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酵母單雜交篩選:(4)在篩選到的轉(zhuǎn)錄因子中,***GL1促進(jìn)HIV-2轉(zhuǎn)錄。***GL1在免疫細(xì)胞中***表達(dá),并與HIV的其他轉(zhuǎn)錄***因子,即Sp1、AP-1和PCAF/CBP/P300存在相互作用,本研究中顯示HEK293T細(xì)胞中,***GL1過(guò)表達(dá)后,與LTR連接的螢火素酶表達(dá)上升近2倍,說(shuō)明***GL1是一個(gè)轉(zhuǎn)錄***因子。值得一提的是,文章的背景介紹內(nèi)容中,對(duì)應(yīng)用其他技術(shù)(如RNAi、scRNA-seq、CRISPR等)對(duì)HIV轉(zhuǎn)錄調(diào)控方向的已有成果分析,發(fā)現(xiàn)這些方法為HIV-1的復(fù)制和潛伏期提供了見(jiàn)解,但并沒(méi)有直接評(píng)估轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合和功能。文章中也對(duì)酵母單雜交技術(shù)與其他互作組技術(shù)(如Chip-seq、motif預(yù)測(cè))進(jìn)行了比較分析,發(fā)現(xiàn)eY1H技術(shù)對(duì)已識(shí)別因子的驗(yàn)證率為30-60%,同等或優(yōu)于其他技術(shù)。合作文章上百篇,平均影響因子高達(dá)7.124 歐易生物酵母文庫(kù)。江西酵母文庫(kù)
蛋白被泛素化后(即蛋白上結(jié)合了泛素),意味著將要被運(yùn)往蛋白酶體降解,一般用于降解細(xì)胞內(nèi)老弱病殘蛋白,再回收利用。同時(shí)也被用于排除異己,抵御外敵。該過(guò)程需要一系列酶介導(dǎo):泛素***酶(E1)、泛素偶聯(lián)酶(E2)和泛素E3連接酶(E3)。其中E3是起特異性識(shí)別作用的,即決定誰(shuí)該被降解,不能把好同志降解掉。所以E3基因很多,植物中主要有四種類(lèi)型:HECT、RING、U-box和CRLs。其中CRLs是植物中含量**豐富的E3連接酶。本研究中,通過(guò)酵母雙雜交篩選到的標(biāo)題蛋白MdBT2,整好是CRLs亞家族之一。因此作者推測(cè)MdBT2可能在與ApNMV1a結(jié)合后,起到了促進(jìn)其泛素化和降解的作用。江西酵母文庫(kù)專(zhuān)業(yè)酵母文庫(kù)構(gòu)建和篩選公司多年經(jīng)驗(yàn)。
通過(guò)酵母雙雜交進(jìn)行篩選,結(jié)果顯示 SWC6 可以在藍(lán)光下與 CRY1 相互作用(圖 A-C)。同樣,酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)顯示 CRY2 也可以在藍(lán)光下與 SWC6 相互作用(圖 D)。并通過(guò) pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實(shí)驗(yàn)(圖 E-L)證實(shí) CRY1、CRY2 與 SWC6 的結(jié)合是藍(lán)光依賴(lài)性的。SWC6 是真核生物中已報(bào)道的 SWR1 復(fù)合物亞基,負(fù)責(zé)催化 H2A.Z 在染色質(zhì)上的替換。已報(bào)道 SWR1 復(fù)合物中 SWC6 可以與 ARP6 亞基結(jié)合。Pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實(shí)驗(yàn)(圖 A-H)顯示,CRY1、CRY2 可以藍(lán)光依賴(lài)性與 ARP6 結(jié)合。
利用酵母雙雜交技術(shù)進(jìn)行篩選,結(jié)果顯示SP8可以與水稻OsMYC3蛋白相互作用,并且二者互作關(guān)系通過(guò)酵母一對(duì)一互作、BiFC、Co-IP、LCI實(shí)驗(yàn)得以驗(yàn)證(圖A-C)。利用截短的SP8進(jìn)行酵母一對(duì)一互作和Co-IP檢測(cè)表明,與OsMYC3的結(jié)合依賴(lài)于SP8的NTP結(jié)構(gòu)域(圖D-E);同樣,OsMYC3的TAD結(jié)構(gòu)域也是二者互作所必不可少的(圖F)。酵母雙雜交、BiFC實(shí)驗(yàn)表明,OsMYC3可以與OsJAZ相互作用。經(jīng)茉莉酸處理,野生對(duì)照株根的長(zhǎng)度明顯被抑制、一系列JA生物合成和信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)基因表達(dá)量上升,但Osmyc3突變體中抑制程度減輕、JA相關(guān)基因表達(dá)量上升減少。進(jìn)口試劑高服務(wù)質(zhì)量市場(chǎng)份額大酵母文庫(kù)。
酵母雙雜交、GSTpull-down實(shí)驗(yàn)顯示,SWC6可以直接與HY5、HYH相互作用(圖A-C)。pull-down實(shí)驗(yàn)顯示ARP6同樣可以與HY5、HYH相互作用(圖D)。split-LUC、Co-IP實(shí)驗(yàn)證實(shí)HY5可以與SWC6、ARP6結(jié)合(圖E-J)。下胚軸表型分析顯示,藍(lán)光下arp6hy5hyh三突變體下胚軸長(zhǎng)度明顯大于arp6突變體、hy5hyh雙突變體,表明ARP6和HY5有可能通過(guò)不同途徑調(diào)控下胚軸的發(fā)育。Semi-in vivo pull-down、Co-IP 實(shí)驗(yàn)顯示,藍(lán)光下,在 CRY1 存在下,SWC6 與 ARP6 的結(jié)合***增強(qiáng)。表明藍(lán)光***的 CRY1 可能通過(guò)藍(lán)光依賴(lài)的 CRY1-SWC6/ARP6 相互作用增強(qiáng) SWC6 與 ARP6 的結(jié)合。酵母文庫(kù)已知蛋白互作靈活定制建庫(kù)。江西酵母文庫(kù)
酵母雜交技術(shù)是很巧妙且很好用的蛋白/蛋白,蛋白/DNA等分子互作檢測(cè)的技術(shù)。江西酵母文庫(kù)
文章中酵母雙雜交文庫(kù)由歐易生物制備。2021年5月,北京林業(yè)大學(xué)鈕世輝副教授為通訊作者,在PlantPhysiology雜志(IF:6.902)在線發(fā)表了題為“MADS-boxtranscriptionfactorsMADS11andDAL1interacttomediatethevegetative-to-reproductivetransitioninpine”的研究論文,深入探討了油松中營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)-生殖生長(zhǎng)時(shí)相轉(zhuǎn)變調(diào)控的分子機(jī)制。北京林業(yè)大學(xué)馬晶晶博士為***作者,文章中酵母雙雜交文庫(kù)由歐易生物制備。本研究通過(guò) 7 個(gè)樹(shù)齡的油松樣品轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,鑒定到一個(gè)與年齡信號(hào)***相關(guān)的基因模塊,該模塊包含 33 個(gè)轉(zhuǎn)錄因子,包括 SOC1-like、DAL1 等。江西酵母文庫(kù)
上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司是一家檢驗(yàn)檢測(cè)服務(wù)。(依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng),具體經(jīng)營(yíng)項(xiàng)目以相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)文件或許可證件為準(zhǔn))一般項(xiàng)目:生物醫(yī)藥產(chǎn)品、生化產(chǎn)品的研發(fā),醫(yī)藥中間體、化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)品化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、易制毒化學(xué)品)的研發(fā)、銷(xiāo)售,儀器儀表的銷(xiāo)售,并提供相關(guān)技術(shù)咨詢(xún)、技術(shù)服務(wù),會(huì)務(wù)服務(wù),企業(yè)管理咨詢(xún)。的公司,致力于發(fā)展為創(chuàng)新務(wù)實(shí)、誠(chéng)實(shí)可信的企業(yè)。歐易生物擁有一支經(jīng)驗(yàn)豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專(zhuān)業(yè)研發(fā)團(tuán)隊(duì),以高度的專(zhuān)注和執(zhí)著為客戶(hù)提供科研服務(wù),科研檢測(cè),學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢(xún)。歐易生物始終以本分踏實(shí)的精神和必勝的信念,影響并帶動(dòng)團(tuán)隊(duì)取得成功。歐易生物始終關(guān)注醫(yī)藥健康行業(yè)。滿(mǎn)足市場(chǎng)需求,提高產(chǎn)品價(jià)值,是我們前行的力量。