進(jìn)行了酵母雙雜交文庫(kù)的篩選,結(jié)果顯示鈣依賴(lài)的種子特異性蛋白激酶SPK可以與OsNF-YB9相互作用,分段截取互作驗(yàn)證顯示OsNF-YB9的N端是互作所必須的(圖a-b),并通過(guò)雙熒光分子互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)、BiFC、體外GST-pulldown實(shí)驗(yàn)得以證實(shí)(圖c-e)。亞細(xì)胞定位顯示SPK主要在細(xì)胞質(zhì)中表達(dá),OsNF-YB9在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中都有表達(dá),共表達(dá)SPK和OsNF-YB9***促進(jìn)了OsNF-YB9的入核(圖f),表明SPK和OsNF-YB9的相互作用可能促進(jìn)了OsNF-YB9從細(xì)胞質(zhì)向細(xì)胞核的運(yùn)輸。RT-PCR顯示SPK在發(fā)育中的種子中高表達(dá),在5DAF開(kāi)始***,并在10-30DAF維持高表達(dá)水平(圖a-b)。spk敲除突變體種子中堊白率的增加(圖c-e),但粒形和粒重與野生型沒(méi)有***差別。酵母文庫(kù) 技術(shù)服務(wù)歐易生物分子互作一站式服務(wù)。貴州建庫(kù)酵母文庫(kù)
歐易酵母文庫(kù)助力小麥根長(zhǎng)抑制分子機(jī)制研究,近日,中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所景蕊蓮研究員、河南農(nóng)業(yè)大學(xué)王翔副教授為共同通訊作者,在 Journal of Experimental Botany 雜志(IF: 6.992)在線(xiàn)發(fā)表了題為“小麥短根長(zhǎng)度 1文章中酵母雙雜交文庫(kù)由歐易生物完成。本研究從小麥中克隆了一個(gè)新的 ERF 轉(zhuǎn)錄因子基因 TaSRL1 (SHORT ROOT LENGTH 1),該基因主要在根中表達(dá)。綜上,本研究證明了 TaSRL1 在生長(zhǎng)素依賴(lài)途徑中作為 taPIN2 的直接調(diào)控因子,并通過(guò)與 TaTIFY9 相互作用,整合生長(zhǎng)素和 JA 信號(hào),抑制根的生長(zhǎng)。TaSRL1-4A 標(biāo)記對(duì)小麥根系、株形和產(chǎn)量的改良具有重要意義。黑龍江酵母文庫(kù)領(lǐng)域歐易生物21天極速建庫(kù),一個(gè)文庫(kù)可以同時(shí)做單雜、雙雜、三雜,化藥小分子篩選。
歐易生物酵母文庫(kù)技術(shù)發(fā)表的又一篇高水平研究論文。植物***茉莉酸(JA)參與植物許多發(fā)育過(guò)程的調(diào)控。JAZ蛋白是茉莉酸信號(hào)反應(yīng)的阻遏物,通過(guò)抑制JA轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)劑來(lái)負(fù)向調(diào)節(jié)JA信號(hào)。花青素和原花青素是種子、葉、花和果實(shí)中重要的植物次生代謝產(chǎn)物,可充當(dāng)抗氧化劑,幫助***活性氧和對(duì)**老,對(duì)人類(lèi)健康具有重要價(jià)值。已有研究表明,花青素和原花青素的生物合成基因的轉(zhuǎn)錄受MYB、basichelix-loop-helix(bHLH)及WD40蛋白的調(diào)控。其中,蘋(píng)果MYB轉(zhuǎn)錄因子MdMYB9參與調(diào)控JA介導(dǎo)的花青素和原花青素的生物合成,但其分子機(jī)制仍有待深入研究。
通過(guò)傳統(tǒng)的酵母雙雜交系統(tǒng),以PtDAL1為誘餌,篩選樣本來(lái)源于不同年齡段的油松cDNA文庫(kù)。將獲得的陽(yáng)性克隆,10個(gè)一組,挑選到1個(gè)96孔板的PCR板孔中,獲得10*96個(gè)陽(yáng)性克隆的96孔板。以其中陽(yáng)性克隆mix為模板,進(jìn)行PCR擴(kuò)增,并將所有的PCR產(chǎn)物進(jìn)行純化。使用純化后的PCR產(chǎn)物,進(jìn)行打斷后構(gòu)建二代測(cè)序文庫(kù),通過(guò)NGS測(cè)序,獲得6G的陽(yáng)性克隆數(shù)據(jù)。通過(guò)分析二代測(cè)序數(shù)據(jù),獲得陽(yáng)性克隆基因信息(去冗余后獲得135個(gè)互作子,包含21個(gè)TFs,2個(gè)TRs及酶類(lèi)、熱激蛋白、RNA結(jié)合等蛋白,部分見(jiàn)表1)。挑選重要的候選基因進(jìn)行一對(duì)一驗(yàn)證(圖2)。與擬南芥中同源基因AGL6的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行比對(duì)分析。對(duì)DAL1互作蛋白(DIPs)的基因表達(dá)譜、啟動(dòng)子中的順勢(shì)作用元件功能進(jìn)行分析,并對(duì)DIPs進(jìn)行GO注釋?zhuān)▓D3)。綜合生信分析結(jié)果,構(gòu)建針葉樹(shù)老化途徑的調(diào)控模型(圖4)。酵母文庫(kù)篩選做文庫(kù)篩選前,首先需要檢測(cè)你的誘餌的自***活性和對(duì)酵母的毒性。
文庫(kù)篩選做的好,培養(yǎng)基和轉(zhuǎn)化試劑少不了。實(shí)驗(yàn)做不出、克隆生長(zhǎng)不正常的小伙伴,你是不是會(huì)懷疑培養(yǎng)基配的有問(wèn)題,或者轉(zhuǎn)化試劑配的不對(duì)?歐易生物現(xiàn)隆重推出酵母雙雜、單雜篩選、一對(duì)一互作驗(yàn)證的配套培養(yǎng)基、轉(zhuǎn)化試劑啦~該系列產(chǎn)品,經(jīng)歐易生物實(shí)驗(yàn)室多年使用、不斷改良,質(zhì)量保證,物美價(jià)廉。所有培養(yǎng)基均無(wú)需調(diào)pH,使用方便。*需將1袋**包裝的培養(yǎng)基溶于500mlddH2O中,然后121℃高壓滅菌15min,固體培養(yǎng)基冷卻至50℃左右即可倒板使用,液體培養(yǎng)基冷卻至室溫后直接使用。從現(xiàn)在開(kāi)始再也不用為重復(fù)配制試劑、重復(fù)做實(shí)驗(yàn)、不停的花費(fèi)時(shí)間驗(yàn)證而頭禿了。10年酵母雙雜交建庫(kù)篩庫(kù)經(jīng)驗(yàn)結(jié)合SMART和GATEWAY建庫(kù)技術(shù)優(yōu)勢(shì)。浙江酵母文庫(kù)
液態(tài)酵母單雙雜高通量篩庫(kù)方法及其應(yīng)用。貴州建庫(kù)酵母文庫(kù)
酵母單雜交測(cè)試:為驗(yàn)證該文庫(kù)在Y2H和Y1H體系中的有效性,作者以O(shè)sMADS1為誘餌篩選水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫(kù),進(jìn)行了酵母雙雜交測(cè)試。以Ghd7的啟動(dòng)子片段為誘餌,進(jìn)行了酵母單雜交測(cè)試。結(jié)果顯示我們的水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫(kù)可以有效且高通量的檢測(cè)蛋白-水稻TF、DNA-水稻TF間的相互作用。另外,該研究中指出,使用該文庫(kù)篩選鑒定蛋白-TF互作,采用mating法較為方便,即Y2HGold-Bait誘餌菌液與Y187-TF文庫(kù)菌液一對(duì)一雜交。而篩選鑒定DNA-TF互作,采用Y1HGold系統(tǒng),即Y1HGold-pomoter篩選TF文庫(kù)質(zhì)粒更簡(jiǎn)單高效。此外,可通過(guò)降低篩選壓力處理,進(jìn)行弱相互作用的檢測(cè)。貴州建庫(kù)酵母文庫(kù)
上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司發(fā)展規(guī)模團(tuán)隊(duì)不斷壯大,現(xiàn)有一支專(zhuān)業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì),各種專(zhuān)業(yè)設(shè)備齊全。專(zhuān)業(yè)的團(tuán)隊(duì)大多數(shù)員工都有多年工作經(jīng)驗(yàn),熟悉行業(yè)專(zhuān)業(yè)知識(shí)技能,致力于發(fā)展歐易生物的品牌。公司堅(jiān)持以客戶(hù)為中心、檢驗(yàn)檢測(cè)服務(wù)。(依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng),具體經(jīng)營(yíng)項(xiàng)目以相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)文件或許可證件為準(zhǔn))一般項(xiàng)目:生物醫(yī)藥產(chǎn)品、生化產(chǎn)品的研發(fā),醫(yī)藥中間體、化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)品化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、易制毒化學(xué)品)的研發(fā)、銷(xiāo)售,儀器儀表的銷(xiāo)售,并提供相關(guān)技術(shù)咨詢(xún)、技術(shù)服務(wù),會(huì)務(wù)服務(wù),企業(yè)管理咨詢(xún)。市場(chǎng)為導(dǎo)向,重信譽(yù),保質(zhì)量,想客戶(hù)之所想,急用戶(hù)之所急,全力以赴滿(mǎn)足客戶(hù)的一切需要。上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司主營(yíng)業(yè)務(wù)涵蓋科研服務(wù),科研檢測(cè),學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢(xún),堅(jiān)持“質(zhì)量保證、良好服務(wù)、顧客滿(mǎn)意”的質(zhì)量方針,贏得廣大客戶(hù)的支持和信賴(lài)。