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江西宣傳酵母文庫

來源: 發(fā)布時間:2022-05-24

利用酵母文庫進行雙雜交篩選,結(jié)果顯示 MdBT2 可以與 MdRGL3a 結(jié)合。MdRGL3a 編碼 GA 信號阻遏物 DELLA 蛋白,主要分布于細胞核中。MdRGL3a 對于 GA 處理非常敏感,可以引起其發(fā)生降解,PAC 處理可以提高其穩(wěn)定性。進一步的酵母一對一雜交驗證實驗表明,兩者的結(jié)合依賴于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 結(jié)構(gòu)域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif(圖 A-B)。并通過 GST pull-down、BiFC 實驗也證實了 MdBT2與 MdRGL3a 的結(jié)合(圖 C-D)。細胞外降解實驗顯示,與對照相比,MdRGL3a 與過表達 MdBT2 的愈傷組織的總蛋白共同孵育,會導致 MdRGL3a 的降解加快;而與抑制 MdBT2 表達的愈傷組織的總蛋白共同孵育,會導致 MdRGL3a 的降解減緩(圖 A)。并且蛋白酶體抑制劑 MG132 可以***抑制 MdRGL3a 的降解(圖 B)。改變 MdRGL3a 表達量并不影響 MdBT2 的降解。以上結(jié)果表明,MdRGL3a 可能通過 26S 蛋白酶體途徑發(fā)生降解,而 MdBT2 可以抑制 MdRGL3a 的降解。酵母文庫質(zhì)粒使用指南酵母菌的介紹 。江西宣傳酵母文庫

進行了酵母雙雜交文庫的篩選,結(jié)果顯示鈣依賴的種子特異性蛋白激酶SPK可以與OsNF-YB9相互作用,分段截取互作驗證顯示OsNF-YB9的N端是互作所必須的(圖a-b),并通過雙熒光分子互補實驗、BiFC、體外GST-pulldown實驗得以證實(圖c-e)。亞細胞定位顯示SPK主要在細胞質(zhì)中表達,OsNF-YB9在細胞質(zhì)和細胞核中都有表達,共表達SPK和OsNF-YB9***促進了OsNF-YB9的入核(圖f),表明SPK和OsNF-YB9的相互作用可能促進了OsNF-YB9從細胞質(zhì)向細胞核的運輸。RT-PCR顯示SPK在發(fā)育中的種子中高表達,在5DAF開始***,并在10-30DAF維持高表達水平(圖a-b)。spk敲除突變體種子中堊白率的增加(圖c-e),但粒形和粒重與野生型沒有***差別。江西宣傳酵母文庫酵母雜交技術(shù)是很巧妙且很好用的蛋白/蛋白,蛋白/DNA等分子互作檢測的技術(shù)。

酵母文庫實驗由歐易生物完成。6.902)在線發(fā)表了題為“MKK4-MPK3-WRKY17-mediated salicylic acid degradation increases susceptibility to Glomerella leaf spot in apple”的研究論文,報道了一個蘋果炭疽葉枯病易感相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子 MdWRKY17,并對其作用機制進行了詳細探討。蘋果是世界上頗受歡迎的水果。蘋果炭疽葉枯病(Glomerellaleafspot,GLS)在我國多次爆發(fā),是蘋果相當有毀滅性的***病害之一,嚴重影響蘋果質(zhì)量和產(chǎn)量。但目前在蘋果中尚未鑒定出GLS的抗性基因。

目前,歐易生物負責該水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫的維護和保存工作,并對廣大水稻科研工作者提供轉(zhuǎn)錄因子篩選服務。如去年歐易生物助力中國科學院分子植物科學***創(chuàng)新中心的王二濤老師應用該文庫對水稻-叢枝菌根進行了深入研究,成功構(gòu)建了水稻-叢枝菌轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡,結(jié)果發(fā)表于《Cell》封面。截至文章發(fā)表,該文庫已收錄了1683個水稻轉(zhuǎn)錄因子,隸屬于54個家族,覆蓋預測的水稻轉(zhuǎn)錄因子總量的70%。文庫中水稻轉(zhuǎn)錄因子的a基因信息來源于PlantTFDB和KOME數(shù)據(jù)庫。文庫載體使用pGADT7,酵母菌株使用Y187,每一個轉(zhuǎn)錄因子菌株**保存于96孔板中。酵母文庫"酵母"和"文庫"有什么不同。

利用酵母雙雜交技術(shù)進行篩選,結(jié)果顯示SP8可以與水稻OsMYC3蛋白相互作用,并且二者互作關(guān)系通過酵母一對一互作、BiFC、Co-IP、LCI實驗得以驗證(圖A-C)。利用截短的SP8進行酵母一對一互作和Co-IP檢測表明,與OsMYC3的結(jié)合依賴于SP8的NTP結(jié)構(gòu)域(圖D-E);同樣,OsMYC3的TAD結(jié)構(gòu)域也是二者互作所必不可少的(圖F)。酵母雙雜交、BiFC實驗表明,OsMYC3可以與OsJAZ相互作用。經(jīng)茉莉酸處理,野生對照株根的長度明顯被抑制、一系列JA生物合成和信號傳導相關(guān)基因表達量上升,但Osmyc3突變體中抑制程度減輕、JA相關(guān)基因表達量上升減少。酵母文庫和測序建庫是什么?。江西宣傳酵母文庫

酵母文庫 技術(shù)服務歐易生物分子互作一站式服務。江西宣傳酵母文庫

酵母文庫實驗:MAPK級聯(lián)***是植物防御病原體入侵信號傳導過程中的關(guān)鍵事件,MAPKs靶向并磷酸化調(diào)節(jié)下游基因轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄因子,**終響應病原菌的侵入。WRKYs轉(zhuǎn)錄因子是MAPK級聯(lián)的重要目標,在植物對各種病原體的抗性中起著關(guān)鍵作用。蘋果如何響應炭疽菌入侵,將信號傳導到細胞內(nèi),以及哪個轉(zhuǎn)錄因子負責協(xié)調(diào)促進GLS耐受均尚不清楚。本研究在蘋果炭疽葉枯病易感品種“嘎拉”中發(fā)現(xiàn)了一個由蘋果炭疽菌******誘導的轉(zhuǎn)錄因子MdWRKY17。在6個易感蘋果種質(zhì)中,MdWRKY17表達水平***高于6個耐受蘋果種質(zhì),同時對應的水楊酸含量降低,證實了MdWRKY17介導的水楊酸降解在GLS耐受中的關(guān)鍵作用。江西宣傳酵母文庫

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