酵母單雜交篩選技術(shù):關(guān)于HIV想必大家都不陌生,***HIV病毒后潛伏周期長(zhǎng),且目前沒(méi)有完全的***方法。為了徹底***HIV,不讓其發(fā)病就要從2方面入手:要么消除潛伏***的細(xì)胞,要么防止?jié)摲《镜募?xì)胞被***。也就是需要抑制HIV病毒的轉(zhuǎn)錄。但是關(guān)于HIV在人細(xì)胞中的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和潛伏期調(diào)控的分子網(wǎng)絡(luò)仍不完全確定,所以目前HIV仍不能被**。為了幫助解決這個(gè)問(wèn)題,波士頓大學(xué)的研究者,使用酵母單雜交篩選技術(shù),以HIV-1,HIV-2的LTR(啟動(dòng)子和增強(qiáng)子)為誘餌,篩選了人的轉(zhuǎn)錄因子文庫(kù)(包含1086個(gè)人的轉(zhuǎn)錄因子),**終繪制了調(diào)節(jié)HIV-1和HIV-2的轉(zhuǎn)錄網(wǎng)絡(luò)圖譜,結(jié)果發(fā)表在2021年的PNAS雜志上。酵母生長(zhǎng)速度快且容易操作的特點(diǎn)酵母文庫(kù)。海南歐易生物酵母文庫(kù)
通過(guò)酵母雙雜交進(jìn)行篩選,結(jié)果顯示 SWC6 可以在藍(lán)光下與 CRY1 相互作用(圖 A-C)。同樣,酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)顯示 CRY2 也可以在藍(lán)光下與 SWC6 相互作用(圖 D)。并通過(guò) pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實(shí)驗(yàn)(圖 E-L)證實(shí) CRY1、CRY2 與 SWC6 的結(jié)合是藍(lán)光依賴性的。SWC6 是真核生物中已報(bào)道的 SWR1 復(fù)合物亞基,負(fù)責(zé)催化 H2A.Z 在染色質(zhì)上的替換。已報(bào)道 SWR1 復(fù)合物中 SWC6 可以與 ARP6 亞基結(jié)合。Pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實(shí)驗(yàn)(圖 A-H)顯示,CRY1、CRY2 可以藍(lán)光依賴性與 ARP6 結(jié)合。海南歐易生物酵母文庫(kù)酵母單雙雜交服務(wù)促銷季技術(shù)服務(wù)。
本研究利用水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫(kù)篩選,繪制了水稻轉(zhuǎn)錄因子和菌根共生相關(guān)基因之間的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。該網(wǎng)絡(luò)受到保守的磷感應(yīng)途徑統(tǒng)一控制,以磷酸鹽饑餓響應(yīng)因子(PHR)為中心。PHRs 是菌根共生所必需的,通過(guò) P1BS 順式作用元件調(diào)控菌根共生相關(guān)基因表達(dá)。高磷條件下,SPX蛋白抑制 OsPHR2 介導(dǎo)的對(duì)菌根共生相關(guān)基因表達(dá)的調(diào)控,進(jìn)而抑制菌根共生。過(guò)表達(dá) OsPHR2 可以部分拮抗磷介導(dǎo)的對(duì)菌根共生的抑制作用。本研究發(fā)現(xiàn),植物直接營(yíng)養(yǎng)吸收和通過(guò)菌根共生的間接營(yíng)養(yǎng)吸收,都受到相同的磷信號(hào)網(wǎng)絡(luò)統(tǒng)一調(diào)控。本研究將有助于高效用磷植株的培育。
酵母雙雜交技術(shù),自創(chuàng)建以來(lái)被廣泛應(yīng)用于蛋白互作研究領(lǐng)域,在生命科學(xué)的基礎(chǔ)探秘研究中起著重要作用。然而該技術(shù)設(shè)計(jì)初衷,*是斯坦利先生為了完成申請(qǐng)學(xué)校經(jīng)費(fèi)的目的。該技術(shù)設(shè)計(jì)巧妙,它的許多優(yōu)點(diǎn)在設(shè)計(jì)之初并未顯現(xiàn),反而在這么多年的高頻使用和進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用過(guò)程中越發(fā)明顯。(引用自MarcVidal&StanleyFields的“Theyeasttwo-hybridassay:stillfindingconnectionsafter25years”):(1)盡管酵母雜交技術(shù)揭示了蛋白質(zhì)結(jié)合位點(diǎn)的詳細(xì)信息,但操作簡(jiǎn)單。只需2個(gè)質(zhì)粒+1個(gè)菌株即可完成,且有不同體系方便選擇。(2)該技術(shù)利用比較好的DNA結(jié)合位點(diǎn),有效的***結(jié)構(gòu)域和友好的報(bào)告基因系統(tǒng),可以放大弱互作的信號(hào)。(3)該技術(shù)可用于各種物種的蛋白互作檢測(cè),具有物種普適性,尤其是人類蛋白。(4)衍生技術(shù)具有更***的應(yīng)用,可擴(kuò)展到檢測(cè)蛋白質(zhì)與DNA、蛋白質(zhì)與RNA、蛋白質(zhì)與小分子以及其他組合之間的相互作用,甚至可實(shí)現(xiàn)將生理相互作用與表型數(shù)據(jù)直接關(guān)聯(lián)。當(dāng)然,做過(guò)酵母雜交實(shí)驗(yàn)的小伙伴應(yīng)該都了解,互作結(jié)果的判斷,往往要等酵母生長(zhǎng)好幾天才能看出來(lái)(當(dāng)然,小歐認(rèn)為這在偉大的科研事業(yè)過(guò)程中算不上啥),互作強(qiáng)弱也是主觀判斷性較強(qiáng),存在假陽(yáng)性。酵母文庫(kù)產(chǎn)品線由7個(gè)實(shí)驗(yàn)室組成,分別有RNA抽提室,RNA質(zhì)檢室、酵母建庫(kù)室、篩庫(kù)室等。
歐易酵母文庫(kù)助力小麥根長(zhǎng)抑制分子機(jī)制研究,近日,中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所景蕊蓮研究員、河南農(nóng)業(yè)大學(xué)王翔副教授為共同通訊作者,在 Journal of Experimental Botany 雜志(IF: 6.992)在線發(fā)表了題為“Wheat SHORT ROOT LENGTH 1 gene TaSRL1 regulates root length in an auxin-dependent pathway”的研究論文,報(bào)道了小麥 TaSRL1 轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控根長(zhǎng)的分子機(jī)制。文章中酵母雙雜交文庫(kù)由歐易生物完成。根系是植物從土壤中吸收水分、養(yǎng)分和感知環(huán)境刺激的獨(dú)特***。根系結(jié)構(gòu)的優(yōu)化有助于提高植株的抗逆性和產(chǎn)量。ERF(ETHYLENERESPONSIVEFACTOR)是植物特有的轉(zhuǎn)錄因子家族之一,與植物的多種發(fā)育過(guò)程和抗逆性有關(guān)。ERFs在擬南芥和水稻根系發(fā)育中的作用已經(jīng)多有報(bào)道,但小麥ERFs在根系發(fā)育中的作用尚待研究。酵母文庫(kù)技術(shù)服務(wù)歐易生物對(duì)每一個(gè)結(jié)果負(fù)責(zé)。海南歐易生物酵母文庫(kù)
酵母文庫(kù)構(gòu)建的目的酵母的做法。海南歐易生物酵母文庫(kù)
目前,歐易生物負(fù)責(zé)該水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫(kù)的維護(hù)和保存工作,并對(duì)廣大水稻科研工作者提供轉(zhuǎn)錄因子篩選服務(wù)。如去年歐易生物助力中國(guó)科學(xué)院分子植物科學(xué)***創(chuàng)新中心的王二濤老師應(yīng)用該文庫(kù)對(duì)水稻-叢枝菌根進(jìn)行了深入研究,成功構(gòu)建了水稻-叢枝菌轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò),結(jié)果發(fā)表于《Cell》封面。截至文章發(fā)表,該文庫(kù)已收錄了1683個(gè)水稻轉(zhuǎn)錄因子,隸屬于54個(gè)家族,覆蓋預(yù)測(cè)的水稻轉(zhuǎn)錄因子總量的70%。文庫(kù)中水稻轉(zhuǎn)錄因子的a基因信息來(lái)源于PlantTFDB和KOME數(shù)據(jù)庫(kù)。文庫(kù)載體使用pGADT7,酵母菌株使用Y187,每一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子菌株**保存于96孔板中。海南歐易生物酵母文庫(kù)
上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司是一家檢驗(yàn)檢測(cè)服務(wù)。(依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng),具體經(jīng)營(yíng)項(xiàng)目以相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)文件或許可證件為準(zhǔn))一般項(xiàng)目:生物醫(yī)藥產(chǎn)品、生化產(chǎn)品的研發(fā),醫(yī)藥中間體、化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)品化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、易制毒化學(xué)品)的研發(fā)、銷售,儀器儀表的銷售,并提供相關(guān)技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù),會(huì)務(wù)服務(wù),企業(yè)管理咨詢。的公司,致力于發(fā)展為創(chuàng)新務(wù)實(shí)、誠(chéng)實(shí)可信的企業(yè)。歐易生物擁有一支經(jīng)驗(yàn)豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團(tuán)隊(duì),以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供科研服務(wù),科研檢測(cè),學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢。歐易生物致力于把技術(shù)上的創(chuàng)新展現(xiàn)成對(duì)用戶產(chǎn)品上的貼心,為用戶帶來(lái)良好體驗(yàn)。歐易生物創(chuàng)始人張怡,始終關(guān)注客戶,創(chuàng)新科技,竭誠(chéng)為客戶提供良好的服務(wù)。