酵母雙雜交還可以這么用？Y2H-seq 揭示不老松年齡。***小歐又給大家?guī)?lái)了一篇酵母雙雜交結(jié)合高通量測(cè)序技術(shù)的應(yīng)用文章。北京林業(yè)大學(xué)鈕世輝老師團(tuán)隊(duì)，在傳統(tǒng)的酵母雙雜交技術(shù)流程基礎(chǔ)上，巧妙的結(jié)合了NGS技術(shù)，優(yōu)化建立了Y2H-seq技術(shù)，**縮短了常規(guī)的篩庫(kù)后測(cè)序驗(yàn)證周期，節(jié)約了實(shí)驗(yàn)成本。文章中應(yīng)用Y2H-seq技術(shù)，對(duì)不老松年齡密碼進(jìn)行了有趣的研究，其中所用酵母雙雜交文庫(kù)由歐易生物協(xié)助完成。眾所周知，酵母雙雜交技術(shù)是研究蛋白相互作用的利器。目前已知的蛋白質(zhì)相互作用至少有一半是通過酵母雙雜交技術(shù)發(fā)現(xiàn)的。但是做過酵母雜交實(shí)驗(yàn)的小伙伴也都知道蛋白篩選較容易，但是篩選后，想知道獲得的陽(yáng)性克隆都對(duì)應(yīng)的是啥基因，所花費(fèi)的人力物力相當(dāng)不小。有困難解決困難，勇敢牛牛不怕困難。百種酵母文庫(kù),讓您的科研不再困難!！吉林酵母文庫(kù)質(zhì)量

歐易生物酵母文庫(kù)技術(shù)發(fā)表的又一篇高水平研究論文。植物***茉莉酸(JA)參與植物許多發(fā)育過程的調(diào)控。JAZ蛋白是茉莉酸信號(hào)反應(yīng)的阻遏物，通過抑制JA轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)劑來(lái)負(fù)向調(diào)節(jié)JA信號(hào)?；ㄇ嗨睾驮ㄇ嗨厥欠N子、葉、花和果實(shí)中重要的植物次生代謝產(chǎn)物，可充當(dāng)抗氧化劑，幫助***活性氧和對(duì)**老，對(duì)人類健康具有重要價(jià)值。已有研究表明，花青素和原花青素的生物合成基因的轉(zhuǎn)錄受MYB、basichelix-loop-helix(bHLH)及WD40蛋白的調(diào)控。其中，蘋果MYB轉(zhuǎn)錄因子MdMYB9參與調(diào)控JA介導(dǎo)的花青素和原花青素的生物合成，但其分子機(jī)制仍有待深入研究。福建運(yùn)用酵母文庫(kù)做什么酵母三雜交酵母文庫(kù)數(shù)據(jù)庫(kù)。

通過酵母雙雜交文庫(kù)進(jìn)行了互作蛋白的篩選，結(jié)果顯示TaTIFY9可以與TaSRL1相互作用（下圖A），并通過Bi-FC、熒光互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)得以證實(shí)（圖B-C）。TaTIFY9屬于茉莉酸信號(hào)途徑關(guān)鍵因子JAZ家族的成員之一。RT-PCR顯示TaTIFY9也主要表達(dá)于小麥根部，外源施加茉莉酸可以***誘導(dǎo)TaTIFY9表達(dá)。這一結(jié)果表明，TaSRL1可能通過與TIFY9結(jié)合介導(dǎo)了茉莉酸對(duì)根生長(zhǎng)的抑制。已有研究表明 ERF 蛋白可以特異性結(jié)合到靶基因啟動(dòng)子序列中的 GCC-box 序列。TaSRL1 屬于 ERF 家族。在生長(zhǎng)素轉(zhuǎn)運(yùn)基因 TaPIN2 的啟動(dòng)子序列中含有一個(gè) GCC-box 序列。酵母單雜交實(shí)驗(yàn)顯示，TaSRL1 可以直接與 TaPIN2 啟動(dòng)子結(jié)合并***其表達(dá)（圖 A），但該***作用會(huì)被TaSRL1的互作蛋白TaTIFY9 所抑制（圖 B和C）。

進(jìn)行了酵母雙雜交篩選實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示 MdMPK3 可以與 MdWRKY17 相互作用（圖 C），并且通過 BiFC、Co-IP 得以證實(shí)（圖 D-E）。MdMPK3 的激酶活性水平在炭疽菌***后也***上升（圖 B）。進(jìn)一步的 BiFC 和 Co-IP 表明，MdMEK4 可以與 MdMPK3 相互作用（圖 F-G）。體外激酶試驗(yàn)表明，MdWRKY17 能夠被MdMEK4- MdMPK3 級(jí)聯(lián)磷酸化（圖 H）。綜上，MdMEK4-MdMPK3 級(jí)聯(lián)磷酸化 MdWRKY17。與對(duì)照相比，MdWRKY17過表達(dá)植株中水楊酸含量降低，而RNAiMdWRKY17植株中水楊酸含量升高（圖A）。歐易生物酵母文庫(kù)項(xiàng)目發(fā)表 Science 封面文章歐易生物。

酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)表明，PtMADS11 與 PtDAL1 之間存在直接的相互作用（圖 C），并通過 BiFC、GST pull-down 得以證實(shí)（圖 D-E）。為進(jìn)一步研究在年齡信號(hào)調(diào)控中的作用機(jī)制，分別構(gòu)建了過表達(dá)PtDAL1和PtMADS11的擬南芥。與對(duì)照相比，過表達(dá)PtDAL1***提前了擬南芥的營(yíng)養(yǎng)-生殖時(shí)相轉(zhuǎn)換（圖A），證實(shí)PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了關(guān)鍵作用。過表達(dá)PtMADS11植株在短日照下表現(xiàn)出早開花和花序結(jié)構(gòu)過早終止，表明PtMADS11在開花調(diào)節(jié)和花序內(nèi)分生組織命運(yùn)起到調(diào)控作用。在擬南芥中利用年齡調(diào)控通路不同節(jié)點(diǎn)關(guān)鍵基因突變體進(jìn)行功能互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示過表達(dá)PtDAL1可以恢復(fù)由于過表達(dá)miR156導(dǎo)致的開花延遲，但ft缺失會(huì)導(dǎo)致PtDAL1失活，PtDAL1過表達(dá)也不能恢復(fù)soc1-1-2突變體的表型，表明PtDAL1依賴或處于FT/SOC1的上游。而過表達(dá)PtMADS11可以恢復(fù)由過表達(dá)miR156或ft缺失導(dǎo)致的開花延遲，表明PtMADS11對(duì)開花的調(diào)控不依賴于miR156或FT。酵母文庫(kù)篩庫(kù) 在酵母雙雜交系統(tǒng)中 。湖北篩庫(kù)酵母文庫(kù)做什么

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母文庫(kù)實(shí)驗(yàn)由歐易生物完成。2021年3月16日，寧波大學(xué)陳劍平院士、孫宗濤研究員為共同通訊作者，在PNAS雜志（IF:9.412）在線發(fā)表了題為“AclassofindependentlyevolvedtranscriptionalrepressorsinplantRNAvirusesfacilitatesviralinfectionandvectorfeeding”的研究論文，深入報(bào)道了在不同植物RNA病毒中一種***存在的、通過劫持茉莉酸信號(hào)途徑以協(xié)同促進(jìn)病毒傳播和介體昆蟲攝食的新機(jī)制。植物病毒基因組通常*編碼少數(shù)幾個(gè)蛋白，它們必需依賴寄主植物才能完成自身的侵染和增殖。因此植物病毒往往通過其編碼的蛋白來(lái)劫持或者利用寄主因子來(lái)實(shí)現(xiàn)自身的復(fù)制，并在植物體內(nèi)傳播，產(chǎn)生系統(tǒng)性***。吉林酵母文庫(kù)質(zhì)量

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