酵母雙雜交文庫(kù)：本研究通過(guò)7個(gè)樹(shù)齡的油松樣品轉(zhuǎn)錄組測(cè)序，鑒定到一個(gè)與年齡信號(hào)***相關(guān)的基因模塊，該模塊包含33個(gè)轉(zhuǎn)錄因子，包括SOC1-like、DAL1等。油松和晚坐果白皮松突變體中的基因表達(dá)模式分析顯示，PtMADS11與生殖能力之間存在緊密相關(guān)性。酵母雙雜交顯示，MADS11和DAL1直接相關(guān)作用以參與對(duì)年齡信號(hào)的調(diào)控。過(guò)表達(dá)PtMADS11、PDAL1可以部分挽救擬南芥中miR156過(guò)表達(dá)或spl突變導(dǎo)致的開(kāi)花延遲缺陷。只有PtMADS11可以挽救f(wàn)t突變體中的開(kāi)花缺陷，表明它與PtDAL1在擬南芥開(kāi)花調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮了不同的作用。酵母雜交技術(shù)是很巧妙且很好用的蛋白/蛋白，蛋白/DNA等分子互作檢測(cè)的技術(shù)。河南建庫(kù)酵母文庫(kù)
通過(guò)傳統(tǒng)的酵母雙雜交系統(tǒng)，以PtDAL1為誘餌，篩選樣本來(lái)源于不同年齡段的油松cDNA文庫(kù)。將獲得的陽(yáng)性克隆，10個(gè)一組，挑選到1個(gè)96孔板的PCR板孔中，獲得10*96個(gè)陽(yáng)性克隆的96孔板。以其中陽(yáng)性克隆mix為模板，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并將所有的PCR產(chǎn)物進(jìn)行純化。使用純化后的PCR產(chǎn)物，進(jìn)行打斷后構(gòu)建二代測(cè)序文庫(kù)，通過(guò)NGS測(cè)序，獲得6G的陽(yáng)性克隆數(shù)據(jù)。通過(guò)分析二代測(cè)序數(shù)據(jù)，獲得陽(yáng)性克隆基因信息（去冗余后獲得135個(gè)互作子，包含21個(gè)TFs，2個(gè)TRs及酶類(lèi)、熱激蛋白、RNA結(jié)合等蛋白，部分見(jiàn)表1）。挑選重要的候選基因進(jìn)行一對(duì)一驗(yàn)證（圖2）。與擬南芥中同源基因AGL6的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行比對(duì)分析。對(duì)DAL1互作蛋白（DIPs）的基因表達(dá)譜、啟動(dòng)子中的順勢(shì)作用元件功能進(jìn)行分析，并對(duì)DIPs進(jìn)行GO注釋?zhuān)▓D3）。綜合生信分析結(jié)果，構(gòu)建針葉樹(shù)老化途徑的調(diào)控模型（圖4）。河南建庫(kù)酵母文庫(kù)酵母文庫(kù)構(gòu)建的目的酵母的做法。
酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn)由歐易生物完成。6.902）在線發(fā)表了題為“MKK4-MPK3-WRKY17-mediated salicylic acid degradation increases susceptibility to Glomerella leaf spot in apple”的研究論文，報(bào)道了一個(gè)蘋(píng)果炭疽葉枯病易感相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子 MdWRKY17，并對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行了詳細(xì)探討。蘋(píng)果是世界上頗受歡迎的水果。蘋(píng)果炭疽葉枯病(Glomerellaleafspot,GLS)在我國(guó)多次爆發(fā)，是蘋(píng)果相當(dāng)有毀滅性的***病害之一，嚴(yán)重影響蘋(píng)果質(zhì)量和產(chǎn)量。但目前在蘋(píng)果中尚未鑒定出GLS的抗性基因。
酵母單雜交測(cè)試：為驗(yàn)證該文庫(kù)在Y2H和Y1H體系中的有效性，作者以O(shè)sMADS1為誘餌篩選水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫(kù)，進(jìn)行了酵母雙雜交測(cè)試。以Ghd7的啟動(dòng)子片段為誘餌，進(jìn)行了酵母單雜交測(cè)試。結(jié)果顯示我們的水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫(kù)可以有效且高通量的檢測(cè)蛋白-水稻TF、DNA-水稻TF間的相互作用。另外，該研究中指出，使用該文庫(kù)篩選鑒定蛋白-TF互作，采用mating法較為方便，即Y2HGold-Bait誘餌菌液與Y187-TF文庫(kù)菌液一對(duì)一雜交。而篩選鑒定DNA-TF互作，采用Y1HGold系統(tǒng)，即Y1HGold-pomoter篩選TF文庫(kù)質(zhì)粒更簡(jiǎn)單高效。此外，可通過(guò)降低篩選壓力處理，進(jìn)行弱相互作用的檢測(cè)。什么是酵母文庫(kù)的構(gòu)建? 只需構(gòu)建自己需要研究蛋白的BD載體，就能和本司**儲(chǔ)備的酵母文庫(kù)進(jìn)行篩庫(kù)實(shí)驗(yàn)。
酵母雙雜交表明擬南芥AtBT2蛋白可以與AtRGA互作。與對(duì)照相比，擬南芥bt1/2雙突變體幼苗高度降低，而硝酸鹽處理可以進(jìn)一步抑制其生長(zhǎng)，外源施加GA可以回復(fù)其生長(zhǎng)缺陷。在擬南芥中異源表達(dá)MdBT2可以明顯提高植株高度，而PAC處理則會(huì)抑制這種生長(zhǎng)的促進(jìn)作用。在擬南芥中異源表達(dá)MdRGL3a可以明顯抑制植株生長(zhǎng)，而硝酸鹽處理和MdBT2過(guò)表達(dá)則會(huì)緩解這種生長(zhǎng)抑制作用。外源GA處理可以逆轉(zhuǎn)以上對(duì)植株生長(zhǎng)的影響（圖A-D）。以上結(jié)果表明，BT蛋白通過(guò)DELLA蛋白調(diào)控植株生長(zhǎng)，這一機(jī)制在不同的植物中具有保守性。結(jié)合自主優(yōu)化的SMART和GATEWAY三框接頭,可滿(mǎn)足各種酵母雙雜交文庫(kù)構(gòu)建要求。甘肅品質(zhì)酵母文庫(kù)報(bào)價(jià)
酵母文庫(kù)篩庫(kù) 在酵母雙雜交系統(tǒng)中 。河南建庫(kù)酵母文庫(kù)
酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)表明，MdTRB1 可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1 與 MdMYB9 結(jié)合可以增強(qiáng)后者對(duì)下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性。而 MdTRB1 與 MdJAZ1 的結(jié)合，可以干擾其與 MdMYB9 的互作，進(jìn)而負(fù)向調(diào)控 MdTRB1 介導(dǎo)的對(duì)花青素和原花青素積累的促進(jìn)作用。本研究表明，JAZ1-TRB1-MYB9 復(fù)合物可以動(dòng)態(tài)調(diào)控 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素的積累。本研究為進(jìn)一步研究 JA 對(duì)花青素和原花青素生物合成的調(diào)節(jié)提供了新見(jiàn)解。本研究鑒定了一個(gè)可以與 MdMYB9 相互作用的蛋白 MdTRB1。實(shí)驗(yàn)表明，MdTRB1 可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。河南建庫(kù)酵母文庫(kù)
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