首先,我們來看看無論在植物中還是動物中,無論是葉綠體研究還是線粒體研究中都可以開展的一些研究內(nèi)容:First,比較基因組研究的內(nèi)容,也是**常見的研究內(nèi)容:對已知的基因組進行比較分析,用于了解基因的功能,表達機理及物種進化,通過基因和基因組結(jié)構(gòu)的比較,可以闡釋物種進化關系及基因組的內(nèi)在結(jié)構(gòu)。如18年發(fā)表在《InternationalJournalofMolecularSciences》上的四種菊科植物的葉綠體基因組研究中,就利用比較基因組的方法,直觀展現(xiàn)了蒲公英科植物葉綠體基因組的序列多樣性,也解釋了4種植物葉綠體基因組大小差異的來源。而在18年發(fā)表在《BMCGenomics》雜志的虎耳草科植物葉綠體基因組研究中[2],則通過比較基因組系統(tǒng)說明5種虎耳草植物的葉綠體基因組保守性。不**于此,通過IR區(qū)的擴張與收縮研究,可以獲悉導致相關基因拷貝數(shù)的變化,或者導致邊界區(qū)域假基因的產(chǎn)生,以此來描述造成不同譜系間葉綠體基因組大小差異的原因。同時,比較參考基因組,也可以比較獲得樣本基因組中的SNP,InDel,SV等信息,當然這些信息除了便于我們統(tǒng)計各類標記的分布,也可以比較研究樣本基因組與參考基因組的結(jié)構(gòu)差異。 小基因組測序建庫測序需要多久?廣東線粒體小基因組測序多少錢
采用二代IlluminaHiseq結(jié)合三代PacBio測序技術(shù)對樣本DNA進行基因組測序,分別構(gòu)建了IlluminaPE文庫(300-500bp)和PacBio文庫(8~10kb),對獲得的測序數(shù)據(jù)利用生物信息學分析方法完成基因組完成圖繪制。信息分析主要分為6大步驟:1.下機數(shù)據(jù)質(zhì)控。過濾測序質(zhì)量值低的reads,過濾duplicationreads,獲得高質(zhì)量的Cleandata;2.基因組組裝。利用組裝軟件對Cleandata進行組裝,多次調(diào)整參數(shù)及補洞后獲得基因組完成圖序列;3.基因組組分分析。組裝完成后,分析樣品的基因組組分,包括編碼基因、ncRNA等;4.基因功能注釋。與通用功能數(shù)據(jù)庫比對獲得樣本的基因功能注釋信息,并對特定功能進行分類;5.比較基因組分析。從基因組、基因兩個層面比較樣品與參考基因組的差異,包括共線性比較,SNP、Indel、SV檢測,Core-Pan分析,物種進化分析等;6.基因組可視化分析。將編碼基因、ncRNA、基因組GC%等信息以圈圖的形式展示。 江蘇物種分類小基因組測序銷售云生物專業(yè)致力于小基因組測序服務。
編碼基因分析:基因是控制生物性狀的遺傳單位,即一段具有遺傳效應的功能性DN**段。它通過指導蛋白質(zhì)的合成來表達自己所攜帶的遺傳信息,從而控制生物個體的性狀表現(xiàn),特有基因的存在導致個體有特殊的功能。研究基因是研究生物個體的首要目標。我們采用同源比對預測和Denovo預測相結(jié)合的方法對樣本基因組進行基因預測。我們利用參考基因組的蛋白序列來進行同源比對預測,先把蛋白序列快速比對到樣本基因組序列,過濾不好的比對結(jié)果,去冗余,然后運行Genewise做精確比對。AUGUSTUS軟件可對線粒體/葉綠體基因組進行Denovo基因預測。***對基因集進行校正、整合,得到樣品基因組編碼基因。
2018年《ScientificReports》發(fā)表了五味子植物的葉綠體進化研究[3],就通過葉綠體基因組的SSR研究等,討論了物種的動態(tài)演化過程??梢?,通過對序列信息的深入解析,就可以獲得包括物種分類,系統(tǒng)進化,地理譜系遺傳等信息——無論是動物還是植物,無論是葉綠體研究還是線粒體研究,都可以實現(xiàn)系統(tǒng)進化和選擇壓力的分析。除此以外,我們可以將所有樣本中均存在的同源基因作為共有基因(Coregene),去掉共有基因后,得到非共有基因(Dispensablegene)。特有基因(Specificgene)為只有該樣品特異擁有的基因。所有非共有基因與共有基因合并作為泛基因集(Pangene)。其***有基因(Coregene)和特有基因(Specificgene)很可能與樣品的共性和特性相對應,可以作為樣本間功能差異的研究依據(jù)。葉綠體和線粒體基因組研究,圓滿真的不止步在一個圓,透過各式各樣的比較基因組分析,可以撰寫出許多精彩絕倫的故事來。 云生物自主研發(fā)的Enrichment富集技術(shù),可降低核DNA污染,將總DNA中靶細胞器基因組比例提升。
植物葉綠體基因組在基因順序和基因含量方面都是高度保守的,并且具有較低的進化速率。在此,我們以五味子科為例,通過系統(tǒng)發(fā)育學分析,對葉綠體基因組的整體進化動力學進行深入了解,并建立了基于葉綠體基因組的五味子科的系統(tǒng)發(fā)育關系。與其他高等植物相似,南五味子(Kadsuracoccinea)的葉綠體基因組具有典型的四方結(jié)構(gòu),具有兩個反向重復序列(IR,16,536bp),由一個小的單拷貝區(qū)域(SSC,18,040bp)和一個大的單拷貝區(qū)域(LSC,94,301bp)分開(下圖)。相比參考基因組八角茴香(Illiciumoligandrum,148,553bp)的基因組小kb,比五味子(Schisandrachinensis)大kb。序列長度差異主要歸因于基因間隔區(qū)長度的變化。 專業(yè)生物信息團隊,提供人工基因注釋矯正,滿足NCBI數(shù)據(jù)庫上傳要求,高質(zhì)量結(jié)果交付,助力高水平研究。湖北葉綠體小基因組測序報價
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基因組組裝:首先,利用ABySS v2.0.2初步組裝Illumina測序數(shù)據(jù),然后利用blasR比對Pacbio三代數(shù)據(jù),根據(jù)比對結(jié)果對單分子測序數(shù)據(jù)進行一次矯正與糾錯,目的在于減少單分子長序列中單堿基、插入缺失的錯誤;***利用糾正過的單分子測序數(shù)據(jù)與二代數(shù)據(jù)進行混合組裝,使用的軟件是SPAdes-3.10.1;挑選覆蓋深度足夠高且組裝長度較長的序列作為候選序列,比對NT庫確認;***再次利用Illumina數(shù)據(jù)進行校驗,得到**終的組裝結(jié)果?;蚪M組分分析:通過多種方法對編碼基因、非編碼RNA等進行預測,獲取測序樣本基因組的組成情況。廣東線粒體小基因組測序多少錢