酵母文庫:近日,上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物育種栽培研究所儲黃偉副研究員、曹黎明研究員為共同通訊作者,在Plant,Cell&Environment雜志(IF:7.228)在線發(fā)表了題為“Aconservedclathrin-coatedvesiclecomponent,OsSCYL2,regulatesplantinnateimmunityinrice”的研究論文,報道了水稻中一個被網(wǎng)格蛋白包被囊泡的一個重要組分OsSCYL2調(diào)控稻水先天免疫的分子機(jī)制。上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物所碩士研究生姚瑤和周繼華助理研究員為該論文的共同***作者。文章中酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)由歐易生物完成。歐易生物技術(shù)有限公司酵母文庫 技術(shù)服務(wù)一站式服務(wù)。四川酵母文庫
歐易生物酵母文庫技術(shù)發(fā)表的又一篇高水平研究論文。植物***茉莉酸(JA)參與植物許多發(fā)育過程的調(diào)控。JAZ蛋白是茉莉酸信號反應(yīng)的阻遏物,通過抑制JA轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)劑來負(fù)向調(diào)節(jié)JA信號?;ㄇ嗨睾驮ㄇ嗨厥欠N子、葉、花和果實(shí)中重要的植物次生代謝產(chǎn)物,可充當(dāng)抗氧化劑,幫助***活性氧和對**老,對人類健康具有重要價值。已有研究表明,花青素和原花青素的生物合成基因的轉(zhuǎn)錄受MYB、basichelix-loop-helix(bHLH)及WD40蛋白的調(diào)控。其中,蘋果MYB轉(zhuǎn)錄因子MdMYB9參與調(diào)控JA介導(dǎo)的花青素和原花青素的生物合成,但其分子機(jī)制仍有待深入研究。北京歐易生物酵母文庫做什么酵母單雜交/雙雜交文庫構(gòu)建簡述酵母雙雜交。
水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫篩選服務(wù):近幾年,中國科學(xué)院分子植物科學(xué)***創(chuàng)新中心王二濤課題組在植物根瘤共生和菌根共生領(lǐng)域取得三項(xiàng)可以寫入教科書級的研究成果。尤其是近兩年,已經(jīng)連續(xù)發(fā)表了Cell、Nature、MP和PNAS等高水平文章。此外,王二濤研究員也是第二屆"科學(xué)探索獎"的獲得者,肯定他在植物-微生物共生營養(yǎng)交換和菌根共生信號受體發(fā)現(xiàn)方面的貢獻(xiàn)。2021年10月12日,分子植物***中心王二濤研究團(tuán)隊(duì)在Cell上發(fā)表題為“磷信號中樞網(wǎng)絡(luò)調(diào)控菌根共生)”的封面論文。***繪制了水稻-叢枝菌根共生的轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò),發(fā)現(xiàn)植物直接磷營養(yǎng)吸收途徑(根途徑)和共生磷營養(yǎng)吸收途徑(共生途徑)均是受到植物的磷信號網(wǎng)絡(luò)統(tǒng)一調(diào)控,回答了菌根共生領(lǐng)域"自我調(diào)節(jié)"這一困擾領(lǐng)域的重要科學(xué)問題。歐易生物CEO肖云平先生也參與了此項(xiàng)研究。文中水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫篩選服務(wù)由歐易生物提供。
酵母文庫篩選:為了系統(tǒng)地揭示調(diào)控叢枝菌根共生的轉(zhuǎn)錄因子,研究者以51個水稻基因的啟動子為誘餌,利用包含1570個水稻全長轉(zhuǎn)錄因子的文庫進(jìn)行了酵母單雜交篩選。這51個基因主要是已報道的參與或調(diào)節(jié)菌根共生的基因。文庫篩選發(fā)現(xiàn)了一個由266個轉(zhuǎn)錄因子和47個啟動子高度連接的網(wǎng)絡(luò),稱之為"叢枝菌根共生酵母單雜交網(wǎng)絡(luò)(YAM)"。平均每個啟動子可以和4個轉(zhuǎn)錄因子互作。266個轉(zhuǎn)錄因子分屬至少11個轉(zhuǎn)錄因子家族。72%(192個)的YAM轉(zhuǎn)錄因子在根中存在表達(dá)(FPKM>1)。與非定殖根相比,19個YAM轉(zhuǎn)錄因子在叢枝菌根***定殖的根中表達(dá)上調(diào)。傳統(tǒng)酵母雜交技術(shù)應(yīng)用已經(jīng)30多年,技術(shù)已經(jīng)成熟穩(wěn)定。
酵母單雜交測試:為驗(yàn)證該文庫在Y2H和Y1H體系中的有效性,作者以O(shè)sMADS1為誘餌篩選水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫,進(jìn)行了酵母雙雜交測試。以Ghd7的啟動子片段為誘餌,進(jìn)行了酵母單雜交測試。結(jié)果顯示我們的水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫可以有效且高通量的檢測蛋白-水稻TF、DNA-水稻TF間的相互作用。另外,該研究中指出,使用該文庫篩選鑒定蛋白-TF互作,采用mating法較為方便,即Y2HGold-Bait誘餌菌液與Y187-TF文庫菌液一對一雜交。而篩選鑒定DNA-TF互作,采用Y1HGold系統(tǒng),即Y1HGold-pomoter篩選TF文庫質(zhì)粒更簡單高效。此外,可通過降低篩選壓力處理,進(jìn)行弱相互作用的檢測。酵母文庫文庫構(gòu)建篩選歐易生物。廣東運(yùn)用酵母文庫做什么
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利用酵母雙雜交技術(shù)進(jìn)行篩選,結(jié)果顯示SP8可以與水稻OsMYC3蛋白相互作用,并且二者互作關(guān)系通過酵母一對一互作、BiFC、Co-IP、LCI實(shí)驗(yàn)得以驗(yàn)證(圖A-C)。利用截短的SP8進(jìn)行酵母一對一互作和Co-IP檢測表明,與OsMYC3的結(jié)合依賴于SP8的NTP結(jié)構(gòu)域(圖D-E);同樣,OsMYC3的TAD結(jié)構(gòu)域也是二者互作所必不可少的(圖F)。酵母雙雜交、BiFC實(shí)驗(yàn)表明,OsMYC3可以與OsJAZ相互作用。經(jīng)茉莉酸處理,野生對照株根的長度明顯被抑制、一系列JA生物合成和信號傳導(dǎo)相關(guān)基因表達(dá)量上升,但Osmyc3突變體中抑制程度減輕、JA相關(guān)基因表達(dá)量上升減少。四川酵母文庫
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