酵母文庫實驗本研究鑒定了一個可以與MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。實驗表明,MdTRB1可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1與MdMYB9結(jié)合可以增強后者對下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性。而MdTRB1與MdJAZ1的結(jié)合,可以干擾其與MdMYB9的互作,進而負向調(diào)控MdTRB1介導(dǎo)的對花青素和原花青素積累的促進作用。本研究表明,JAZ1-TRB1-MYB9復(fù)合物可以動態(tài)調(diào)控JA介導(dǎo)的花青素和原花青素的積累。本研究為進一步研究JA對花青素和原花青素生物合成的調(diào)節(jié)提供了新見解。篩選酵母文庫選歐易生物技術(shù)可靠服務(wù)高效多年經(jīng)驗。河南生物技術(shù)酵母文庫
酵母雙雜交、GSTpull-down實驗顯示,SWC6可以直接與HY5、HYH相互作用(圖A-C)。pull-down實驗顯示ARP6同樣可以與HY5、HYH相互作用(圖D)。split-LUC、Co-IP實驗證實HY5可以與SWC6、ARP6結(jié)合(圖E-J)。下胚軸表型分析顯示,藍光下arp6hy5hyh三突變體下胚軸長度明顯大于arp6突變體、hy5hyh雙突變體,表明ARP6和HY5有可能通過不同途徑調(diào)控下胚軸的發(fā)育。Semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗顯示,藍光下,在 CRY1 存在下,SWC6 與 ARP6 的結(jié)合***增強。表明藍光***的 CRY1 可能通過藍光依賴的 CRY1-SWC6/ARP6 相互作用增強 SWC6 與 ARP6 的結(jié)合。河南生物技術(shù)酵母文庫酵母單雜交/雙雜交文庫構(gòu)建簡述酵母雙雜交。
通過酵母雙雜篩選實驗,進一步研究AaWRKY9蛋白功能,結(jié)果篩選到了與AaWRKY9互作的AaJAZ9蛋白,并通過Y2H、BiFC、CoIP等進行了驗證確認。JAZs是JA介導(dǎo)的植物相應(yīng)中的負向調(diào)控因子,在毛狀體和老葉中高表達,在芽尖和嫩葉中表達量低。為確認AaJAZ9是否抑制了AaWRKY9在促進青蒿素積累過程中的轉(zhuǎn)錄***功能,通過雙熒光素酶報告基因檢測實驗發(fā)現(xiàn),當(dāng)AaWRKY9與AaJAZ9共表達時,其轉(zhuǎn)錄活性被抑制,而使用MeJA處理后,這種抑制作用被抵消,且AaWRKY9轉(zhuǎn)錄活性增強,反向驗證實驗結(jié)果一致。說明JA可以通過降解JAZ9,提高AaWRKY9轉(zhuǎn)錄活性,促進青蒿素生物合成。
水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫篩選服務(wù):2021 年 10 月 12 日,中國科學(xué)院分子植物科學(xué)***創(chuàng)新中心王二濤研究員為通訊作者,在 Cell 上發(fā)表了題為“A phosphate starvation response-centered network regulates mycorrhizal symbiosis”的封面論文。文章***報道了水稻-叢枝菌根共生轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò),發(fā)現(xiàn)植物直接營養(yǎng)吸收途徑與通過叢枝菌根共生的間接營養(yǎng)吸收途徑均受到磷信號網(wǎng)絡(luò)的統(tǒng)一調(diào)控,回答了菌根共生領(lǐng)域“自我調(diào)節(jié)”這一困擾領(lǐng)域的重要科學(xué)問題。分子植物科學(xué)***創(chuàng)新中心博士后石進彩為***作者,歐易生物肖云平也參與了此項研究。文章中水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫篩選服務(wù)由歐易生物提供。酵母雜交案例專業(yè)的碩博團隊。
利用酵母雙雜交技術(shù)進行篩選,結(jié)果顯示SP8可以與水稻OsMYC3蛋白相互作用,并且二者互作關(guān)系通過酵母一對一互作、BiFC、Co-IP、LCI實驗得以驗證(圖A-C)。利用截短的SP8進行酵母一對一互作和Co-IP檢測表明,與OsMYC3的結(jié)合依賴于SP8的NTP結(jié)構(gòu)域(圖D-E);同樣,OsMYC3的TAD結(jié)構(gòu)域也是二者互作所必不可少的(圖F)。酵母雙雜交、BiFC實驗表明,OsMYC3可以與OsJAZ相互作用。經(jīng)茉莉酸處理,野生對照株根的長度明顯被抑制、一系列JA生物合成和信號傳導(dǎo)相關(guān)基因表達量上升,但Osmyc3突變體中抑制程度減輕、JA相關(guān)基因表達量上升減少。酵母文庫能夠完美解決上述的問題,且一個文庫可以并不是只有一個人可以用。北京實力酵母文庫做什么
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根系是植物從土壤中吸收水分、養(yǎng)分和感知環(huán)境刺激的獨特***。根系結(jié)構(gòu)的優(yōu)化有助于提高植株的抗逆性和產(chǎn)量。ERF(ETHYLENERESPONSIVEFACTOR)是植物特有的轉(zhuǎn)錄因子家族之一,與植物的多種發(fā)育過程和抗逆性有關(guān)。ERFs在擬南芥和水稻根系發(fā)育中的作用已經(jīng)多有報道,但小麥ERFs在根系發(fā)育中的作用尚待研究。報道了小麥 TaSRL1 轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控根長的分子機制。文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物完成。從小麥基因組中克隆了 TaSRL1 基因,RT-PCR 顯示 TaSRL1 主要在小麥苗期的根中表達。對 TaSRL1 啟動子序列進行預(yù)測分析。河南生物技術(shù)酵母文庫
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