利用酵母文庫進(jìn)行雙雜交篩選,結(jié)果顯示 MdBT2 可以與 MdRGL3a 結(jié)合。MdRGL3a 編碼 GA 信號阻遏物 DELLA 蛋白,主要分布于細(xì)胞核中。MdRGL3a 對于 GA 處理非常敏感,可以引起其發(fā)生降解,PAC 處理可以提高其穩(wěn)定性。進(jìn)一步的酵母一對一雜交驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)表明,兩者的結(jié)合依賴于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 結(jié)構(gòu)域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif(圖 A-B)。并通過 GST pull-down、BiFC 實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了 MdBT2與 MdRGL3a 的結(jié)合(圖 C-D)。細(xì)胞外降解實(shí)驗(yàn)顯示,與對照相比,MdRGL3a 與過表達(dá) MdBT2 的愈傷組織的總蛋白共同孵育,會導(dǎo)致 MdRGL3a 的降解加快;而與抑制 MdBT2 表達(dá)的愈傷組織的總蛋白共同孵育,會導(dǎo)致 MdRGL3a 的降解減緩(圖 A)。并且蛋白酶體抑制劑 MG132 可以***抑制 MdRGL3a 的降解(圖 B)。改變 MdRGL3a 表達(dá)量并不影響 MdBT2 的降解。以上結(jié)果表明,MdRGL3a 可能通過 26S 蛋白酶體途徑發(fā)生降解,而 MdBT2 可以抑制 MdRGL3a 的降解。歐易生物一直助力于各酵母文庫實(shí)驗(yàn)室更好的使用該項(xiàng)技術(shù),探索生命科學(xué)奧秘。遼寧技術(shù)酵母文庫
本研究通過酵母雙雜交篩選,鑒定到 CRY1 可以與 SWR1 復(fù)合物關(guān)鍵亞基 SWC6、ARP6 結(jié)合,共同以藍(lán)光依賴模式調(diào)控 H2A.Z 在染色質(zhì)的沉積。藍(lán)光***的 CRY1 可以增強(qiáng) SWC6 與 ARP6 的相互作用。此外,HY5 也可以與 SWC6、ARP6 結(jié)合,將 SWR1 復(fù)合物募集到 HY5 靶向位置,調(diào)控 HY5 靶基因的表達(dá),進(jìn)而影響擬南芥下胚軸的伸長據(jù)此,本研究提出擬南芥光形態(tài)建成調(diào)控的分子機(jī)制:CRY1 通過增強(qiáng) SWR1 復(fù)合物活性和 HY5 介導(dǎo) SWR1 復(fù)合物向 HY5 靶基因的募集,共同促進(jìn) H2A.Z 染色質(zhì)沉積,以調(diào)控 HY5 靶基因的表達(dá)和藍(lán)光條件下光形態(tài)建成。云南實(shí)力酵母文庫根據(jù)每個(gè)客戶的研究目標(biāo)和內(nèi)容靈活定制研究方案。既能提供建庫服務(wù),也能提供篩庫服務(wù)。
通過酵母雙雜交進(jìn)行篩選,結(jié)果顯示 SWC6 可以在藍(lán)光下與 CRY1 相互作用(圖 A-C)。同樣,酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)顯示 CRY2 也可以在藍(lán)光下與 SWC6 相互作用(圖 D)。并通過 pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實(shí)驗(yàn)(圖 E-L)證實(shí) CRY1、CRY2 與 SWC6 的結(jié)合是藍(lán)光依賴性的。SWC6 是真核生物中已報(bào)道的 SWR1 復(fù)合物亞基,負(fù)責(zé)催化 H2A.Z 在染色質(zhì)上的替換。已報(bào)道 SWR1 復(fù)合物中 SWC6 可以與 ARP6 亞基結(jié)合。Pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實(shí)驗(yàn)(圖 A-H)顯示,CRY1、CRY2 可以藍(lán)光依賴性與 ARP6 結(jié)合。
酵母單雜交結(jié)果顯示,磷酸鹽饑餓響應(yīng)因子OsPHR1/2/3可以***51個(gè)目標(biāo)啟動子中的25個(gè),包括OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A等。OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A自身又可以調(diào)控許多菌根共生相關(guān)基因的表達(dá)(圖A)。對叢枝菌根共生響應(yīng)基因啟動子序列預(yù)測分析顯示,有78個(gè)轉(zhuǎn)錄因子被富集,87%的菌根共生響應(yīng)基因受到OsPHR1/2/3的調(diào)控,其中42%受到OsPHR1/2/3的直接調(diào)控。因此推測OsPHR1/2/3可能是菌根共生調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中的一個(gè)關(guān)鍵調(diào)控樞紐(圖A-B)。EMSA和熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)證實(shí),OsPHR12可以直接結(jié)合并***OsRAM1、OsWRI5A、OsPT11、OsAMT3啟動子序列(圖C-F),并且這種結(jié)合依賴于啟動子中的P1BS元件(圖G)。酵母單雜交技術(shù)是在酵母雙雜基礎(chǔ)上發(fā)展而來的一種研究核酸。
酵母文庫實(shí)驗(yàn)本研究鑒定了一個(gè)可以與MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。實(shí)驗(yàn)表明,MdTRB1可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1與MdMYB9結(jié)合可以增強(qiáng)后者對下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性。而MdTRB1與MdJAZ1的結(jié)合,可以干擾其與MdMYB9的互作,進(jìn)而負(fù)向調(diào)控MdTRB1介導(dǎo)的對花青素和原花青素積累的促進(jìn)作用。本研究表明,JAZ1-TRB1-MYB9復(fù)合物可以動態(tài)調(diào)控JA介導(dǎo)的花青素和原花青素的積累。本研究為進(jìn)一步研究JA對花青素和原花青素生物合成的調(diào)節(jié)提供了新見解。合作文章上百篇,平均影響因子高達(dá)7.124 歐易生物酵母文庫。河北酵母文庫規(guī)格
酵母文庫"酵母"和"文庫"有什么不同。遼寧技術(shù)酵母文庫
酵母文庫:細(xì)菌鞭毛蛋白是一種重要的細(xì)菌毒力因子,可刺激動植物細(xì)胞中的分子免疫信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。脊椎動物識別鞭毛蛋白和建立有效免疫反應(yīng)的詳細(xì)機(jī)制已經(jīng)被揭示;然而,無脊椎動物是否能夠識別鞭毛蛋白仍未可知。2022年1月24日,山東大學(xué)王顯偉團(tuán)隊(duì)在PLOSPATHOGENS(IF:6.823)上發(fā)表了題為“Shoc2regnizesbacterialflagellinandmediatesantibacterialErk/Statsignalinginaninvertebrate”的研究論文,揭示了MjShoc2可以與鞭毛蛋白FlaA互作,引發(fā)一系列炎癥反應(yīng),促使對蝦抵抗細(xì)菌***,為無脊椎動物對鞭毛蛋白的感知機(jī)制提供了見解。該項(xiàng)目中所用的對蝦酵母文庫由歐易生物構(gòu)建。遼寧技術(shù)酵母文庫
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