利用酵母文庫進(jìn)行雙雜交篩選,結(jié)果顯示 MdBT2 可以與 MdRGL3a 結(jié)合。MdRGL3a 編碼 GA 信號阻遏物 DELLA 蛋白,主要分布于細(xì)胞核中。MdRGL3a 對于 GA 處理非常敏感,可以引起其發(fā)生降解,PAC 處理可以提高其穩(wěn)定性。進(jìn)一步的酵母一對一雜交驗證實驗表明,兩者的結(jié)合依賴于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 結(jié)構(gòu)域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif(圖 A-B)。并通過 GST pull-down、BiFC 實驗也證實了 MdBT2與 MdRGL3a 的結(jié)合(圖 C-D)。細(xì)胞外降解實驗顯示,與對照相比,MdRGL3a 與過表達(dá) MdBT2 的愈傷組織的總蛋白共同孵育,會導(dǎo)致 MdRGL3a 的降解加快;而與抑制 MdBT2 表達(dá)的愈傷組織的總蛋白共同孵育,會導(dǎo)致 MdRGL3a 的降解減緩(圖 A)。并且蛋白酶體抑制劑 MG132 可以***抑制 MdRGL3a 的降解(圖 B)。改變 MdRGL3a 表達(dá)量并不影響 MdBT2 的降解。以上結(jié)果表明,MdRGL3a 可能通過 26S 蛋白酶體途徑發(fā)生降解,而 MdBT2 可以抑制 MdRGL3a 的降解。為客戶提供專業(yè)的技術(shù)服務(wù)專業(yè)醫(yī)學(xué)課題標(biāo)書論文一站式酵母雙雜交。云南品質(zhì)酵母文庫報價
酵母文庫實驗由歐易生物協(xié)助完成。2021年3月,上海師范大學(xué)楊洪全教授為通訊作者,在ThePlantCell(IF:9.618)雜志發(fā)表了題為“ArabidopsisCryptochrome1ControlsPhotomorphogenesisthroughRegulationofH2A.ZDeposition”的研究論文,報道了擬南芥光形態(tài)建成調(diào)控的分子機制。上海師范大學(xué)茅志磊博士為***作者,文章中酵母文庫實驗由歐易生物協(xié)助完成。太陽光不僅為植物的光合作用提供能量來源,也是調(diào)節(jié)許多植物發(fā)育過程的關(guān)鍵環(huán)境信號。植物可以通過多種光受體監(jiān)測和響應(yīng)不同波長、方向和強度的光,其中**早發(fā)現(xiàn)的是藍(lán)光受體隱花素 CRYs。擬南芥中 CRYs 有 2 個,其中 CRY1 主要參與調(diào)控光形態(tài)建成,CRY2 主要參與光周期開花調(diào)控。上海酵母文庫報價10年酵母雙雜交建庫篩庫經(jīng)驗結(jié)合SMART和GATEWAY建庫技術(shù)優(yōu)勢。
酵母雙雜交(Y2H):植物轉(zhuǎn)錄因子(Plant transcripter factors, TFs)是調(diào)控植物生長發(fā)育和環(huán)境適應(yīng)性的關(guān)鍵分子。雖然在一些數(shù)據(jù)庫中,如RiceSRTFDB (Priya and Jain, 2013), Ricettissuetfdb (Chen et al.,PlnTFDB (Pérez-Rodríguez et al., 2009)和PlantTFDB (Jin et al., 2017),可以預(yù)測水稻轉(zhuǎn)錄因子功能。但通過具體實驗研究,來直接證實轉(zhuǎn)錄因子對植物的調(diào)控作用仍然是必不可少的。酵母雙雜交(Y2H)和酵母單雜交(Y1H)是被用于研究蛋白-蛋白以及蛋白-DNA互作的**常用技術(shù)。為了方便和促進(jìn)水稻育種研究,陳凡老師與歐易生物達(dá)成合作,整合雙方優(yōu)勢資源,歷經(jīng)春秋與冬夏,成功構(gòu)建了基于粳稻(日本晴)基因組的水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫。該項成果以“一種高效的篩選系統(tǒng)來鑒定大米轉(zhuǎn)錄因子的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)-DNA相互作用伙伴”為題,發(fā)表于雜志JGG上。
進(jìn)行了酵母雙雜交文庫的篩選,結(jié)果顯示鈣依賴的種子特異性蛋白激酶SPK可以與OsNF-YB9相互作用,分段截取互作驗證顯示OsNF-YB9的N端是互作所必須的(圖a-b),并通過雙熒光分子互補實驗、BiFC、體外GST-pulldown實驗得以證實(圖c-e)。亞細(xì)胞定位顯示SPK主要在細(xì)胞質(zhì)中表達(dá),OsNF-YB9在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中都有表達(dá),共表達(dá)SPK和OsNF-YB9***促進(jìn)了OsNF-YB9的入核(圖f),表明SPK和OsNF-YB9的相互作用可能促進(jìn)了OsNF-YB9從細(xì)胞質(zhì)向細(xì)胞核的運輸。RT-PCR顯示SPK在發(fā)育中的種子中高表達(dá),在5DAF開始***,并在10-30DAF維持高表達(dá)水平(圖a-b)。spk敲除突變體種子中堊白率的增加(圖c-e),但粒形和粒重與野生型沒有***差別。專業(yè)酵母文庫構(gòu)建和篩選公司多年經(jīng)驗。
酵母雙雜交文庫:為研究松樹生長時相轉(zhuǎn)變和生殖發(fā)育的奧秘,本研究收集了油松 7 個年齡段的葉片進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組測序。加權(quán)基因共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)分析(WGCNA)鑒定到一個與年齡***相關(guān)的基因模塊(圖 A)。按照表達(dá)模式,可以分為 2 個子模塊:隨年齡增長而表達(dá)上升的基因子模塊、隨年齡增長而表達(dá)降低的基因子模塊(圖 B-D)。這些基因在 5-7 年營養(yǎng)生長至生殖生長過渡期發(fā)生了一個明顯的表達(dá)模式轉(zhuǎn)變,表明在生殖發(fā)育啟動階段存在一個相對劇烈的時相轉(zhuǎn)變過程。一個專屬自己的酵母文庫才是正確的打開方式。四川篩庫酵母文庫報價
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文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物協(xié)助完成。近日,上海交通大學(xué)/復(fù)旦-交大-諾丁漢植物生物技術(shù)研發(fā)中心主任唐克軒課題組在New Phytologist(IF:8.512)發(fā)表了題為“AaWRKY9 contributes to light- and jasmonate-mediated to regulate the biosynthesis of artemisinin in Artemisia annua”的研究論文,揭示了青蒿轉(zhuǎn)錄因子AaWRKY9有助于光和茉莉酸信號所介導(dǎo)的青蒿素生物合成調(diào)控的新型分子機制,本研究通過藍(lán)/紅光誘導(dǎo)青蒿中青蒿素生物合成基因的表達(dá),使用轉(zhuǎn)錄組分析確定了一個WRKY轉(zhuǎn)錄因子AaWRKY9,可明顯***青蒿素生物合成相關(guān)基因的表達(dá)。云南品質(zhì)酵母文庫報價
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