酵母雙雜交、GSTpull-down實驗顯示,SWC6可以直接與HY5、HYH相互作用(圖A-C)。pull-down實驗顯示ARP6同樣可以與HY5、HYH相互作用(圖D)。split-LUC、Co-IP實驗證實HY5可以與SWC6、ARP6結(jié)合(圖E-J)。下胚軸表型分析顯示,藍光下arp6hy5hyh三突變體下胚軸長度明顯大于arp6突變體、hy5hyh雙突變體,表明ARP6和HY5有可能通過不同途徑調(diào)控下胚軸的發(fā)育。Semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗顯示,藍光下,在 CRY1 存在下,SWC6 與 ARP6 的結(jié)合***增強。表明藍光***的 CRY1 可能通過藍光依賴的 CRY1-SWC6/ARP6 相互作用增強 SWC6 與 ARP6 的結(jié)合。博士期間長期從事酵母單/雙雜交文庫構(gòu)建及篩選的工作。吉林應用酵母文庫做什么
文庫篩選做的好,培養(yǎng)基和轉(zhuǎn)化試劑少不了。實驗做不出、克隆生長不正常的小伙伴,你是不是會懷疑培養(yǎng)基配的有問題,或者轉(zhuǎn)化試劑配的不對?歐易生物現(xiàn)隆重推出酵母雙雜、單雜篩選、一對一互作驗證的配套培養(yǎng)基、轉(zhuǎn)化試劑啦~該系列產(chǎn)品,經(jīng)歐易生物實驗室多年使用、不斷改良,質(zhì)量保證,物美價廉。所有培養(yǎng)基均無需調(diào)pH,使用方便。*需將1袋**包裝的培養(yǎng)基溶于500mlddH2O中,然后121℃高壓滅菌15min,固體培養(yǎng)基冷卻至50℃左右即可倒板使用,液體培養(yǎng)基冷卻至室溫后直接使用。從現(xiàn)在開始再也不用為重復配制試劑、重復做實驗、不停的花費時間驗證而頭禿了。遼寧品質(zhì)酵母文庫報價酵母雙雜實驗過程中如何選擇核體系或者膜體系? 。
酵母雙雜交技術(shù),自創(chuàng)建以來被廣泛應用于蛋白互作研究領(lǐng)域,在生命科學的基礎(chǔ)探秘研究中起著重要作用。然而該技術(shù)設(shè)計初衷,*是斯坦利先生為了完成申請學校經(jīng)費的目的。該技術(shù)設(shè)計巧妙,它的許多優(yōu)點在設(shè)計之初并未顯現(xiàn),反而在這么多年的高頻使用和進一步開發(fā)利用過程中越發(fā)明顯。(引用自MarcVidal&StanleyFields的“Theyeasttwo-hybridassay:stillfindingconnectionsafter25years”):(1)盡管酵母雜交技術(shù)揭示了蛋白質(zhì)結(jié)合位點的詳細信息,但操作簡單。只需2個質(zhì)粒+1個菌株即可完成,且有不同體系方便選擇。(2)該技術(shù)利用比較好的DNA結(jié)合位點,有效的***結(jié)構(gòu)域和友好的報告基因系統(tǒng),可以放大弱互作的信號。(3)該技術(shù)可用于各種物種的蛋白互作檢測,具有物種普適性,尤其是人類蛋白。(4)衍生技術(shù)具有更***的應用,可擴展到檢測蛋白質(zhì)與DNA、蛋白質(zhì)與RNA、蛋白質(zhì)與小分子以及其他組合之間的相互作用,甚至可實現(xiàn)將生理相互作用與表型數(shù)據(jù)直接關(guān)聯(lián)。當然,做過酵母雜交實驗的小伙伴應該都了解,互作結(jié)果的判斷,往往要等酵母生長好幾天才能看出來(當然,小歐認為這在偉大的科研事業(yè)過程中算不上啥),互作強弱也是主觀判斷性較強,存在假陽性。
酵母雙雜交實驗表明,PtMADS11 與 PtDAL1 之間存在直接的相互作用(圖 C),并通過 BiFC、GST pull-down 得以證實(圖 D-E)。為進一步研究在年齡信號調(diào)控中的作用機制,分別構(gòu)建了過表達PtDAL1和PtMADS11的擬南芥。與對照相比,過表達PtDAL1***提前了擬南芥的營養(yǎng)-生殖時相轉(zhuǎn)換(圖A),證實PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了關(guān)鍵作用。過表達PtMADS11植株在短日照下表現(xiàn)出早開花和花序結(jié)構(gòu)過早終止,表明PtMADS11在開花調(diào)節(jié)和花序內(nèi)分生組織命運起到調(diào)控作用。在擬南芥中利用年齡調(diào)控通路不同節(jié)點關(guān)鍵基因突變體進行功能互補實驗,結(jié)果顯示過表達PtDAL1可以恢復由于過表達miR156導致的開花延遲,但ft缺失會導致PtDAL1失活,PtDAL1過表達也不能恢復soc1-1-2突變體的表型,表明PtDAL1依賴或處于FT/SOC1的上游。而過表達PtMADS11可以恢復由過表達miR156或ft缺失導致的開花延遲,表明PtMADS11對開花的調(diào)控不依賴于miR156或FT。2酵母展示質(zhì)量技術(shù)酵母展示技術(shù),共收錄30多個行業(yè),涵蓋多行業(yè)資料一鍵下載。
根系是植物從土壤中吸收水分、養(yǎng)分和感知環(huán)境刺激的獨特***。根系結(jié)構(gòu)的優(yōu)化有助于提高植株的抗逆性和產(chǎn)量。ERF(ETHYLENERESPONSIVEFACTOR)是植物特有的轉(zhuǎn)錄因子家族之一,與植物的多種發(fā)育過程和抗逆性有關(guān)。ERFs在擬南芥和水稻根系發(fā)育中的作用已經(jīng)多有報道,但小麥ERFs在根系發(fā)育中的作用尚待研究。報道了小麥 TaSRL1 轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控根長的分子機制。文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物完成。從小麥基因組中克隆了 TaSRL1 基因,RT-PCR 顯示 TaSRL1 主要在小麥苗期的根中表達。對 TaSRL1 啟動子序列進行預測分析。酵母文庫產(chǎn)品線由7個實驗室組成,分別有RNA抽提室,RNA質(zhì)檢室、酵母建庫室、篩庫室等。河北酵母文庫報價
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酵母文庫實驗本研究鑒定了一個可以與MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。實驗表明,MdTRB1可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1與MdMYB9結(jié)合可以增強后者對下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性。而MdTRB1與MdJAZ1的結(jié)合,可以干擾其與MdMYB9的互作,進而負向調(diào)控MdTRB1介導的對花青素和原花青素積累的促進作用。本研究表明,JAZ1-TRB1-MYB9復合物可以動態(tài)調(diào)控JA介導的花青素和原花青素的積累。本研究為進一步研究JA對花青素和原花青素生物合成的調(diào)節(jié)提供了新見解。吉林應用酵母文庫做什么
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