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來源: 發(fā)布時間:2023-03-22

酵母文庫實驗由歐易生物完成。2021 年 3 月,山東農(nóng)業(yè)大學郝玉金教授為通訊作者,在 Plant Physiology 雜志(IF: 6.902)在線發(fā)表了題為“Interaction of BTB-TAZ protein MdBT2 and DELLA protein MdRGL3a regulates nitrate-mediated plant growth”的研究論文,深入探討了硝酸鹽介導的蘋果生長調(diào)控分子機制。氮素是植物生長發(fā)育所必須的營養(yǎng)物質(zhì)之一,硝酸鹽是植物根系吸收無機氮的主要形式。除了營養(yǎng)功能,硝酸鹽還可以通過多種信號途徑來調(diào)節(jié)植物生長和發(fā)育過程。赤霉素(gibberellin,GA)是一種植物***,同樣可以調(diào)控植物生長發(fā)育過程。然而,硝酸鹽和赤霉素信號通路如何共同調(diào)節(jié)植物生長的確切分子機制仍知之甚少。酵母單雜交實驗步驟酵母文庫構建原理。山西實力酵母文庫做什么

酵母單雜交結果顯示,磷酸鹽饑餓響應因子OsPHR1/2/3可以***51個目標啟動子中的25個,包括OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A等。OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A自身又可以調(diào)控許多菌根共生相關基因的表達(圖A)。對叢枝菌根共生響應基因啟動子序列預測分析顯示,有78個轉錄因子被富集,87%的菌根共生響應基因受到OsPHR1/2/3的調(diào)控,其中42%受到OsPHR1/2/3的直接調(diào)控。因此推測OsPHR1/2/3可能是菌根共生調(diào)控網(wǎng)絡中的一個關鍵調(diào)控樞紐(圖A-B)。EMSA和熒光素酶報告實驗證實,OsPHR12可以直接結合并***OsRAM1、OsWRI5A、OsPT11、OsAMT3啟動子序列(圖C-F),并且這種結合依賴于啟動子中的P1BS元件(圖G)。云南品質(zhì)酵母文庫報價酵母文庫篩庫歐易生物。

酵母雙雜交(Y2H):植物轉錄因子(Plant transcripter factors, TFs)是調(diào)控植物生長發(fā)育和環(huán)境適應性的關鍵分子。雖然在一些數(shù)據(jù)庫中,如RiceSRTFDB (Priya and Jain, 2013), Ricettissuetfdb (Chen et al.,PlnTFDB (Pérez-Rodríguez et al., 2009)和PlantTFDB (Jin et al., 2017),可以預測水稻轉錄因子功能。但通過具體實驗研究,來直接證實轉錄因子對植物的調(diào)控作用仍然是必不可少的。酵母雙雜交(Y2H)和酵母單雜交(Y1H)是被用于研究蛋白-蛋白以及蛋白-DNA互作的**常用技術。為了方便和促進水稻育種研究,陳凡老師與歐易生物達成合作,整合雙方優(yōu)勢資源,歷經(jīng)春秋與冬夏,成功構建了基于粳稻(日本晴)基因組的水稻轉錄因子文庫。該項成果以“一種高效的篩選系統(tǒng)來鑒定大米轉錄因子的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)-DNA相互作用伙伴”為題,發(fā)表于雜志JGG上。

酵母雙雜交、GSTpull-down實驗顯示,SWC6可以直接與HY5、HYH相互作用(圖A-C)。pull-down實驗顯示ARP6同樣可以與HY5、HYH相互作用(圖D)。split-LUC、Co-IP實驗證實HY5可以與SWC6、ARP6結合(圖E-J)。下胚軸表型分析顯示,藍光下arp6hy5hyh三突變體下胚軸長度明顯大于arp6突變體、hy5hyh雙突變體,表明ARP6和HY5有可能通過不同途徑調(diào)控下胚軸的發(fā)育。Semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗顯示,藍光下,在 CRY1 存在下,SWC6 與 ARP6 的結合***增強。表明藍光***的 CRY1 可能通過藍光依賴的 CRY1-SWC6/ARP6 相互作用增強 SWC6 與 ARP6 的結合。歐易生物酵母平臺,從公司成立伊始,伴隨著公司和客戶一路成長,櫛風沐雨十多年。

酵母雙雜交篩選實驗:為進一步了解LEA3蛋白在干旱脅迫下調(diào)控植物生長和增強抗旱性的分子機制,本研究以干旱脅迫條件下的棉花根莖葉為材料,構建了棉花干旱脅迫酵母文庫。并以GhLEA3為誘餌,采用酵母雙雜交篩選實驗,從棉花酵母文庫中篩選獲得了GhLEA3互作蛋白,并對互作蛋白進行了GO和KEGG分析,發(fā)現(xiàn)其中的互作蛋白GhVDAC1主要參與鈣信號通路和cGMP-PKG信號通路,互作蛋白Gh***A參與多種生物途徑,如糖原生成和代謝途徑。此外,GhVDAC1和Gh***A受干旱脅迫誘導表達***,且在GhLEA3敲除的棉株中表達量低于野生型棉株歐易生物酵母文庫項目發(fā)表 Science 封面文章歐易生物。海南技術酵母文庫做什么

為在校期間為實驗室構建3個高效的水稻酵母雙雜交文庫。山西實力酵母文庫做什么

酵母雙雜交文庫:本研究通過7個樹齡的油松樣品轉錄組測序,鑒定到一個與年齡信號***相關的基因模塊,該模塊包含33個轉錄因子,包括SOC1-like、DAL1等。油松和晚坐果白皮松突變體中的基因表達模式分析顯示,PtMADS11與生殖能力之間存在緊密相關性。酵母雙雜交顯示,MADS11和DAL1直接相關作用以參與對年齡信號的調(diào)控。過表達PtMADS11、PDAL1可以部分挽救擬南芥中miR156過表達或spl突變導致的開花延遲缺陷。只有PtMADS11可以挽救ft突變體中的開花缺陷,表明它與PtDAL1在擬南芥開花調(diào)控網(wǎng)絡中發(fā)揮了不同的作用。山西實力酵母文庫做什么

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