酵母文庫實驗：本研究發(fā)現(xiàn)了一個硝酸鹽響應的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2，它參與調(diào)節(jié)硝酸鹽介導的蘋果植株生長。利用酵母雙雜交、蛋白質(zhì) pull-down、BiFC 實驗證實，MdBT2 可以與一個 DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作，這種互作是 MdRGL3a 蛋白經(jīng)由 26S 蛋白酶體途徑的泛素化及降解所必需的。此外，異源表達 MdBT2 部分回復了 MdRGL3a 過表達所導致的擬南芥生長抑制。綜上表明，MdBT2 可以通過降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的豐度促進硝酸鹽介導的植物生長。實驗室培養(yǎng)顯示，培養(yǎng) 45 天，蘋果幼苗的高度和生物量隨硝酸鹽濃度的增加而增加（圖 A-C）。酵母單雜篩庫酵母文庫篩選酵母雙雜交篩庫步驟。河南什么是酵母文庫做什么

酵母文庫研究：棉花是世界上天然纖維的主要來源。近年來，氣候變化給植物帶來的干旱、高鹽等滲透脅迫，使棉花產(chǎn)量穩(wěn)步下降。為適應變化莫測的氣候，植物不斷進化出復雜而有組織的應對非生物脅迫的反應機制，其中數(shù)千個抗性相關基因間的相互作用，在提高植物的抗旱性和耐鹽性中發(fā)揮著重要作用。功能基因組學研究表明，植物胚胎發(fā)育晚期豐富蛋白（LEA）就是這樣一種基因，它在植物發(fā)育過程中，面對多種環(huán)境脅迫時均有表達，對提高植物的抗旱性和耐鹽性具有重要作用。2022年3月，中國農(nóng)業(yè)科學院棉花研究所在國際期刊上發(fā)表了BiologicalMacromolecules上發(fā)表了題為“LateembryogenesisabundantgeneLEA3（Gh_A08G0694）enhancesdroughtandsaltstresstoleranceincotton”的研究論文，該研究發(fā)現(xiàn)LEA3能夠增強棉花的抗旱性和耐鹽性。該項目中所用的棉花酵母文庫由歐易生物構建。青海建庫酵母文庫報價酵母文庫產(chǎn)品線由7個實驗室組成，分別有RNA抽提室，RNA質(zhì)檢室、酵母建庫室、篩庫室等。

酵母雙雜交、GSTpull-down實驗顯示，SWC6可以直接與HY5、HYH相互作用（圖A-C）。pull-down實驗顯示ARP6同樣可以與HY5、HYH相互作用（圖D）。split-LUC、Co-IP實驗證實HY5可以與SWC6、ARP6結合（圖E-J）。下胚軸表型分析顯示，藍光下arp6hy5hyh三突變體下胚軸長度明顯大于arp6突變體、hy5hyh雙突變體，表明ARP6和HY5有可能通過不同途徑調(diào)控下胚軸的發(fā)育。Semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗顯示，藍光下，在 CRY1 存在下，SWC6 與 ARP6 的結合***增強。表明藍光***的 CRY1 可能通過藍光依賴的 CRY1-SWC6/ARP6 相互作用增強 SWC6 與 ARP6 的結合。

小歐從2018年即開始關注酵母雜交與高通量測序相結合的技術發(fā)展，如2017年CaoGang老師等發(fā)表的RLL-Y2H技術，實現(xiàn)了文庫篩文庫可能，該技術通過對酵母雙雜常用載體的改造，并結合高通量測序，可直接獲得AD-BD互作蛋白對。所用方法相當巧妙，感興趣的同學請點擊《當酵母雙雜交遇到高通量測序》。鈕老師團隊之前的研究已經(jīng)鑒定了DAL1作為一種保守的針葉樹年齡生物標記基因，在油松從營養(yǎng)生長到生殖生長的時相轉(zhuǎn)變過程中起重要作用。為了進一步理解年齡效應如何驅(qū)動針葉樹的發(fā)育，闡明與DAL1相關的蛋白互作網(wǎng)絡很關鍵。鈕老師團隊利用傳統(tǒng)的Y2H篩選技術結合NGS測序技術，優(yōu)化得到了Y2H-seq技術，與傳統(tǒng)的篩選測序相比，大幅度節(jié)省了時間和實驗成本。文庫質(zhì)粒與酵母文庫載體重組。

單雜交篩選為了挖掘影響ALA誘導蘋果黃酮醇積累的關鍵性調(diào)控因子，作者以Y1HGold[proMdFLS1-AbAi] 為誘餌，通過酵母單雜交篩選了ALA處理后的蘋果愈傷組織cDNA文庫。結果顯示篩選出的蛋白質(zhì)主要參與光合作用調(diào)控、碳糖代謝、氧化/滲透脅迫響應、***信號轉(zhuǎn)導、木質(zhì)素生物合成、果實成熟發(fā)育等過程，以及一些功能未知的蛋白質(zhì)。其中， MdSCL8轉(zhuǎn)錄因子，由于其在草莓中的同源基因已被報導與黃酮的合成有關，引起了研究者的注意。進一步通過Y1H assay驗證確認了MdSCL8可以與MdFLS1啟動子互作（圖2A）。通過雙熒光素酶實驗和GUS檢測，發(fā)現(xiàn)MdSCL8可以負向調(diào)控MdFLS1啟動子活性（圖2B-D）。結合自主優(yōu)化的SMART和GATEWAY三框接頭,可滿足各種酵母雙雜交文庫構建要求。湖北應用酵母文庫

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文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物制備。2021年5月，北京林業(yè)大學鈕世輝副教授為通訊作者，在PlantPhysiology雜志（IF:6.902）在線發(fā)表了題為“MADS-boxtranscriptionfactorsMADS11andDAL1interacttomediatethevegetative-to-reproductivetransitioninpine”的研究論文，深入探討了油松中營養(yǎng)生長-生殖生長時相轉(zhuǎn)變調(diào)控的分子機制。北京林業(yè)大學馬晶晶博士為***作者，文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物制備。本研究通過 7 個樹齡的油松樣品轉(zhuǎn)錄組測序，鑒定到一個與年齡信號***相關的基因模塊，該模塊包含 33 個轉(zhuǎn)錄因子，包括 SOC1-like、DAL1 等。河南什么是酵母文庫做什么

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