EdU上的乙炔基能與生物素標記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反應(yīng)非常迅速，被稱作點擊反應(yīng)(Clickreaction)，其反應(yīng)原理參見圖1。通過點擊反應(yīng)，新合成的DNA會被相應(yīng)的生物素探針所標記，從而可以使用適當?shù)臋z測設(shè)備檢測到增殖的細胞。EdU檢測法中的點擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細胞DNA中的EdU，在銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，終使細胞DNA標記上生物素等探針上海東寰告訴您EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好？江西口碑好的EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

細胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細胞固定液，室溫培養(yǎng)30分鐘，棄固定液；(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸，搖床孵育5分鐘，以中和過量的多聚甲醛；(c)棄甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理，固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應(yīng)用于流式細胞儀檢測。江西咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒評價EdU細胞增殖檢測試劑盒，有哪些好處值得選擇？

該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理，固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應(yīng)用于流式細胞儀檢測。建議染色完成后立即進行熒光顯微鏡拍照觀察；如果條件限制，請于4°C條件下避光濕潤保存3天之內(nèi)完成拍照。若為細胞爬片或涂片，可使用抗熒光淬滅封片劑進行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性，只需溫和的細胞固定化和透化處理，能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細胞內(nèi)抗原識別位點，操作步驟更加快速、靈敏和準確

EdU（5-溴-2-脫氧尿嘧啶）試劑盒是一種嘧啶類似物，可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。通過以上原理圖的對比，大家不難發(fā)現(xiàn)，EdU法檢測細胞增殖，無須抗體，無變性步驟，保持細胞形態(tài)和DNA完整性，是一種簡單，可靠，省事的創(chuàng)新方法。但是，現(xiàn)在依然有很多研究者們依然沒有得到細胞增殖檢測*行之有效，節(jié)約反應(yīng)時間的方法。Abbkine的EdU檢測試劑盒有兩個型號，分別匹配的是兩種不同的熒光通道，細胞增殖成像分析試劑盒（EdU法）(綠色熒光)，KTA2030，488通道；細胞增殖成像分析試劑盒（EdU法）(橘紅色熒光)，KTA2031，549通道EdU細胞增殖檢測試劑盒對如今市場的影響。

BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測原理的比較。A.BrdU法需使用大分子的BrdU抗體，由于空間位阻，雙鏈DNA須變性后才能使BrdU抗體與BrdU結(jié)合。法使用小分子標記的疊氮化物(Azide)，無需DNA變性，操作更便捷，兼容性好，檢測結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。本試劑盒檢測快速。相對于BrdU法，本試劑盒采用BeyoClick?EdU法檢測新合成的DNA，所需時間縮短。經(jīng)本試劑盒處理后，增殖的細胞呈棕色，可以用普通光學(xué)顯微鏡進行觀察。HeLa細胞用本試劑盒檢測細胞增殖的效果參見圖3。圖3.HeLa細胞用本試劑盒檢測細胞增殖的效果圖。無EdU組觀察不到棕色染色(左側(cè)一列)；EdU(10μM)孵育2小時組有明顯的棕色染色(中間一列)；而用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)提前預(yù)處理0.5小時后，棕色染色減弱，說明DNA合成被抑制后，EdU的摻入被抑制(右側(cè)一列)。EdU細胞增殖檢測試劑盒的運用領(lǐng)域有哪些？福建咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

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磺酰羅丹明B細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒(SμlforhodamineB,SRB)是一種替代MTT法的細胞活性檢測方法。SRB可與生物大分子中的堿性氨基酸結(jié)合，在490nm～520nm波長處其OD值與活細胞數(shù)成良好的直線關(guān)系。在515nm的OD讀數(shù)，可用做細胞數(shù)的定量。儲存條件：2-8℃避光保存。有效期：一年。注意事項：●本試劑盒供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或?！窠古c其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果?！癖容^好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑?！癖苊馄つw或粘膜與試劑接觸。●正式實驗前，建議先做幾個孔摸索接種細胞的數(shù)量，在1000-100000之間摸細胞數(shù)量。產(chǎn)品特點：●操作時間短，細胞固定和染色需90分鐘左右?！駴]有嚴格時間限制，固定后或SRB結(jié)合后的細胞均可存放，樣品7天后測定的OD值下降不超過2%?！馭RB法對于測定懸浮細胞無細胞損失，結(jié)果靈敏準確，重復(fù)性好。江西口碑好的EdU細胞增殖檢測試劑盒原理