酵母文庫實(shí)驗(yàn):本研究報(bào)道了 OsNF-YB9 和 OsNF-YB7 在水稻中呈現(xiàn)亞功能化。OsNF-YB7 主要在胚中表達(dá),而 OsNF-YB9 主要在發(fā)育中的胚乳中表達(dá)。在擬南芥 lec1-1 中異源表達(dá) OsNF-YB9 或 OsNF-YB7 可以彌補(bǔ) lec1-1 缺陷。OsNF-YB9 功能缺失導(dǎo)致種子發(fā)育異常,種子變長、變窄、變薄,堊白率較高。此外,osnf-yb9 中淀粉合成相關(guān)基因的表達(dá)紊亂。OsNF-YB9 可以與主要在水稻胚乳中表達(dá)的蔗糖合酶蛋白激酶 SPK 相互作用。spk 敲除突變體種子與 osnf-yb9 突變體種子都表現(xiàn)出堊白增加的表型。OsNF-YB9 在水稻和擬南芥中的異位表達(dá)導(dǎo)致了種子變小。綜上表明,OsNF-YB9 在水稻種子發(fā)育中起到關(guān)鍵調(diào)控作用。歐易生物持續(xù)為眾多植物學(xué)方向的研究學(xué)者提供持久可靠的科研助力。山東歐易生物酵母文庫做什么
酵母雙雜交、pulldown和BiFC實(shí)驗(yàn)均顯示,MdTRB1可以通過其C末端與JAZ1蛋白互作。在蘋果葉片和愈傷組織中過表達(dá)MdJAZ1,花青素和原花青素的累積受到明顯抑制。在蘋果葉片和愈傷組織***表達(dá)MdJAZ1/MdJAZ1,結(jié)果顯示過表達(dá)MdJAZ1抑制了MdTRB1對(duì)花青素和原花青素累積的促進(jìn)作用。Pull down 實(shí)驗(yàn)和熒光素酶互補(bǔ)成像實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在 MdJAZ1 存在下,MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合減弱(圖 a-c);外源施加 JA 可以部分恢復(fù) MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合。對(duì)于 MdTRB1 在 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素積累中的作用機(jī)制,本研究建立了一個(gè)新的模型:MdTRB1 通過與 MdMYB9 互作,增強(qiáng)了 MdMYB9 對(duì)下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性,進(jìn)而正向調(diào)節(jié)了 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素累積。在 JA 缺乏的條件下,MdJAZ1 與 MdTRB1 互作,干擾了 MdTRB1 與 MdMYB9 之間的結(jié)合;在 JA 存在的條件下,MdJAZ1 被降解,MdTRB1 被釋放出來以參與后續(xù)過程。山東歐易生物酵母文庫做什么酵母文庫構(gòu)建方法酵母篩庫構(gòu)建酵母文庫的意義。
酵母雙雜交文庫:瘧疾是人類**古老的疾病之一,每年4月25日是世界防治瘧疾日,瘧疾目前仍是公眾健康所面臨的**嚴(yán)重威脅之一。基于青蒿素的聯(lián)合處理法(ACTs)是WHO推薦的比較好處理方案。因發(fā)現(xiàn)具有抗瘧作用的青蒿素,挽救了數(shù)百萬人的生命,屠呦呦教授獲得了2015年諾貝爾生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng),從青蒿中分離出的青蒿素被推薦作為抗瘧疾的優(yōu)先藥物。之前研究表明,茉莉酸(JA)介導(dǎo)促成的青蒿素積累依賴于光,轉(zhuǎn)錄因子HY5也通過參與光信號(hào)調(diào)控促進(jìn)青蒿素合成。然而,光與JA相互作用機(jī)制及其對(duì)青蒿素生物合成調(diào)控的潛在機(jī)理仍未得到解決。
單雜交篩選為了挖掘影響ALA誘導(dǎo)蘋果黃酮醇積累的關(guān)鍵性調(diào)控因子,作者以Y1HGold[proMdFLS1-AbAi] 為誘餌,通過酵母單雜交篩選了ALA處理后的蘋果愈傷組織cDNA文庫。結(jié)果顯示篩選出的蛋白質(zhì)主要參與光合作用調(diào)控、碳糖代謝、氧化/滲透脅迫響應(yīng)、***信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、木質(zhì)素生物合成、果實(shí)成熟發(fā)育等過程,以及一些功能未知的蛋白質(zhì)。其中, MdSCL8轉(zhuǎn)錄因子,由于其在草莓中的同源基因已被報(bào)導(dǎo)與黃酮的合成有關(guān),引起了研究者的注意。進(jìn)一步通過Y1H assay驗(yàn)證確認(rèn)了MdSCL8可以與MdFLS1啟動(dòng)子互作(圖2A)。通過雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)和GUS檢測,發(fā)現(xiàn)MdSCL8可以負(fù)向調(diào)控MdFLS1啟動(dòng)子活性(圖2B-D)。酵母結(jié)構(gòu)及功能介紹酵母的應(yīng)用。
酵母文庫實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)表明,MdTRB1 可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1 與 MdMYB9 結(jié)合可以增強(qiáng)后者對(duì)下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性。而 MdTRB1 與 MdJAZ1 的結(jié)合,可以干擾其與 MdMYB9 的互作,進(jìn)而負(fù)向調(diào)控 MdTRB1 介導(dǎo)的對(duì)花青素和原花青素積累的促進(jìn)作用。本研究表明,JAZ1-TRB1-MYB9 復(fù)合物可以動(dòng)態(tài)調(diào)控 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素的積累。本研究為進(jìn)一步研究 JA 對(duì)花青素和原花青素生物合成的調(diào)節(jié)提供了新見解。本研究鑒定了一個(gè)可以與 MdMYB9 相互作用的蛋白 MdTRB1。實(shí)驗(yàn)表明,MdTRB1 可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。酵母單雜交技術(shù)是在酵母雙雜基礎(chǔ)上發(fā)展而來的一種研究核酸。山東宣傳酵母文庫做什么
專業(yè)化的篩庫流程,多重質(zhì)檢保證質(zhì)量。初篩+復(fù)篩提高目標(biāo)陽性克隆質(zhì)粒精確度。山東歐易生物酵母文庫做什么
母文庫實(shí)驗(yàn)由歐易生物完成。2021年3月16日,寧波大學(xué)陳劍平院士、孫宗濤研究員為共同通訊作者,在PNAS雜志(IF:9.412)在線發(fā)表了題為“AclassofindependentlyevolvedtranscriptionalrepressorsinplantRNAvirusesfacilitatesviralinfectionandvectorfeeding”的研究論文,深入報(bào)道了在不同植物RNA病毒中一種***存在的、通過劫持茉莉酸信號(hào)途徑以協(xié)同促進(jìn)病毒傳播和介體昆蟲攝食的新機(jī)制。植物病毒基因組通常*編碼少數(shù)幾個(gè)蛋白,它們必需依賴寄主植物才能完成自身的侵染和增殖。因此植物病毒往往通過其編碼的蛋白來劫持或者利用寄主因子來實(shí)現(xiàn)自身的復(fù)制,并在植物體內(nèi)傳播,產(chǎn)生系統(tǒng)性***。山東歐易生物酵母文庫做什么
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