），并通過(guò) BiFC、GST pull-down 得以證實(shí)（圖 D-E）。為進(jìn)一步研究在年齡信號(hào)調(diào)控中的作用機(jī)制，分別構(gòu)建了過(guò)表達(dá)PtDAL1和PtMADS11的擬南芥。與對(duì)照相比，過(guò)表達(dá)PtDAL1***提前了擬南芥的營(yíng)養(yǎng)-生殖時(shí)相轉(zhuǎn)換（圖A），證實(shí)PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了關(guān)鍵作用。過(guò)表達(dá)PtMADS11植株在短日照下表現(xiàn)出早開(kāi)花和花序結(jié)構(gòu)過(guò)早終止，表明PtMADS11在開(kāi)花調(diào)節(jié)和花序內(nèi)分生組織命運(yùn)起到調(diào)控作用。在擬南芥中利用年齡調(diào)控通路不同節(jié)點(diǎn)關(guān)鍵基因突變體進(jìn)行功能互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示過(guò)表達(dá)PtDAL1可以恢復(fù)由于過(guò)表達(dá)miR156導(dǎo)致的開(kāi)花延遲，但ft缺失會(huì)導(dǎo)致PtDAL1失活，PtDAL1過(guò)表達(dá)也不能恢復(fù)soc1-1-2突變體的表型，表明PtDAL1依賴(lài)或處于FT/SOC1的上游。而過(guò)表達(dá)PtMADS11可以恢復(fù)由過(guò)表達(dá)miR156或ft缺失導(dǎo)致的開(kāi)花延遲，表明PtMADS11對(duì)開(kāi)花的調(diào)控不依賴(lài)于miR156或FT。上海酵母文庫(kù)質(zhì)量

上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司位于聯(lián)航路1188號(hào)25幢。公司自成立以來(lái)，以質(zhì)量為發(fā)展，讓匠心彌散在每個(gè)細(xì)節(jié)，公司旗下科研服務(wù)，科研檢測(cè)，學(xué)術(shù)研究，技術(shù)咨詢(xún)深受客戶(hù)的喜愛(ài)。公司注重以質(zhì)量為中心，以服務(wù)為理念，秉持誠(chéng)信為本的理念，打造醫(yī)藥健康良好品牌。歐易生物秉承“客戶(hù)為尊、服務(wù)為榮、創(chuàng)意為先、技術(shù)為實(shí)”的經(jīng)營(yíng)理念，全力打造公司的重點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)力。