酵母單雜交篩選技術(shù):關(guān)于HIV想必大家都不陌生,***HIV病毒后潛伏周期長,且目前沒有完全的***方法。為了徹底***HIV,不讓其發(fā)病就要從2方面入手:要么消除潛伏***的細胞,要么防止?jié)摲《镜募毎?**。也就是需要抑制HIV病毒的轉(zhuǎn)錄。但是關(guān)于HIV在人細胞中的復制、轉(zhuǎn)錄和潛伏期調(diào)控的分子網(wǎng)絡(luò)仍不完全確定,所以目前HIV仍不能被**。為了幫助解決這個問題,波士頓大學的研究者,使用酵母單雜交篩選技術(shù),以HIV-1,HIV-2的LTR(啟動子和增強子)為誘餌,篩選了人的轉(zhuǎn)錄因子文庫(包含1086個人的轉(zhuǎn)錄因子),**終繪制了調(diào)節(jié)HIV-1和HIV-2的轉(zhuǎn)錄網(wǎng)絡(luò)圖譜,結(jié)果發(fā)表在2021年的PNAS雜志上。液態(tài)酵母單雙雜高通量篩庫方法及其應(yīng)用。歐易生物酵母文庫是什么
酵母文庫實驗本研究鑒定了一個可以與MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。實驗表明,MdTRB1可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1與MdMYB9結(jié)合可以增強后者對下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性。而MdTRB1與MdJAZ1的結(jié)合,可以干擾其與MdMYB9的互作,進而負向調(diào)控MdTRB1介導的對花青素和原花青素積累的促進作用。本研究表明,JAZ1-TRB1-MYB9復合物可以動態(tài)調(diào)控JA介導的花青素和原花青素的積累。本研究為進一步研究JA對花青素和原花青素生物合成的調(diào)節(jié)提供了新見解。遼寧運用酵母文庫報價酵母文庫篩選方案可提供核體系和膜體系篩庫工作。
通過酵母雙雜交文庫進行了互作蛋白的篩選,結(jié)果顯示TaTIFY9可以與TaSRL1相互作用(下圖A),并通過Bi-FC、熒光互補實驗得以證實(圖B-C)。TaTIFY9屬于茉莉酸信號途徑關(guān)鍵因子JAZ家族的成員之一。RT-PCR顯示TaTIFY9也主要表達于小麥根部,外源施加茉莉酸可以***誘導TaTIFY9表達。這一結(jié)果表明,TaSRL1可能通過與TIFY9結(jié)合介導了茉莉酸對根生長的抑制。已有研究表明 ERF 蛋白可以特異性結(jié)合到靶基因啟動子序列中的 GCC-box 序列。TaSRL1 屬于 ERF 家族。在生長素轉(zhuǎn)運基因 TaPIN2 的啟動子序列中含有一個 GCC-box 序列。酵母單雜交實驗顯示,TaSRL1 可以直接與 TaPIN2 啟動子結(jié)合并***其表達(圖 A),但該***作用會被TaSRL1的互作蛋白TaTIFY9 所抑制(圖 B和C)。
酵母文庫實驗:本研究發(fā)現(xiàn)了一個硝酸鹽響應(yīng)的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2,它參與調(diào)節(jié)硝酸鹽介導的蘋果植株生長。利用酵母雙雜交、蛋白質(zhì) pull-down、BiFC 實驗證實,MdBT2 可以與一個 DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作,這種互作是 MdRGL3a 蛋白經(jīng)由 26S 蛋白酶體途徑的泛素化及降解所必需的。此外,異源表達 MdBT2 部分回復了 MdRGL3a 過表達所導致的擬南芥生長抑制。綜上表明,MdBT2 可以通過降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的豐度促進硝酸鹽介導的植物生長。實驗室培養(yǎng)顯示,培養(yǎng) 45 天,蘋果幼苗的高度和生物量隨硝酸鹽濃度的增加而增加(圖 A-C)。為在校期間為實驗室構(gòu)建3個高效的水稻酵母雙雜交文庫。
歐易生物酵母平臺,從公司成立伊始,伴隨著公司和客戶一路成長,櫛風沐雨十多年。不僅積累了沉甸甸的項目經(jīng)驗,獲得了眾多客戶認可,協(xié)助客戶發(fā)表Cell、Science 等前列期刊雜志。更值得驕傲的是,我們幫助了國內(nèi)眾多實驗室,從無到有建立起了酵母雜交體系,對基礎(chǔ)科研貢獻了自己的一份力量。**值得欣喜的是,不斷有人從我們的酵母產(chǎn)品用戶成為了歐易大家庭的一員,流年笑擲,未來可期,我們一起攜手繼續(xù)做更走心的科研服務(wù)。歐易生物酵母平臺,從公司成立伊始,伴隨著公司和客戶一路成長,櫛風沐雨十多年。不僅積累了沉甸甸的項目經(jīng)驗,獲得了眾多客戶認可,協(xié)助客戶發(fā)表Cell、Science 等前列期刊雜志。更值得驕傲的是,我們幫助了國內(nèi)眾多實驗室,從無到有建立起了酵母雜交體系,對基礎(chǔ)科研貢獻了自己的一份力量。**值得欣喜的是,不斷有人從我們的酵母產(chǎn)品用戶成為了歐易大家庭的一員,流年笑擲,未來可期,我們一起攜手繼續(xù)做更走心的科研服務(wù)。歐易生物酵母文庫項目發(fā)表 Science 封面文章歐易生物。重慶歐易生物酵母文庫
Gateway方法酵母雙雜交文庫構(gòu)建核系統(tǒng)與膜系。歐易生物酵母文庫是什么
酵母雙雜交、pulldown和BiFC實驗均顯示,MdTRB1可以通過其C末端與JAZ1蛋白互作。在蘋果葉片和愈傷組織中過表達MdJAZ1,花青素和原花青素的累積受到明顯抑制。在蘋果葉片和愈傷組織***表達MdJAZ1/MdJAZ1,結(jié)果顯示過表達MdJAZ1抑制了MdTRB1對花青素和原花青素累積的促進作用。Pull down 實驗和熒光素酶互補成像實驗結(jié)果表明,在 MdJAZ1 存在下,MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合減弱(圖 a-c);外源施加 JA 可以部分恢復 MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合。對于 MdTRB1 在 JA 介導的花青素和原花青素積累中的作用機制,本研究建立了一個新的模型:MdTRB1 通過與 MdMYB9 互作,增強了 MdMYB9 對下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性,進而正向調(diào)節(jié)了 JA 介導的花青素和原花青素累積。在 JA 缺乏的條件下,MdJAZ1 與 MdTRB1 互作,干擾了 MdTRB1 與 MdMYB9 之間的結(jié)合;在 JA 存在的條件下,MdJAZ1 被降解,MdTRB1 被釋放出來以參與后續(xù)過程。歐易生物酵母文庫是什么
上海歐易生物醫(yī)學科技有限公司是以提供科研服務(wù),科研檢測,學術(shù)研究,技術(shù)咨詢內(nèi)的多項綜合服務(wù),為消費者多方位提供科研服務(wù),科研檢測,學術(shù)研究,技術(shù)咨詢,公司位于聯(lián)航路1188號25幢,成立于2009-03-10,迄今已經(jīng)成長為醫(yī)藥健康行業(yè)內(nèi)同類型企業(yè)的佼佼者。公司主要提供檢驗檢測服務(wù)。(依法須經(jīng)批準的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準后方可開展經(jīng)營活動,具體經(jīng)營項目以相關(guān)部門批準文件或許可證件為準)一般項目:生物醫(yī)藥產(chǎn)品、生化產(chǎn)品的研發(fā),醫(yī)藥中間體、化工原料及產(chǎn)品(除危險品化學品、監(jiān)控化學品、易制毒化學品)的研發(fā)、銷售,儀器儀表的銷售,并提供相關(guān)技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù),會務(wù)服務(wù),企業(yè)管理咨詢。等領(lǐng)域內(nèi)的業(yè)務(wù),產(chǎn)品滿意,服務(wù)可高,能夠滿足多方位人群或公司的需要。產(chǎn)品已銷往多個國家和地區(qū),被國內(nèi)外眾多企業(yè)和客戶所認可。