如何儲存和解凍血清才不會使產品質量受損?未拆封的血清,一般情況下應存放于-10℃至-20℃,在產品規(guī)定的效期內均可使用,若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內,再放回冷凍。將血清從冷凍冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融,或通過水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。完全溶解后建議盡快使用,若長時間儲存在2-8℃,血清中的各種(脂)蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可見的混濁。胎牛血清中含有大量對細胞生長必需的生長因子。黃山標準血清
胎牛血清的生產工藝:胎牛血清適合脈沖示蹤實驗(同位素標記研究細胞代謝)適合轉染CHO后的篩選,避免外源小分子對細胞產生干擾。透析胎牛血清是在胎牛血清的基礎上進行加工的。胎牛血清在無菌條件下要經過0.1微米膜三重過濾,要進行一系列的檢測,包括理化性質檢查(如滲透壓和pH值),成分檢查(如內的毒性和血紅蛋白)、外源因子檢查(如細菌、病毒和支原體)以及促進細胞增殖的檢查等。透析胎牛血清為保證其性能和安全性,也需具備胎牛血清的這些工藝和檢查。黃山標準血清FBS的常見處理方法是熱滅活,其中將FBS在56°C的水浴中加熱30分鐘,偶爾搖晃。
活性炭處理胎牛血清的應用:活性炭處理胎牛血清主要用于受體研究和雌Hormone相關的細胞研究實驗。同時活性炭處理胎牛血清極大的降低了多種Hormone和生長因子,減少了影響細胞生化分析的干擾因子。性炭處理胎牛血清減少了血清中的類固醇類化合物,3x100nm無菌過濾內的毒性≤10EU/mL,血紅素≤20mg/dL。胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質較高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分較少。
如何區(qū)別真假胎牛血清:1、血紅蛋白,標準為不高于20mg/dl,顏色越紅,數值越高,反之,數值越低。2、pH,國產血清,大多高于7.5,進口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關,這也能用來初步鑒別血清的來源。3、微生物。包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性的病毒等。隨著國內血清廠家生產條件的改善提高,細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制,支原體經過0.1um過濾,大多也能清理。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴重的,主要是生產環(huán)境過程中帶入,又無法過濾,很難徹底清理,但對血清質量影響不大。病原性的病毒,特別是BVDV,在國產血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國產血清質量的重要因素之一,而進口胎牛血清中基本都控制的很好。倘若把胎牛血清存放在4℃冰箱,請不要超過一個月。
胎牛血清都有哪些重要的指標:一、內的毒性,內的毒性是革蘭氏陰性菌的細胞壁外壁層上的特有成分。當細菌死亡自溶或粘附在其它細胞時,才表現其毒性。內的毒性直接參與細胞凋亡,血清中內的毒性含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內的毒性含量過高,會直接導致細胞提前老化。國際上規(guī)定,胎牛血清的級別,應以內的毒性水平的高低來確定,其中,特級胎牛血清的內的毒性應<10EU/ml。二、血紅蛋白含量,胎牛血清的顏色會根據血紅蛋白含量的不同表現出黃色、淡黃色、橘紅色、微紅色等。細胞培養(yǎng)用血清的標準是血紅蛋白含量不高于20mg/dl,顏色越紅,數值越高;反之,數值越低。實際上,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響。這個指標的意義在于能體現出采的血過程的嚴謹規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的溶血。胎牛血清含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細胞的體外培養(yǎng)。東莞無外泌體血清
為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學成分的分析,都以血清為樣品。黃山標準血清
胎牛血清:胎牛血清用于細胞培養(yǎng)已經超過半個世紀了,20世紀50年代末TheodorePuck在細胞和組織培養(yǎng)中初次加入胎牛血清(FBS)來刺激細胞生長。后來人們發(fā)現,由于胎牛未進食過母乳,所以IgG的含量極低,不會阻礙細胞生長,而且胎牛血清中含有豐富的促進細胞生長的成分,如維生素、運輸蛋白、微量元素、生長因子等,胎牛血清生產的一切環(huán)節(jié)均有嚴格的質量把控。出廠的血清無細菌、支原體和病毒等微生物的威脅,且內的毒性含量低,滿足絕大多數細胞培養(yǎng)需求。黃山標準血清
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