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PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)的作用下,由一對(duì)特異性引物經(jīng)熱變性-退火-延伸反應(yīng),三個(gè)不同溫度的循環(huán)處理使得DNA由少量擴(kuò)增到多量的一種體外DNA擴(kuò)增技術(shù)。在反應(yīng)體系內(nèi),以一對(duì)人工合成的寡核苷酸作為擴(kuò)增引物,第一步,模板DNA變性,以構(gòu)成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物,目的基因作為模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA經(jīng)過(guò)80-90℃高溫變性,使模板DNA雙鏈經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈解離成單鏈。第二步,模板DNA與引物退火(復(fù)性),模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃,引物與模板DNA單鏈互補(bǔ)配對(duì)。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物結(jié)合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP為反應(yīng)原料半保留復(fù)制合成一條新的模板DNA鏈。這三個(gè)步驟為一個(gè)循環(huán),2-4分鐘即可完成一個(gè)循環(huán),2-3小時(shí)就能使極微量的DNA、片段、甚至單拷貝基因復(fù)制到幾百萬(wàn)倍,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)靶DNA的放大。由于擴(kuò)增堿基序列按照靶DNA復(fù)制,因此PCR反應(yīng)具有高度特異性。巧亦捷為寵物醫(yī)院、獸醫(yī)師們、寵物主及其愛寵帶來(lái)高效便捷的寵物PCR核酸檢測(cè)解決方案??焖貾CR分析儀
巧亦捷全自動(dòng)薄膜微流控核酸檢測(cè)儀器擁有多種重技術(shù),保障結(jié)果準(zhǔn)確:其采用Taqman熒光探針和經(jīng)典PCR擴(kuò)增技術(shù),能夠?qū)⑸飿?biāo)志物精確定量,同時(shí)輸出Ct值和擴(kuò)增曲線,結(jié)果判讀簡(jiǎn)潔明了;質(zhì)控更全1面,結(jié)果更可靠,設(shè)備體積小巧,便于搬運(yùn)和攜帶,可在多種場(chǎng)景下隨心使用,且薄膜微流控芯片為封閉系統(tǒng)操作,可很大程度避免人為和環(huán)境的污染,降低對(duì)檢測(cè)環(huán)境的要求,以及對(duì)檢測(cè)人員的要求。更適合寵物醫(yī)院、獸醫(yī)站、養(yǎng)殖場(chǎng)等多種使用場(chǎng)景。蘇州分子檢測(cè)PCR檢測(cè)技術(shù)巧亦捷核酸一體機(jī)采用的磁珠法對(duì)樣本的要求低,可有效去除污染物,避免接下來(lái)的PCR反應(yīng)出現(xiàn)問(wèn)題。
巧亦捷推出的核酸檢測(cè)一體機(jī)可以實(shí)現(xiàn)多種聯(lián)檢,比如貓的呼吸道有癥狀,可能傳染原因包括皰疹病毒、衣原體、支原體等,到底是哪種情況?其實(shí)醫(yī)生很難判斷,通過(guò)多重PCR檢測(cè)試劑,可提高檢出率,降低操作復(fù)雜度。不需要一個(gè)病原一個(gè)病原去測(cè),一個(gè)反應(yīng)就可以把3種病原同時(shí)檢測(cè)。極大減少了獸醫(yī)師的檢測(cè)時(shí)間及檢測(cè)成本。且巧亦捷核酸一體機(jī)的設(shè)計(jì),可有效避免PCR擴(kuò)增時(shí)可能產(chǎn)生的污染,因?yàn)槠鋵?shí)PCR基于本身原理,敏感性很高,實(shí)際上大多數(shù)污染產(chǎn)生于擴(kuò)增過(guò)程中,比如說(shuō),在擴(kuò)增過(guò)程中造成PCR體系泄漏,就會(huì)比較嚴(yán)重,而通過(guò)薄膜微流控技術(shù),全封閉的檢測(cè)試劑及檢測(cè)過(guò)程,可比較大限度減少污染。
巧亦捷核酸一體機(jī)采用的TaqMan探針?lè)ń榻B:TaqMan探針?lè)ㄊ蔷哂懈叨忍禺愋缘亩縋CR技術(shù)。它的工作原理是在PCR反應(yīng)體系中存在一對(duì)PCR引物和一條探針,探針的5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán),3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán),探針只與模板特異結(jié)合,其結(jié)合位點(diǎn)在兩條引物之間。當(dāng)探針完整的時(shí)候,報(bào)告基團(tuán)的熒光能量被淬滅基團(tuán)吸收,所以儀器搜集不到信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)展,Taq酶遇到探針,利用3′→5′外切核酸酶的活性把探針切斷,導(dǎo)致報(bào)告基團(tuán)的熒光能量不能被淬滅基團(tuán)吸收,產(chǎn)生了熒光信號(hào),因此信號(hào)的強(qiáng)度就代、表了模板DNA的拷貝數(shù)。PCR檢測(cè)普及率越來(lái)越高,PCR檢測(cè)正處于高速發(fā)展階段,未來(lái)寵物PCR檢測(cè)市場(chǎng)前景良好。
巧亦捷核酸檢測(cè)一體機(jī)能“穩(wěn)、準(zhǔn)、快”的檢測(cè)出禽病。以犬瘟為例,CDV經(jīng)由鼻、咽和上呼吸道侵入機(jī)體后首先在其附近的淋巴結(jié)和扁挑體中增殖,動(dòng)物表現(xiàn)為ZUI初的體溫升高和白細(xì)胞減少(主要是淋巴細(xì)胞減少)。傳染第、一周會(huì)出現(xiàn)病毒血癥,通過(guò)血液循環(huán),CDV散布到全身的淋巴器1官、骨髓和上皮結(jié)構(gòu)的固有膜,身體的所有分泌物中開始向外排毒。因此在病毒傳染初期是無(wú)法在眼鼻分泌物中采集到病毒的,即便有少量病毒存在,膠體金試紙板也很難檢測(cè)出正確的結(jié)果。這是由于膠體金試紙板上包被的抗體需要和特異抗原結(jié)合后再和預(yù)先包被的二抗結(jié)合才能顯示結(jié)果,這其中需要的抗原(病毒)量較多。而PCR檢測(cè)是將抗原進(jìn)行擴(kuò)增,只要存在抗原就可以通過(guò)特異性引物進(jìn)行擴(kuò)增,產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳,可見到預(yù)期大小的DNA條帶出現(xiàn),從而對(duì)病原體的基因組片段作出鑒定。因此,我們更推薦獸醫(yī)師們使用巧亦捷核酸檢測(cè)一體機(jī)。寵物IVD檢測(cè)是寵物醫(yī)院必備手段,其中PCR檢測(cè)目前是ZUI準(zhǔn)確的檢測(cè)方法。豬病診斷PCR
巧亦捷核算檢測(cè)一體機(jī)從樣本處理開始,所有檢測(cè)項(xiàng)目可在30-60分鐘完成,自動(dòng)生成報(bào)告,檢測(cè)效率極大提高??焖貾CR分析儀
巧亦捷核酸一體機(jī)使用情況:1:懷疑動(dòng)物患有傳染性疾病:PCR技術(shù)在檢測(cè)傳染病病原方面有很多優(yōu)勢(shì),特別適用于犬貓傳染性疾病的檢測(cè)。如檢測(cè)疾病處于潛伏期以及臨床尚未有其他合適的檢測(cè)方法時(shí)或一些難以進(jìn)行培養(yǎng)的可疑病原體,都可以選擇PCR檢測(cè)技術(shù)。:舉例:貓鼻氣管炎是由貓皰疹病毒引起的一類貓上呼吸道疾病,當(dāng)貓傳染皰疹病毒后,會(huì)表現(xiàn)出一系列的上呼吸道癥狀,醫(yī)師若想診斷該病,即可選擇進(jìn)行貓皰疹病毒PCR檢測(cè)。2、準(zhǔn)確判斷致病病原體:對(duì)于一些臨床癥狀較為相似的疾病,利用PCR檢測(cè)的高度特異性能夠準(zhǔn)確判斷致病病原體。舉例:貓皰疹病毒,杯狀病毒傳染,貓衣原體傳染引起的肺炎,在臨床上均顯示出相似的上呼吸道癥狀。由于PCR技術(shù)具有高度特異性,PCR檢測(cè)可以從病原體的核酸水平進(jìn)行識(shí)別,將各種病原區(qū)分開來(lái),實(shí)現(xiàn)真正的精確診斷和對(duì)因診療??焖貾CR分析儀