酵母單雜交測試:為驗證該文庫在Y2H和Y1H體系中的有效性,作者以OsMADS1為誘餌篩選水稻轉錄因子文庫,進行了酵母雙雜交測試。以Ghd7的啟動子片段為誘餌,進行了酵母單雜交測試。結果顯示我們的水稻轉錄因子文庫可以有效且高通量的檢測蛋白-水稻TF、DNA-水稻TF間的相互作用。另外,該研究中指出,使用該文庫篩選鑒定蛋白-TF互作,采用mating法較為方便,即Y2HGold-Bait誘餌菌液與Y187-TF文庫菌液一對一雜交。而篩選鑒定DNA-TF互作,采用Y1HGold系統(tǒng),即Y1HGold-pomoter篩選TF文庫質粒更簡單高效。此外,可通過降低篩選壓力處理,進行弱相互作用的檢測。酵母三雜交酵母文庫數據庫。云南篩庫酵母文庫
文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物制備。2021年5月,北京林業(yè)大學鈕世輝副教授為通訊作者,在PlantPhysiology雜志(IF:6.902)在線發(fā)表了題為“MADS-boxtranscriptionfactorsMADS11andDAL1interacttomediatethevegetative-to-reproductivetransitioninpine”的研究論文,深入探討了油松中營養(yǎng)生長-生殖生長時相轉變調控的分子機制。北京林業(yè)大學馬晶晶博士為***作者,文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物制備。本研究通過 7 個樹齡的油松樣品轉錄組測序,鑒定到一個與年齡信號***相關的基因模塊,該模塊包含 33 個轉錄因子,包括 SOC1-like、DAL1 等。山東篩庫酵母文庫報價合作文章上百篇,平均影響因子高達7.124 歐易生物酵母文庫。
單雜交篩選為了挖掘影響ALA誘導蘋果黃酮醇積累的關鍵性調控因子,作者以Y1HGold[proMdFLS1-AbAi] 為誘餌,通過酵母單雜交篩選了ALA處理后的蘋果愈傷組織cDNA文庫。結果顯示篩選出的蛋白質主要參與光合作用調控、碳糖代謝、氧化/滲透脅迫響應、***信號轉導、木質素生物合成、果實成熟發(fā)育等過程,以及一些功能未知的蛋白質。其中, MdSCL8轉錄因子,由于其在草莓中的同源基因已被報導與黃酮的合成有關,引起了研究者的注意。進一步通過Y1H assay驗證確認了MdSCL8可以與MdFLS1啟動子互作(圖2A)。通過雙熒光素酶實驗和GUS檢測,發(fā)現MdSCL8可以負向調控MdFLS1啟動子活性(圖2B-D)。
酵母文庫實驗實驗表明,MdTRB1 可以正向調節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1 與 MdMYB9 結合可以增強后者對下游基因的轉錄***活性。而 MdTRB1 與 MdJAZ1 的結合,可以干擾其與 MdMYB9 的互作,進而負向調控 MdTRB1 介導的對花青素和原花青素積累的促進作用。本研究表明,JAZ1-TRB1-MYB9 復合物可以動態(tài)調控 JA 介導的花青素和原花青素的積累。本研究為進一步研究 JA 對花青素和原花青素生物合成的調節(jié)提供了新見解。本研究鑒定了一個可以與 MdMYB9 相互作用的蛋白 MdTRB1。實驗表明,MdTRB1 可以正向調節(jié)花青素和原花青素的累積。酵母文庫篩選研究多年建庫與篩選經驗驗證。
酵母文庫:首先我們需要了解什么是"酵母雙雜交技術"?酵母雙雜交是一種研究真核細胞體內蛋白質之間相互作用的有效分子生物學技術,在功能基因組學和蛋白質組學研究中發(fā)揮重要作用。酵母文庫產品線由7個**實驗室組成,分別有RNA抽提室,RNA質檢室、酵母建庫室、大腸桿菌轉化室,酵母菌轉化室、篩庫室等。使用原裝試劑盒、培養(yǎng)基,保證實驗質量。實驗流程細致謹慎,實驗團隊經驗豐富。實驗中使用RIN值7以上的RNA,一次建庫服務,多次質檢實驗,確保實驗數據高效準確。smart酵母建庫和gateway酵母建庫,滿足各類客戶的需求。黑龍江實力酵母文庫報價
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目前,歐易生物負責該水稻轉錄因子文庫的維護和保存工作,并對廣大水稻科研工作者提供轉錄因子篩選服務。如去年歐易生物助力中國科學院分子植物科學***創(chuàng)新中心的王二濤老師應用該文庫對水稻-叢枝菌根進行了深入研究,成功構建了水稻-叢枝菌轉錄調控網絡,結果發(fā)表于《Cell》封面。截至文章發(fā)表,該文庫已收錄了1683個水稻轉錄因子,隸屬于54個家族,覆蓋預測的水稻轉錄因子總量的70%。文庫中水稻轉錄因子的a基因信息來源于PlantTFDB和KOME數據庫。文庫載體使用pGADT7,酵母菌株使用Y187,每一個轉錄因子菌株**保存于96孔板中。云南篩庫酵母文庫
上海歐易生物醫(yī)學科技有限公司屬于醫(yī)藥健康的高新企業(yè),技術力量雄厚。歐易生物是一家私營合伙企業(yè)企業(yè),一直“以人為本,服務于社會”的經營理念;“誠守信譽,持續(xù)發(fā)展”的質量方針。公司擁有專業(yè)的技術團隊,具有科研服務,科研檢測,學術研究,技術咨詢等多項業(yè)務。歐易生物將以真誠的服務、創(chuàng)新的理念、***的產品,為彼此贏得全新的未來!